如圖2所顯示，當(dāng)杜蠣發(fā)醇培養(yǎng)液的接種量為4％時(shí)，羥基態(tài)氮的成分最大，可是蛋白質(zhì)含量未做到最少。接種量在持續(xù)提升的與此同時(shí)，羥基態(tài)氮和蛋白二者的成分邁向都展現(xiàn)減少發(fā)展趨勢(shì)。這有可能由于在接種量過(guò)低時(shí)，納豆激酶枯草芽孢菌繁育比較慢，產(chǎn)酶偏少；而當(dāng)菌苗注射過(guò)多時(shí)，菌苗繁育過(guò)快，相對(duì)密度過(guò)大，造成O2觸碰不夠，造成新陳代謝物質(zhì)較少。并且牡蠣肉做為納豆激酶枯草芽孢菌繁育新陳代謝的關(guān)鍵營(yíng)養(yǎng)成分栽培基質(zhì)，在其中充足的蛋白被納豆激酶枯草芽孢菌本身代謝的胰蛋白酶轉(zhuǎn)化成寡肽和碳水化合物，促使發(fā)酵物中包含充足的羥基態(tài)氮。而當(dāng)發(fā)酵物中小分子活性肽和碳水化合物成分與蛋白質(zhì)含量相距較多時(shí)，納豆激酶枯草芽孢菌會(huì)首先耗費(fèi)小分子水化學(xué)物質(zhì)，進(jìn)而造成當(dāng)接種量太多時(shí)蛋白與羥基態(tài)氮的成分均隨著慢慢減少。說(shuō)明在接種量2％～6％中間時(shí)，羥基態(tài)氮處在成分最大期。

如圖所示3所顯示，當(dāng)接種量固定不動(dòng)為4％時(shí)，發(fā)酵時(shí)間在12h～48h區(qū)域內(nèi)，羥基態(tài)氮的占比在持續(xù)提升，在發(fā)酵時(shí)間為48～60h時(shí)稍有降低，可能是因?yàn)榧{豆激酶枯草芽孢菌耗費(fèi)蛋白的一起逐漸運(yùn)用小分子水的碳水化合物造成，也是有有可能是由于胰蛋白酶魅力在發(fā)醇48h時(shí)到達(dá)較大，發(fā)酵時(shí)間是危害納豆激酶枯草芽孢菌產(chǎn)酶的主要要素，在產(chǎn)酶總產(chǎn)量做到最高值以后再次發(fā)醇很有可能會(huì)造成胰蛋白酶酶活降低。在12h～60h期內(nèi)，蛋白的占比在持續(xù)降低。在36h～48h期內(nèi)羥基態(tài)氮成分與蛋白質(zhì)含量的轉(zhuǎn)變放緩，這時(shí)的納豆激酶枯草芽孢菌在水解反應(yīng)蛋白和耗費(fèi)碳水化合物的環(huán)節(jié)中處在穩(wěn)定平衡期。納豆激酶枯草芽孢菌產(chǎn)酶最大值后應(yīng)先終止發(fā)醇，不然酶魅力會(huì)發(fā)生下降狀況。因而，在固定不動(dòng)標(biāo)準(zhǔn)接種量為4％和發(fā)酵時(shí)間48h下開(kāi)展后期實(shí)驗(yàn)。

2、正交實(shí)驗(yàn)提升發(fā)醇標(biāo)準(zhǔn)

在固定不動(dòng)料液比l:4(g／mL)，發(fā)醇溫度37℃和葡萄糖水加上量2％的根基上，對(duì)單要素實(shí)驗(yàn)的信息效果開(kāi)展解析并選擇適合的發(fā)醇標(biāo)準(zhǔn)范疇，以發(fā)醇pH、接種量、發(fā)酵時(shí)間為首要要素，并以測(cè)量的羥基態(tài)氮成分做為參照，開(kāi)展三要素三水準(zhǔn)L₉(3³)正交和提升實(shí)驗(yàn)，實(shí)際試驗(yàn)方案和結(jié)果見(jiàn)表1。

由表一分析得知，以羥基態(tài)氮成分為指標(biāo)值，各要素的危害先后為A＞B＞C，即接種量對(duì)羥基態(tài)氮成分的危害較大 ，次之是發(fā)酵時(shí)間，發(fā)醇pH對(duì)羥基態(tài)氮成分的危害最少。由正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果剖析明確最好提升加工工藝標(biāo)準(zhǔn)：A₃B₃C₂，即發(fā)醇pH為7，接種量為6％，發(fā)酵時(shí)間為48h。

由表2方差分析得知，本次實(shí)驗(yàn)的三個(gè)要素中，接種量對(duì)羥基態(tài)氮成分具備顯著性差異危害(P＜0．05)，發(fā)酵時(shí)間和發(fā)醇pH對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果無(wú)顯著性差異危害(P＞0.05)。

3、認(rèn)證實(shí)驗(yàn)

為認(rèn)證正交實(shí)驗(yàn)所得的結(jié)論的穩(wěn)定性，在所述最好發(fā)醇加工工藝標(biāo)準(zhǔn)下開(kāi)展三次平行面實(shí)驗(yàn)并測(cè)量發(fā)酵物中羥基態(tài)氮成分。經(jīng)測(cè)量，所得的發(fā)酵物中羥基態(tài)氮成分為0．785mg／mL，與正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果貼近，確認(rèn)實(shí)驗(yàn)結(jié)果靠譜。

三、結(jié)果

本實(shí)驗(yàn)以廉價(jià)選購(gòu)銷(xiāo)售市場(chǎng)擊敗的杜蠣廢棄物做為發(fā)醇關(guān)鍵原材料，用納豆激酶枯草芽孢菌對(duì)其開(kāi)展發(fā)醇，能夠提升杜蠣的使用使用價(jià)值。固定不動(dòng)料液比1:4，發(fā)醇溫度37℃和葡萄糖水加上量2％，根據(jù)單要素實(shí)驗(yàn)選擇適合發(fā)醇標(biāo)準(zhǔn)范疇：發(fā)醇pH為6～8，接種量為2％～6％，發(fā)酵時(shí)間為24h～48h。在這個(gè)基礎(chǔ)上，根據(jù)正交設(shè)計(jì)提升實(shí)驗(yàn)明確納豆激酶枯草芽孢菌發(fā)醇杜蠣的較佳發(fā)醇標(biāo)準(zhǔn)為：發(fā)醇pH7，接種量6％，發(fā)酵時(shí)間48h，這時(shí)發(fā)酵物中羥基態(tài)氮的成分做到0．791mg／mL。

本實(shí)驗(yàn)的發(fā)醇結(jié)果顯示，納豆激酶枯草芽孢菌能夠用以杜蠣的發(fā)醇，為水產(chǎn)品生物的使用帶來(lái)了理論基礎(chǔ)，為蛋白質(zhì)低值化保證了根據(jù)，與此同時(shí)為海產(chǎn)品的研發(fā)給予新的方位，靈活運(yùn)用銷(xiāo)售市場(chǎng)擊敗的杜蠣邊角余料。并且，發(fā)醇水解反應(yīng)液氯激發(fā)態(tài)氮成分豐富多彩，水解反應(yīng)液歷經(jīng)濃縮獲取還可以制取碳水化合物原漿、油類(lèi)、碳水化合物潤(rùn)喉片、碳水化合物護(hù)膚產(chǎn)品、碳水化合物添加物等，本科學(xué)研究為碳水化合物商品的制作帶來(lái)了根據(jù)。