由圖3得知,隨NaCl濃度值的上升,溶菌酶的比魅力先升高后降低,當NaCl濃度值為1moL/L時,所得的溶菌酶的比魅力最大,這時的過柱液濃度值適合獲取分離出來溶菌酶。當NaCl濃度值高過1moL/L時,酶的比魅力反倒降低,酶成分轉(zhuǎn)變 卻并不大,很有可能因為溶菌酶在濃度較高的溶液中產(chǎn)生蛋白質(zhì)變性功效造成 。
由圖4得知,當過柱時間為60min時,所得的溶菌酶的比魅力最大,伴隨著過柱時間再次增加,酶成分提升遲緩,酶比魅力反倒降低,綜合性考慮到資金成本費,選中過柱時間為60min。
綜上所述,由單要素實驗效果得知,陽離子交換最佳加工工藝標準為:雞蛋清滲瀝液環(huán)氧樹脂之比10∶2.5,pH9.0,NaCl(過柱液)濃度值1mol/L,過柱時間60min。從而,進一步做Box-Behnken實驗提升正離子互換法標準,試驗設(shè)計及結(jié)果如表2所顯示。
選用DesignExpert8.0.6手機軟件實現(xiàn)剖析,如表3所顯示。由表3得知,擬合模型的P=0.0014<0.05,表明實體模型與具體情況線性擬合優(yōu)良。依據(jù)上述剖析獲知溶菌酶比魅力R1對變量每100mL雞蛋清滲瀝液中環(huán)氧樹脂使用量(A)、NaCl濃度值(B)、雞蛋清滲瀝液pH值(C)、過柱時間(D)的多元線性回歸方程式為:
R1=20866.66-1432.26A 194.18B 486.75C 539.58D-961.62AB-1252.19AC-2929.88AD-21.46BC-2724.86BD 90.11CD-6079.24A2-5995.65B2-3410.58C2-3903.162。
由式子得知,溶菌酶比魅力和4個變量中間具備明顯線性相關(guān)。線性回歸方程的二次項系數(shù)較為大,交互項指數(shù)中AD、BD的互動指數(shù)非常大,表明環(huán)氧樹脂使用量和過柱時間、NaCl濃度值和過柱時間之間的互動效用非常大,AB、AC的互動指數(shù)很大,表明環(huán)氧樹脂使用量和NaCl濃度值中間、環(huán)氧樹脂使用量和pH值中間互動效用很大,而BC、CD的互動指數(shù)較為小,表明NaCl濃度值和pH值中間、pH值和過柱時間之間的互動效用小。
為了更好地檢測方程式的實效性,對測量的溶菌酶的比魅力的分析模型開展方差分析,并對各因素的偏回歸系數(shù)開展檢驗。一次項中A的回歸系數(shù)較明顯,P=0.0806,表明雞蛋清環(huán)氧樹脂核對獲取的溶菌酶比魅力有較明顯功效。二次項中A、B、C、D的偏回歸系數(shù)均做到極明顯水準。交互項AD、BD回歸系數(shù)較其他要素明顯,表明環(huán)氧樹脂使用量和過柱時間、NaCl濃度值和過柱時間之間的交互項對溶菌酶比魅力危害比較明顯。
為了更好地獲得最大的溶菌酶比魅力,吸咐和過柱的各標準必須 適合的交叉式挑選。響應(yīng)面圖可直接體現(xiàn)各要素及配對t檢驗對酶魅力的危害,故取3項顯著性差異較高的交互項制做響應(yīng)面圖,依據(jù)圖5~7的Box-Behnken提升實驗線性擬合回應(yīng)斜面圖和方差分析獲知,對溶菌酶比魅力危害尺寸次序為AD>BD>AC。
對二次線性回歸方程求一階偏導,當響應(yīng)值R1(溶菌酶比魅力)為最高值時,各因素水準為每100mL雞蛋清滲瀝液中,環(huán)氧樹脂使用量(A)為24.20mL、NaCl濃度值(B)為1.00mol/L、雞蛋清滲瀝液pH值(C)為9.10、過柱時間(D)為62.61min。這時基礎(chǔ)理論預測分析溶菌酶比魅力為21041.1U/mg。
對所獲取的陽離子交換各最佳標準做平行面認證實驗,反復5次,如表4所顯示,獲得的溶菌酶比魅力為20509.58U/mg,與標準偏差貼近。
申明:文中常用照片、文本來源于《中國食品報》,著作權(quán)歸原作全部。