在飲品生產(chǎn)加工領(lǐng)域中，一般添加各種各樣食用添加劑用于改進(jìn)飲品的口味、質(zhì)量和顏色，并能延長(zhǎng)保存期。飲品中常用的食用添加劑包含甜味素(糖精鈉)、人造黑色素(日落黃、亮藍(lán)、莧菜紅、誘惑紅、檸檬黃、焦糖色)、添加劑(山梨酸、苯甲醛)及咖啡堿等。雖然在我國(guó)國(guó)家行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中早已明文規(guī)定了食用添加劑容許采用的標(biāo)準(zhǔn)和使用量，但長(zhǎng)期性、很多服用帶有食用添加劑的飲品，一樣會(huì)對(duì)身體健康產(chǎn)生一定的風(fēng)險(xiǎn)性。因而，檢驗(yàn)飲品中多種多樣食用添加劑的成分對(duì)確保食品衛(wèi)生安全具備關(guān)鍵實(shí)際意義。

近些年，與此同時(shí)檢驗(yàn)多種多樣食用添加劑的辦法愈來(lái)愈多，常見(jiàn)的檢查辦法有高效液相色譜色譜法、薄層色譜法、質(zhì)譜分析聯(lián)使用方法、氣相色譜分析、極譜法等。殊不知，針對(duì)多組分混合物質(zhì)的剖析，絕大多數(shù)方式均存在一定的局限。如薄層色譜法測(cè)量多組分混合物質(zhì)時(shí)，操作流程繁雜，且定量分析精確度較弱；色譜儀一質(zhì)譜分析聯(lián)使用方法盡管在屏幕分辨率和敏感度這方面有一定優(yōu)點(diǎn)，但其儀器設(shè)備價(jià)格昂貴、不容易普遍推廣；極譜法易受各種影響要素的危害，判定比較艱難；液相色譜儀法是當(dāng)前使用最普遍的統(tǒng)計(jì)分析方法，但傳統(tǒng)式的液相色譜儀法針對(duì)與此同時(shí)檢驗(yàn)多組分混合物質(zhì)時(shí)，剖析用時(shí)長(zhǎng)、氣相量大、檢驗(yàn)高效率低。

本科學(xué)研究運(yùn)用極高液相色譜儀技術(shù)性與此同時(shí)快速檢測(cè)日落黃、亮藍(lán)、莧菜紅、誘惑紅、檸檬黃、焦糖色、山梨酸、苯甲醛、糖精鈉及咖啡堿等10種食用添加劑，可大幅提高多種多樣成分的分離出來(lái)工作能力，提升 了剖析速率及敏感度，為食品衛(wèi)生安全的檢查帶來(lái)了必不可少的服務(wù)支持。

一、試驗(yàn)一部分

1、關(guān)鍵設(shè)備和實(shí)驗(yàn)試劑
儀器設(shè)備：超高效率液相色譜[watersAcquiryH-Class，配二極管列陣探測(cè)器(PDA)，Empower3色譜儀工作平臺(tái)]；ACQUITYUPLCBEHC18(2.1mm×50mm,1.7μm)；紫外線由此可見(jiàn)光度計(jì)(SP-1900UV)；漢語(yǔ)顯示屏超聲波清洗器(昆山市美美噠超聲波儀器設(shè)備有限責(zé)任公司)；TB-214型1/萬(wàn)分之一電子分析天平(北京市賽多利斯)；快速冷凍離心機(jī)(T11eIulloFisher)；超純水機(jī)(Millipore公司)；0.22μm微孔濾膜過(guò)濾裝置。

標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：日落黃、亮藍(lán)、莧菜紅、檸檬黃、焦糖色、咖啡堿標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)濃度值均為0.5mg/mL，誘惑紅、混和水溶液(苯甲醛、山梨酸、糖精鈉)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)濃度值均為1.0mg/mL，均購(gòu)白中國(guó)計(jì)量科學(xué)院。

實(shí)驗(yàn)試劑：乙酸銨(優(yōu)級(jí)純、CNWAmmoniumacetateforHPLC)；工業(yè)甲醇(色譜純、英國(guó)MERCK企業(yè))；乙腈(色譜純、英國(guó)MERCK企業(yè))；試驗(yàn)自來(lái)水均由Milli-Q超純水機(jī)制得。50μg/mL10種添加物混和規(guī)范貯備液配備：各自精確汲取2.5mL濃度值均為0.5m∥mL的日落黃、亮藍(lán)、莧菜紅、檸檬黃、焦糖色、咖啡堿標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)及1.25mL濃度值均為1.0mL誘惑紅、混和水溶液(苯甲醛、山梨酸、糖精鈉)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)于25mL容量瓶中，自來(lái)水滴定劑至標(biāo)尺。

混和規(guī)范系列產(chǎn)品：精確汲取一定容積的混和規(guī)范貯備液(50μg/mL)各自配置成濃度值為0、0.05、1.0、5.0、10.0、20.0、40.0、50.0μg/m標(biāo)液系列產(chǎn)品。

2、色譜儀標(biāo)準(zhǔn)

離子交換柱為ACQUITYUPLCBEHC18(2.1mm×50mm，1.7μm)，柱溫30℃，進(jìn)樣量：3μL，流動(dòng)速度為0.15mL/min，檢驗(yàn)光波長(zhǎng)為230nm。流動(dòng)性相各自為工業(yè)甲醇(A)和0.02mol/L乙酸銨(B)，流動(dòng)性相的梯度方向過(guò)柱程序流程如下所示表所顯示：

二、結(jié)果與探討

1、試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)的提升

（1）離子交換柱的挑選
本實(shí)驗(yàn)考查了離子交換柱ACQUITYUPLCBEHC18(2.1mm×50mm，1.7μm)與色譜儀ACQUITYUPLCBEHC18(2.1mm×100mm,1.7μm)的分離出來(lái)實(shí)際效果。結(jié)果顯示，挑選柱長(zhǎng)為100mm的離子交換柱時(shí)，每組分離出來(lái)峰時(shí)間增加，而且色譜儀峰響應(yīng)值低；而挑選柱長(zhǎng)為50mm離子交換柱時(shí)，全部成分混合物質(zhì)可在10min內(nèi)達(dá)到迅速剝離的必須 ，所得的峰形銳利且分離度好。因而，本實(shí)驗(yàn)挑選ACQUITYUPLCBEHC18(2.1mm×50mm，1.7μm)做為方式最好離子交換柱。

（2）檢驗(yàn)光波長(zhǎng)的挑選

用紫外線-由此可見(jiàn)光度計(jì)在200～800nm光波長(zhǎng)處對(duì)10種食用添加劑開(kāi)展掃描儀，自來(lái)水作對(duì)照品。

其基本色峰：焦糖色428nm、日落黃475nm、引誘紅506nm、煙脂紅511nm、莧菜紅522nm、亮藍(lán)637nm、苯甲醛228nm、山梨酸248nm、糖精鈉251nm、咖啡堿273nm，可基本判定判斷10種食用添加劑在紫外線-由此可見(jiàn)光度計(jì)的最高消化吸收光波長(zhǎng)。再運(yùn)用UPLC-PDA探測(cè)器在200～600nm光波長(zhǎng)范疇內(nèi)對(duì)混和標(biāo)液開(kāi)展掃描儀，發(fā)覺(jué)在230nm光波長(zhǎng)處10種食用添加劑分離度好、敏感度高，故最后挑選230nm做為檢驗(yàn)光波長(zhǎng)。

（3）流動(dòng)性相的挑選

本實(shí)驗(yàn)各自調(diào)查乙腈/工業(yè)甲醇-乙酸銨緩沖溶液，乙腈/工業(yè)甲醇-磷酸二氫鉀緩沖溶液，乙腈/工業(yè)甲醇-水緩沖溶液做為流動(dòng)性相管理體系的分離出來(lái)實(shí)際效果。結(jié)果顯示，當(dāng)流動(dòng)性相為工業(yè)甲醇-乙酸銨緩沖溶液時(shí)，10種總體目標(biāo)物完成徹底分離出來(lái)，與此同時(shí)本實(shí)驗(yàn)對(duì)乙酸銨物質(zhì)的量濃度各自為10、20、40mmol/L開(kāi)展了較為。結(jié)果顯示，當(dāng)乙酸銨濃度值低于20mmol/L時(shí)，苯甲醛和山梨酸色譜儀峰無(wú)法得到徹底分離出來(lái)，亮藍(lán)和咖啡堿色譜儀峰重合在一起(見(jiàn)圖3a)；當(dāng)乙酸銨濃度值超過(guò)20mmol/L時(shí)，各成分分離度差，危害方式無(wú)法判定(見(jiàn)圖3b)。除此之外，當(dāng)流動(dòng)性看中酸鹽物質(zhì)的量濃度過(guò)高，非常容易造成UPLC離子交換柱阻塞，危害離子交換柱的柱效。因此本實(shí)驗(yàn)采用工業(yè)甲醇-20mmol/L乙酸銨水溶液做為流動(dòng)性相管理體系，不但能夠改進(jìn)分離出來(lái)效率，還可以做到減少現(xiàn)場(chǎng)采樣的目地。