室內(nèi)甲醛是生物新陳代謝的一種成份，是一種對(duì)體細(xì)胞有毒的有害物質(zhì)，可以毀壞生物的蛋白質(zhì)和酶，使細(xì)胞組織造成不可逆的損壞，導(dǎo)致細(xì)胞死亡。在我國有要求禁止在國家行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)之外的食物中以其他方式加上室內(nèi)甲醛?？墒且灿幸恍┓欠ㄉ倘藶榱烁玫氐玫綑?quán)益，運(yùn)用室內(nèi)甲醛定形、防腐蝕，在肉制品中加上室內(nèi)甲醛，導(dǎo)致甲醛測(cè)試量超標(biāo)準(zhǔn)，比較嚴(yán)重危害顧客身心健康，造成比較嚴(yán)重的食品質(zhì)量安全難題。室內(nèi)甲醛的檢查辦法有光度法氣象色譜儀質(zhì)譜、高效液相色譜色譜分析（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）[6-7]和離子交換法等。HPLC檢驗(yàn)具備影響不大，實(shí)際操作簡(jiǎn)易，敏感度高的特性，因此被普遍地使用在各個(gè)領(lǐng)域的甲醛測(cè)試行業(yè)。文中中應(yīng)用立即衍化化的高效液相色譜色譜分析來檢驗(yàn)肉類零食中室內(nèi)甲醛的成分，檢驗(yàn)的結(jié)論精確，敏感度得到了很大的提高，可以給予創(chuàng)建肉類零食中甲醛濃度的測(cè)量的辦法的合理根據(jù)。

1.原材料和方式

(1)原材料與實(shí)驗(yàn)試劑

肉類零食，甲醛含量標(biāo)準(zhǔn)水溶液（100μg/mL），色譜純的工業(yè)甲醇和乙腈，試驗(yàn)自來水為millipore自來水；2，4-二硝基苯肼 （色譜純）；別的實(shí)驗(yàn)試劑（分析純）。

(2)機(jī)器設(shè)備

e2695高效率液相色譜；離子交換柱為WelchXB-C18（4.6mm× 250mm，5µm），組織搗碎機(jī)、恒溫水浴鍋、離心機(jī)。

(3)實(shí)驗(yàn)方法

①水溶液配置

1，4-二硝基苯肼-乙腈水溶液：用天平秤稱重0.15g2，4-二硝基苯肼，用乙腈融解滴定劑至一升，配置成0.15g/L的2，4-二硝基苯肼-乙腈水溶液；聚磷酸鹽緩沖液：用電子分析天平稱31.2gNaH2PO4·2H2O，自來水融解滴定劑至一升，配置成0.2mol/L的NaH2PO4水溶液；衍化液的配置：把聚磷酸鹽緩沖液和2，4-二硝基苯肼-乙腈水溶液以容積比是1:1混和勻稱。

②試品溶劑的制取

用研磨設(shè)備把肉類零食碾碎，用天平秤稱重2.0g，把待檢驗(yàn)的試樣放到50mL帶瓶塞的移液管中，在管內(nèi)添加調(diào)好的衍化水溶液20mL，往返波動(dòng)使之混和勻稱，挑選60℃標(biāo)準(zhǔn)做為水浴反映的溫度，反應(yīng)速度為1h，反映完成后把離心管架從水浴中取下當(dāng)然降溫至室內(nèi)溫度，用離心機(jī)離心扣除上清過慮，在高效率液相色譜儀上檢驗(yàn)。

③色譜儀標(biāo)準(zhǔn)

挑選WelchXB-C18（4.6mm×250mm，5µm）做為離子交換柱，容積之比70:30的乙腈-水做為流動(dòng)性相，操縱流動(dòng)速度為0.6mL/min，在37℃的環(huán)境溫度下反映，挑選355nm做為檢驗(yàn)光波長，進(jìn)樣量是10µL，選用等度過柱。

④標(biāo)液的制取

在有刻度尺的50mL離心管架中分別添加容積數(shù)不一樣的甲醛含量標(biāo)準(zhǔn)水溶液，再添加衍化液至20mL，混和勻稱，配置成不一樣含量的標(biāo)液，濃度值分別為0µg/mL、0.1µg/mL、0.2µg/mL、0.5µg/mL、1.0µg/mL、2.0µg/mL、3.0µg/mL，挑選60℃標(biāo)準(zhǔn)做為水浴反映的溫度，反應(yīng)速度為1h，反映完成后把離心管架從水浴中取下當(dāng)然降溫至室內(nèi)溫度，用離心機(jī)離心扣除上清過慮，在高效率液相色譜儀上檢驗(yàn)，制做標(biāo)曲，依據(jù)曲線圖測(cè)算試品中帶有甲醛和苯的量。

2.結(jié)果與探討

(1)明確衍化溫度和反應(yīng)速度

本分析中的衍化溫度分別是30℃、40℃、50℃、60℃、 70℃、80℃，設(shè)定三個(gè)加上水準(zhǔn)，各自為2µg、10µg和40µg，挑選衍化時(shí)間一小時(shí)，根據(jù)試驗(yàn)來確認(rèn)最好的衍化溫度。結(jié)果看到在60℃時(shí)物質(zhì)的量較大 ，伴隨著氣溫的上升會(huì)出現(xiàn)降低。此結(jié)果也和相關(guān)的文獻(xiàn)資料中消息的一致，室內(nèi)甲醛在60℃時(shí)
反映較快。

在以前試驗(yàn)的根基上，在60℃標(biāo)準(zhǔn)下反應(yīng)速度分別是20min、40min、60min、90min、120min，設(shè)定三個(gè)加上水準(zhǔn)，各自為2µg、10µg和40µg，根據(jù)試驗(yàn)來確認(rèn)最好的反應(yīng)速度。在反映1h的效果作出標(biāo)曲，測(cè)算利用率。如表1所顯示，產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)的時(shí)間段在60min（包括60min）之上，利用率都是在90%之上，伴隨著反應(yīng)速度的增加，利用率也在上升，可是改變的不顯著，從投入產(chǎn)出率的多角度整體考慮到，挑選反映溫度為60℃和衍化時(shí)間為60min。

(2)線形范疇與檢出限

以前配置好的甲醛含量標(biāo)準(zhǔn)水溶液，在反映溫度為60℃和衍化時(shí)間為60min的標(biāo)準(zhǔn)下反映，在上述的色譜儀標(biāo)準(zhǔn)下檢驗(yàn)，設(shè)定空白試驗(yàn)，制作標(biāo)曲，如圖所示1所顯示。依據(jù)圖1能夠看得出，室內(nèi)甲醛濃度值線形范疇非常好的濃度值是在0μg/mL～3.0μg/mL，將肉類零食破碎后添加標(biāo)液根據(jù)標(biāo)曲水溶液的辦法解決后，用色譜儀測(cè)量，除去空白試驗(yàn)后估算出方法檢出限，結(jié)果顯示加樣量是2g時(shí)，本實(shí)驗(yàn)操作的最少驗(yàn)出濃度值為0.08mg/kg。

(3)利用率

將破碎碾磨勻稱的肉類零食試品，各自添加 2 µ g、 10µg、40µg3個(gè)水準(zhǔn)的甲醛含量標(biāo)準(zhǔn)水溶液，依照以上辦法來測(cè)算利用率，每一個(gè)水準(zhǔn)做3個(gè)反復(fù)，測(cè)算利用率和相對(duì)性相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，結(jié)果如表2所顯示。從表格中還可以看得出均值利用率的范疇是87.11%-94.25%，相對(duì)性相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差是0.67%-3.57%。

(4)精度

拿取碾磨勻稱的同一份3份，添加120µL 100µg/mL的甲醛含量標(biāo)準(zhǔn)水溶液，提升好的試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)下開展精度試驗(yàn)，測(cè)量結(jié)果如表3所顯示。表明效果為相對(duì)性相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.58%，說明此辦法有著不錯(cuò)的精度。

3.結(jié)果

文中中的實(shí)驗(yàn)操作是用衍化液立即獲取，用高效液相色譜色譜分析來檢驗(yàn)肉類零食中帶有室內(nèi)甲醛量的統(tǒng)計(jì)分析方法。本辦法是將獲取和衍化一起開展，不但節(jié)約前解決時(shí)間，還能使實(shí)驗(yàn)過程越來越簡(jiǎn)單。文中中創(chuàng)建的檢查方式具備精度好，敏感度高，精確性好的優(yōu)點(diǎn)，可以在肉類零食中甲醛濃度測(cè)量上運(yùn)用。