糖尿病患者為一種以血糖高為基本特征的代謝病，近些年患病率持續(xù)增長(zhǎng)。甘酶緩聚劑被稱作治療糖尿病的第四類藥，能夠 減緩單糖消化吸收，減少飯后血糖高，使甘精胰島素的代謝獲得改進(jìn)。現(xiàn)階段葡萄糖苷酶緩聚劑的由來(lái)具體有3種方式：有機(jī)合成、植物提取物、生物發(fā)酵。綠色植物來(lái)源的葡萄糖苷酶緩聚劑，具備醫(yī)治功效柔和長(zhǎng)久、不良反應(yīng)小、可長(zhǎng)久應(yīng)用等特性。

現(xiàn)階段從綠色植物中獲取獲得的葡萄糖苷酶緩聚劑首要有：黃酮類、黃酮、萜類、酚類化合物、含糖量等。研究發(fā)現(xiàn)，多種多樣植物多糖有抑止α-葡萄糖苷酶的功效，但一部分純天然含糖量的活力與已用以醫(yī)學(xué)的甘酶緩聚劑有一定的差別?；瘜W(xué)修飾是改進(jìn)活力的重要途徑之一，根據(jù)對(duì)含糖量殘基上的甲基、羧基、羥基等官能團(tuán)開(kāi)展裝飾，很有可能會(huì)提高活力或造成新的活力。
川番木瓜為被子植物門番木瓜屬綠色植物貼梗海棠的成熟期果子。廣西百色市凌云縣有充足的川番木瓜資源，其花可作有不錯(cuò)的觀賞性，果子就可以服用又可藥用價(jià)值，有“百益的果”的美譽(yù)。川番木瓜作服用，帶有碳水化合物、礦物、維他命等；作藥用價(jià)值，有清理血管垃圾、降血糖、降血壓、提升 人體免疫力和養(yǎng)肝降酶等作用。

現(xiàn)階段世界各國(guó)對(duì)川番木瓜的活力的分析主要是聚集在有機(jī)物、三萜和黃酮類化合物上，對(duì)川番木瓜含糖量的分析相比較少。研究組研究發(fā)現(xiàn)，川番木瓜含糖量具備抑止α-葡萄糖苷酶的功效，川番木瓜含糖量開(kāi)展羧甲基化裝飾能夠提高對(duì)α-葡萄糖苷酶的抑制效果。不一樣標(biāo)準(zhǔn)下羧基甲化的產(chǎn)品對(duì)α-葡萄糖苷酶的抑制效果有很大的差別。本實(shí)驗(yàn)先提升羧甲基化反映的技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)，再檢測(cè)不一樣取代度的羧甲基含糖量抑酶促反應(yīng)，致力于獲得具備不錯(cuò)抑酶促反應(yīng)的羧甲基化川番木瓜含糖量。

一、原材料與方式

1、原材料、實(shí)驗(yàn)試劑與儀器設(shè)備

原材料：川番木瓜購(gòu)于廣西百色市凌云縣，切成片、晾曬、破碎篩粉預(yù)留。

實(shí)驗(yàn)試劑：蛋白酶k；4-氟苯酚-2-D-吡喃葡萄糖水苷（PNPG）；α-葡萄糖苷酶；阿卡波糖；酒精、氯乙酸、等保、氫氧化鈉溶液等其他實(shí)驗(yàn)試劑均為分析純。

分析純。儀器設(shè)備：E-201-C型pH復(fù)合型電級(jí)；CPA64型電子分析天平；UV-1750紫外線由此可見(jiàn)光度計(jì)；640一IR傅利葉轉(zhuǎn)換光譜分析儀；SMARllAB3Kwx-透射儀；RE-52AA型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器；HitachiSU8220透射電鏡；m-lA-50真空泵冷凍式干燥機(jī)；HHS-21-4電加熱式恒溫水浴鍋。

2、方式

（1）川番木瓜含糖量的提煉及提純生產(chǎn)流程

川番木瓜粉末狀→乙醚流回脫油→85％酒精流回去除黑色素、低聚木糖等小分子水→旋蒸→烘干處理沉淀→添加純凈水萃取法2次→緩解壓力濃縮含糖量萃取液→酒精沉積→離心分離機(jī)得粗多糖→蛋白酶k脫蛋白質(zhì)→Sevag法脫蛋白質(zhì)→活性碳脫黑色素→含糖量液濃縮→酒精沉積→離心分離機(jī)→低溫干燥→得特制含糖量。

（2）羧甲基川番木瓜含糖量的制取

①單要素實(shí)驗(yàn)

選用氫氧化鈉溶液-氯乙酸法制取羧甲基川番木瓜含糖量。稱量0.50g特制川番木瓜含糖量于三口瓶中，添加50mL等保，在常溫狀態(tài)拌和20min，遲緩添加一定含量的NaOH水溶液10mL，再次拌和40min，將一定品質(zhì)氯乙酸添加反映系統(tǒng)中，提溫至一定溫度水浴反映一段時(shí)間，反映結(jié)束后，制冷至室內(nèi)溫度，用稀硫酸調(diào)pH至中性化，裝人透析袋中，用純凈水分析48h，緩解壓力濃縮含糖量水溶液，用3倍90％酒精沉積含糖量，離心分離機(jī)，低溫干燥，得羧甲基川番木瓜含糖量，取小量試品測(cè)取代度。以NaOH使用量、氯乙酸使用量、反映溫度、反應(yīng)速度為單要素，科學(xué)研究各要素對(duì)取代度的危害。

②正交實(shí)驗(yàn)

依據(jù)單要素實(shí)驗(yàn)結(jié)果，選擇NaOH使用量、氯乙酸使用量、反映溫度、反應(yīng)速度為調(diào)查要素，以羧甲基川番木瓜含糖量的取代度為制取指標(biāo)值，開(kāi)展L9（34）正交實(shí)驗(yàn)，提升羧甲基川番木瓜含糖量的配制加工工藝，正交實(shí)驗(yàn)要素水準(zhǔn)設(shè)定見(jiàn)表1。

（3）取代度測(cè)量

羧甲基川番木瓜含糖量的取代度參考參考文獻(xiàn)開(kāi)展測(cè)量。精準(zhǔn)稱量0.05g羧甲基川木含糖量，溶解規(guī)范鹽酸溶液中，置磁力攪拌器中拌和融解，用規(guī)范氫氧化鈉溶液水溶液滴定管，各自記錄下來(lái)pH為2.1和4.3時(shí)耗費(fèi)的NaOH水溶液容積V₁、V₂，取代度按住式測(cè)算。

式中：DS為取代度；

m為羧甲基川木含糖量的品質(zhì)；

c為規(guī)范氫氧化鈉溶液溶液的濃度。

（4）紅外線定量分析

取小量干躁的川番木瓜含糖量、羧甲基川番木瓜含糖量試品與溴化鉀粉末狀混和碾磨后壓片糖果，用光譜分析儀在4000～400cm^-1范疇內(nèi)掃描儀。

（5）透射電鏡外貌剖析

取小量干躁的川番木瓜含糖量與羧甲基川番木瓜含糖量試品放試品臺(tái)子上，置正離子磁控濺射儀中鍍導(dǎo)電性金膜，在5kV髙壓下各自觀查不一樣變大倍率下的表層構(gòu)造。

（6）X透射剖析

取小量干躁的川番木瓜含糖量、羧甲基川番木瓜含糖量試品在X-放射線透射儀上精確測(cè)量X-放射線的抗壓強(qiáng)度，掃描儀視角為5～90，掃描儀速率為7⁰／min。

（7）不一樣取代度羧甲基川番木瓜含糖量對(duì)α-葡萄糖苷酶的抑制效果

各自選擇低、中、高3種取代度的羧甲基川番木瓜含糖量測(cè)量抑止α-葡萄糖水營(yíng)酶的活性，以PNPG為底物，用酶活性測(cè)定檢測(cè)抑制效果。在具塞比色管中試管嬰兒中添加2mLpH為6.8聚磷酸鹽緩沖液，0.2mL0.1U／mL的。α-葡萄糖苷酶，羧甲基川番木瓜含糖量水溶液lmL，攪拌后置攝像頭37℃水浴15min，再添加20mmol／LPNPG0.3mL運(yùn)行反映，在37℃再次反映20min，添加2mL0.1mol／LNa₂C0₃停止反映，測(cè)量400nm處OD值值。每一個(gè)試品反復(fù)3次，取均值，按住式測(cè)算抑止除率。

抑制率％=[Ao-（A₁—A₂）]／Ao×100

式中：Ao為磷酸緩沖液替代含糖量水溶液的OD值；

A₁為添加含糖量水溶液后的OD值；

A₂為磷酸緩沖液替代PNPG的OD值。