④K-值的測(cè)量

在2g魚(yú)類(lèi)試品中添加2mL5％(v／v)的高氯酸后勻質(zhì)，并在3600r／min下離心式3min，反復(fù)3次，搜集每一次上清液。用1mol／LKOH、10mol／LKOH及5％(v／v)高氯酸將上清液pH調(diào)整至6.4～6.5，沉淀用2mLpH6.45，5％(v／v)高氯酸在3600r／min下離心式清洗3min，搜集全部上清液并且用pH6.45，5％(v，v)高氯酸滴定劑至10mL，過(guò)0.45μm微孔濾膜，供液相色譜檢驗(yàn)ATP及有關(guān)化學(xué)物質(zhì)。色譜儀標(biāo)準(zhǔn)：離子交換柱(VP-CDSC18)；進(jìn)樣量：20μL；流動(dòng)速度：lmL／min；光波長(zhǎng)：254nm。

魚(yú)類(lèi)機(jī)構(gòu)中的三磷酸腺苷(ATP)會(huì)由于時(shí)間的增加轉(zhuǎn)化成二磷腺苷(ADP)、腺苷酸(AMP)、肌苷酸(IMP)、次黃嘌呤核苷(HxR)和次黃嘌呤(Hx)化學(xué)物質(zhì)。因而，為快速而精確地測(cè)量魚(yú)類(lèi)新鮮程度，根據(jù)高效率液相色譜儀測(cè)量魚(yú)類(lèi)中的這種化學(xué)物質(zhì)成分以及占比做為ATP溶解水平的指標(biāo)值，做為K值鑒定其新鮮程度，K值計(jì)算方法如下所示：

⑤凈重?fù)p害

每10條草魚(yú)為一組，各自在研究逐漸及每一個(gè)儲(chǔ)藏環(huán)節(jié)完成后開(kāi)展秤重剖析，結(jié)果以原始凈重?fù)p耗的百分?jǐn)?shù)表明。

⑥感觀鑒定

由10名通過(guò)培訓(xùn)的技術(shù)專業(yè)工作人員選用9點(diǎn)快樂(lè)平均誤差法對(duì)魚(yú)的產(chǎn)品質(zhì)量開(kāi)展感觀鑒定，鑒定指標(biāo)值包含顏色、香味、味道、材質(zhì)和整體可接受度，點(diǎn)評(píng)規(guī)范：9分成非常喜歡，8分成較為喜愛(ài)，7分成一般喜愛(ài)，六分為略微喜愛(ài)，五分為既不太喜歡也不會(huì)反感，四分為略微不太喜歡，但仍可接納，三分為一般厭煩，2分為較為厭煩，一分為十分厭煩。每一個(gè)試品的感觀得分除掉最大和最少得分后取其均值。

（6）數(shù)據(jù)分析

全部數(shù)據(jù)信息根據(jù)SPSS21.0手機(jī)軟件解決，ANOVA法開(kāi)展方差分析，選用LSD最少顯著性差異法開(kāi)展顯著性分析(P＜0.05)。

二、結(jié)果與探討

1、SDS-聚正丁酸凝膠電泳剖析

大家都知道，花青素具備與蛋白產(chǎn)生一氧化氮合酶的工作能力，進(jìn)而造成 蛋白沉淀，但也是有研究表明，蛋白沉積主要是由單寧酸造成的，本試驗(yàn)使用的馬郁蘭水提物中沒(méi)有這類(lèi)高分子材料花青素高聚物，因而，沒(méi)有顯著的蛋白沉積。殊不知，低相對(duì)分子質(zhì)量的多酚類(lèi)物質(zhì)對(duì)果膠沒(méi)有顯著的加強(qiáng)功效，并有可能危害到果膠的理化性質(zhì)。
 

如圖所示1所顯示，層析電泳分析表明，純魚(yú)鱗片果膠的剖析量十分相仿，與對(duì)比果膠水溶液(F)對(duì)比，魚(yú)鱗片果膠水溶液中添加植酸(F-P)對(duì)電泳原理譜圖基本上沒(méi)有危害。加上了馬郁蘭提取液的魚(yú)鱗片果膠(F-R和F-R-P)，在鏈1和鏈2中間的蛋白量有所增加，但＜31KDa的小分子水解物沒(méi)有顯著增加，新的蛋白質(zhì)精彩片段很有可能坐落于譜圖的上方地區(qū)。這一數(shù)據(jù)顯示，馬郁蘭提取液中的多酚類(lèi)物質(zhì)與魚(yú)鱗片活性多肽中間具有一定的相互影響。

2、草魚(yú)的儲(chǔ)藏實(shí)驗(yàn)

（1）抗菌實(shí)驗(yàn)

海產(chǎn)品的腐壞霉變大部分是因?yàn)槲⑸锞N的功效而導(dǎo)致的，在輸送和貯存全過(guò)程上都會(huì)造成微生物菌種的環(huán)境污染，而細(xì)菌在生長(zhǎng)發(fā)育繁育全過(guò)程中會(huì)轉(zhuǎn)化成酶和毒副作用化學(xué)物質(zhì)，使肌纖維產(chǎn)生溶解從而產(chǎn)生霉變。微生物菌種的耐寒功能強(qiáng)，4℃超低溫不能抵制微生物菌種的生長(zhǎng)發(fā)育，根據(jù)病菌數(shù)量的改變能夠分辨草魚(yú)的新鮮度，結(jié)果如圖2所顯示，儲(chǔ)藏前期，對(duì)照實(shí)驗(yàn)與解決組試品的菌落總數(shù)差別并不顯著(p＞0.05)，伴隨著貯存時(shí)間的增加，全部樣本的菌落總數(shù)均呈上漲發(fā)展趨勢(shì)。最開(kāi)始草魚(yú)的菌落總數(shù)為4.7logCFU／g，F(xiàn)O組試品從第4天逐漸明顯加速，在儲(chǔ)藏到第六天和，F(xiàn)2和F4組試品的菌落總數(shù)也各自做到7.751ogCFU／g和7.671ogCFU／g，與F0組的7.62logCFU／g相貼近，無(wú)明顯差別p＞0.05)。有研究表明，馬郁蘭提取液并不能抑制綠膿桿菌和假單胞菌的生長(zhǎng)發(fā)育，可是假單胞菌是造成魚(yú)種腐壞的關(guān)鍵因素之一。F1組試品在第18天時(shí)，菌落總數(shù)為6.99logCFU／g，第22天和，F(xiàn)3組試品菌落總數(shù)為6.95logCFU／g，F(xiàn)1組和F3組到儲(chǔ)藏18天時(shí)無(wú)顯著性差異。從圖上能夠看得出，F(xiàn)1和F3組里菌落總數(shù)獲得顯著抑止，這也是因?yàn)轸~(yú)鱗片果膠對(duì)腐壞病菌的抑制效果，而不是植酸的功效。