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運(yùn)用超高效液相色譜-生物化學(xué)檢測在線聯(lián)用分析方法篩選中藥中的丁酰膽堿酯酶抑制劑(三)

來源:鄭州天順食品添加劑有限公司 發(fā)布時間:2021-09-12 09:42:44 關(guān)注: 0 次
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3.2 中藥材中BChE緩聚劑的迅速挑選

應(yīng)用UPLC-DAD-BCD方式對吳茱萸、鉤藤、玄參和山豆根(苗)提取液中的BChE緩聚劑開展挑選結(jié)果見圖3。吳茱萸中有4個峰在405 nm檢測中表明倒峰,說明具備BChE抑止活力。鉤藤中有3個倒峰、玄參中有五個倒峰、山豆根(苗)中有兩個倒峰。在其中吳茱萸中的11號峰表明極強(qiáng)的BChE抑止活力。線上統(tǒng)計(jì)分析方法因?yàn)槭橇魍ㄐ缘姆从硻z驗(yàn),更能迅速發(fā)覺活力較強(qiáng)、酶抑止速度更快的成份。

3.3 活力成份評定

為了更好地確立吳茱萸、鉤藤、玄參和山豆根(苗)提取液中的活力成份,選用UHPLC-LTQ/Orbitrap MS方式各自對4種中藥材中發(fā)生倒峰的成份開展評定。依據(jù)各峰保存期、質(zhì)譜分析信息內(nèi)容等與論文參考文獻(xiàn)相較為,數(shù)據(jù)顯示峰1,2,3,4,6,7,8,9各自為去氫吳茱萸堿、吳茱萸堿、吳茱萸次堿、1-羥基-2–4(1H)-喹諾酮、去氫毛鉤藤堿、毛鉤藤堿、苦參堿和氧化苦參堿,在其中峰5,10,11和12尚需進(jìn)一步科學(xué)研究多方面辨別?;盍Τ煞菰u定結(jié)果見表1。


化學(xué)物質(zhì)1:來自吳茱萸,保存期42.56 min,共價鍵方式,其準(zhǔn)分子離子為m/z302.1281 ,二級質(zhì)譜分析表明其關(guān)鍵殘片m/z 287.105 4 和286.0984 ,融合參考文獻(xiàn)基本推斷化學(xué)物質(zhì)1為去氫吳茱萸堿。

化學(xué)物質(zhì)2:來自吳茱萸,保存期72.87 min,正正離子方式,其準(zhǔn)分子離子為m/z304.144 3 ,二級質(zhì)譜分析表明其殘片m/z286.096 9 ,m/z171.091 8為標(biāo)準(zhǔn)分子離子破裂B環(huán) ,m/z161.071 1準(zhǔn)分子離子破裂C環(huán) ,m/z144.080 8和134.060 0分別為 和 ,融合參考文獻(xiàn)基本推斷化學(xué)物質(zhì)2為吳茱萸堿。

化學(xué)物質(zhì)3:來自吳茱萸,保存期75.13 min,共價鍵方式,其準(zhǔn)分子離子為m/z288.112 9 ,二級質(zhì)譜分析表明其關(guān)鍵殘片m/z273.102 2 ,m/z244.086 9為標(biāo)準(zhǔn)分子離子脫下C2H4O,m/z145.039 6為C環(huán)破裂脫下C10H8N·,融合參考文獻(xiàn)基本推斷化學(xué)物質(zhì)3為吳茱萸次堿。

化學(xué)物質(zhì)4:來自吳茱萸,保存期81.60 min,共價鍵方式,其準(zhǔn)分子離子為m/z366.2783 ,二級質(zhì)譜分析表明其關(guān)鍵殘片m/z352.891 6 ,322.490 2為 ,186.091 9為 ,融合參考文獻(xiàn)基本推斷化學(xué)物質(zhì)4為1-羥基-2–4(1H)-喹諾酮。

化學(xué)物質(zhì)6:來自鉤藤,保存期68.88 min,共價鍵方式,其準(zhǔn)分子離子為m/z367.201 4 ,二級質(zhì)譜分析表明其關(guān)鍵殘片m/z335.175 9,298.143 6,224.128 0和144.080 7,各自為標(biāo)準(zhǔn)分子離子遺失CH3OH、C4H7N、C10H9N和C12H17NO3的殘片,融合參考文獻(xiàn)基本推斷化學(xué)物質(zhì)6為去氫毛鉤藤堿。

化學(xué)物質(zhì)7:來自鉤藤,保存期72.93 min,共價鍵方式,其準(zhǔn)分子離子為m/z369.2165 ,二級質(zhì)譜分析表明其關(guān)鍵殘片m/z337.190 6,298.143 9,226.143 6和144.080 7,各自為標(biāo)準(zhǔn)分子離子遺失CH3OH、C4H9N、C10H9N和C12H19NO3的殘片,融合參考文獻(xiàn)基本推斷化學(xué)物質(zhì)7為毛鉤藤堿。

化學(xué)物質(zhì)8:來自玄參和山豆根(苗),保存期8.04 min,共價鍵方式,其準(zhǔn)分子離子為m/z249.195 7 ,二級質(zhì)譜分析表明其關(guān)鍵殘片m/z231.185 5 ,融合參考文獻(xiàn)基本推斷化學(xué)物質(zhì)8為苦參堿。

化學(xué)物質(zhì)9:來自玄參和山豆根(苗),保存期14.12 min,共價鍵方式,其準(zhǔn)分子離子為m/z265.190 5 ,二級質(zhì)譜分析表明其關(guān)鍵殘片m/z247.190 8 ,m/z205.138 3 ,m/z 148.112 5 融合參考文獻(xiàn)基本推斷化學(xué)物質(zhì)9為氧化苦參堿。

3.4 探討

本科學(xué)研究創(chuàng)建了一種UPLC-DAD-BCD線上統(tǒng)計(jì)分析方法,用以迅速挑選吳茱萸、鉤藤、玄參和山豆根(苗)4種藥材中的BChE緩聚劑,發(fā)覺12個成份具備BChE抑止活力,根據(jù)UHPLC-LTQ/Orbitrap方式評定出8種活力成份,如:去氫吳茱萸堿、吳茱萸堿、吳茱萸次堿、1-羥基-2–4(1H)-喹諾酮、去氫毛鉤藤堿、毛鉤藤堿、苦參堿和氧化苦參堿。研究表明,創(chuàng)建的儀器設(shè)備聯(lián)用系統(tǒng)軟件平穩(wěn)、線上統(tǒng)計(jì)分析方法靈巧,可以普遍用以中藥材繁雜機(jī)質(zhì)中微生物效用成份的迅速篩選。

中藥材成份繁雜多種多樣,傳統(tǒng)式綠色植物有機(jī)化學(xué)分離純化活力化學(xué)成分的方式 ,存有資源耗費(fèi),很多的財(cái)力物力資金投入到分離出來已經(jīng)知道的和沒有意義的化學(xué)物質(zhì)科學(xué)研究,本研究思路選用高效率色譜儀分離出來、流動性注入在線反應(yīng)、細(xì)胞生物學(xué)即時檢驗(yàn)于一體的線上剖析技術(shù)性,迅速點(diǎn)評單一成份微生物效用,只需小量的試品就可以達(dá)到活力化學(xué)成分的挑選和評定,為中藥材繁雜栽培基質(zhì)中澳的生物活性成分的迅速發(fā)覺,給予了一種高效率、方便快捷的研究對策。

本科學(xué)研究創(chuàng)建的線上UPLC-DAD-BCD方式可以用以迅速篩選別的酶或蛋白激酶微生物效用成份,根據(jù)對中藥材繁雜成份的不一樣靶標(biāo)活力剖析,為詮釋中藥材及棘籽藥力化學(xué)物質(zhì)的多靶標(biāo)協(xié)同效應(yīng)體制及搭配規(guī)律性方劑基本原理給予一種合理的研究思路和方式方法。

申明:文中常用照片、文本來源于《中國醫(yī)院藥學(xué)雜志》,著作權(quán)歸原作全部。

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