如圖2所顯示,當(dāng)杜蠣發(fā)醇培養(yǎng)液的接種量為4%時,羥基態(tài)氮的成分最大,可是蛋白質(zhì)含量未做到最少。接種量在持續(xù)提升的與此同時,羥基態(tài)氮和蛋白二者的成分邁向都展現(xiàn)減少發(fā)展趨勢。這有可能由于在接種量過低時,納豆激酶枯草芽孢菌繁育比較慢,產(chǎn)酶偏少;而當(dāng)菌苗注射過多時,菌苗繁育過快,相對密度過大,造成 O2觸碰不夠,造成 新陳代謝物質(zhì)較少。并且牡蠣肉做為納豆激酶枯草芽孢菌繁育新陳代謝的關(guān)鍵營養(yǎng)成分栽培基質(zhì),在其中充足的蛋白被納豆激酶枯草芽孢菌本身代謝的胰蛋白酶轉(zhuǎn)化成寡肽和碳水化合物,促使發(fā)酵物中包含充足的羥基態(tài)氮。而當(dāng)發(fā)酵物中小分子活性肽和碳水化合物成分與蛋白質(zhì)含量相距較多時,納豆激酶枯草芽孢菌會首先耗費小分子水化學(xué)物質(zhì),進而造成 當(dāng)接種量太多時蛋白與羥基態(tài)氮的成分均隨著慢慢減少。說明在接種量2%~6%中間時,羥基態(tài)氮處在成分最大期。
如圖所示3所顯示,當(dāng)接種量固定不動為4%時,發(fā)酵時間在12h~48h區(qū)域內(nèi),羥基態(tài)氮的占比在持續(xù)提升,在發(fā)酵時間為48~60h時稍有降低,可能是因為納豆激酶枯草芽孢菌耗費蛋白的一起逐漸運用小分子水的碳水化合物造成 ,也是有有可能是由于胰蛋白酶魅力在發(fā)醇48h時到達較大,發(fā)酵時間是危害納豆激酶枯草芽孢菌產(chǎn)酶的主要要素,在產(chǎn)酶總產(chǎn)量做到最高值以后再次發(fā)醇很有可能會造成 胰蛋白酶酶活降低。在12h~60h期內(nèi),蛋白的占比在持續(xù)降低。在36h~48h期內(nèi)羥基態(tài)氮成分與蛋白質(zhì)含量的轉(zhuǎn)變放緩,這時的納豆激酶枯草芽孢菌在水解反應(yīng)蛋白和耗費碳水化合物的環(huán)節(jié)中處在穩(wěn)定平衡期。納豆激酶枯草芽孢菌產(chǎn)酶最大值后應(yīng)先終止發(fā)醇,不然酶魅力會發(fā)生下降狀況。因而,在固定不動標準接種量為4%和發(fā)酵時間48h下開展后期實驗。
2、正交實驗提升發(fā)醇標準
在固定不動料液比l:4(g/mL),發(fā)醇溫度37℃和葡萄糖水加上量2%的根基上,對單要素實驗的信息效果開展解析并選擇適合的發(fā)醇標準范疇,以發(fā)醇pH、接種量、發(fā)酵時間為首要要素,并以測量的羥基態(tài)氮成分做為參照,開展三要素三水準L9(33)正交和提升實驗,實際試驗方案和結(jié)果見表1。
由表一分析得知,以羥基態(tài)氮成分為指標值,各要素的危害先后為A>B>C,即接種量對羥基態(tài)氮成分的危害較大 ,次之是發(fā)酵時間,發(fā)醇pH對羥基態(tài)氮成分的危害最少。由正交實驗結(jié)果剖析明確最好提升加工工藝標準:A3B3C2,即發(fā)醇pH為7,接種量為6%,發(fā)酵時間為48h。
由表2方差分析得知,本次實驗的三個要素中,接種量對羥基態(tài)氮成分具備顯著性差異危害(P<0.05),發(fā)酵時間和發(fā)醇pH對實驗結(jié)果無顯著性差異危害(P>0.05)。
3、認證實驗
為認證正交實驗所得的結(jié)論的穩(wěn)定性,在所述最好發(fā)醇加工工藝標準下開展三次平行面實驗并測量發(fā)酵物中羥基態(tài)氮成分。經(jīng)測量,所得的發(fā)酵物中羥基態(tài)氮成分為0.785mg/mL,與正交實驗結(jié)果貼近,確認實驗結(jié)果靠譜。
三、結(jié)果
本實驗以廉價選購銷售市場擊敗的杜蠣廢棄物做為發(fā)醇關(guān)鍵原材料,用納豆激酶枯草芽孢菌對其開展發(fā)醇,能夠提升杜蠣的使用使用價值。固定不動料液比1:4,發(fā)醇溫度37℃和葡萄糖水加上量2%,根據(jù)單要素實驗選擇適合發(fā)醇標準范疇:發(fā)醇pH為6~8,接種量為2%~6%,發(fā)酵時間為24h~48h。在這個基礎(chǔ)上,根據(jù)正交設(shè)計提升實驗明確納豆激酶枯草芽孢菌發(fā)醇杜蠣的較佳發(fā)醇標準為:發(fā)醇pH7,接種量6%,發(fā)酵時間48h,這時發(fā)酵物中羥基態(tài)氮的成分做到0.791mg/mL。
本實驗的發(fā)醇結(jié)果顯示,納豆激酶枯草芽孢菌能夠用以杜蠣的發(fā)醇,為水產(chǎn)品生物的使用帶來了理論基礎(chǔ),為蛋白質(zhì)低值化保證了根據(jù),與此同時為海產(chǎn)品的研發(fā)給予新的方位,靈活運用銷售市場擊敗的杜蠣邊角余料。并且,發(fā)醇水解反應(yīng)液氯激發(fā)態(tài)氮成分豐富多彩,水解反應(yīng)液歷經(jīng)濃縮獲取還可以制取碳水化合物原漿、油類、碳水化合物潤喉片、碳水化合物護膚產(chǎn)品、碳水化合物添加物等,本科學(xué)研究為碳水化合物商品的制作帶來了根據(jù)。