以黃金勾為代表的菜豆品種是東北黑土區(qū)重要的雜糧與蔬菜,深受民眾喜愛。目前,菜豆基因克隆和功能解析處于起步階段。為快速克隆菜豆基因,科學(xué)家在前期制備了一個(gè)菜豆黃金勾品種大龍1號(hào)的突變體庫。在該突變體庫中,研究篩選得到一個(gè)雄性不育突變體ms-2(male sterility 2,圖A)。為了利用雜種優(yōu)勢來提高作物產(chǎn)量,雄性不育特性在較多作物中的研究較為深入。在菜豆中,雖已觀察到雄性不育現(xiàn)象,但沒有克隆相關(guān)的基因,特別是沒有探究其相關(guān)的機(jī)理。
中國科學(xué)院東北地理與農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所利用SNP測序和自主設(shè)計(jì)的菜豆InDel分子標(biāo)記,通過圖位克隆的方法精細(xì)定位了菜豆雄性育性基因MS-2為Phvul.003G031200基因;在ms-2突變體中Phvul.003G031200基因剪切位點(diǎn)發(fā)生變異,使得蛋白質(zhì)序列缺少3個(gè)氨基酸;利用石蠟切片觀察小孢子體發(fā)育過程,發(fā)現(xiàn)MS-2基因的剪切位點(diǎn)變異導(dǎo)致絨氈層降解提前是ms-2突變體雄性不育的原因。ms-2突變體可結(jié)實(shí)大量的無籽肉莢,外源噴施2 mM生長素物質(zhì)吲哚乙酸(IAA)能使ms-2突變體上的肉質(zhì)無籽莢的莢長、莢寬、莢厚和單莢鮮重顯著增加,且體積增大的無籽肉莢具有加工或直接食用的潛能。本研究定位與克隆了菜豆雄性育性基因MS-2,明確了該基因突變導(dǎo)致菜豆不育的機(jī)理。MS-2基因可應(yīng)用于培育肉質(zhì)無籽莢菜豆品種,具有很好的應(yīng)用價(jià)值,這為雜種優(yōu)勢的利用奠定了堅(jiān)實(shí)的理論基礎(chǔ)。
近期,相關(guān)研究成果發(fā)表在Theoretical and Applied Genetics上。研究工作得到中科院戰(zhàn)略性先導(dǎo)科技專項(xiàng)、國家自然科學(xué)基金和東北地理所青年科學(xué)家小組項(xiàng)目的支持。