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2種抗氧化劑對α-葡萄糖苷酶的抑制作用(二)

來源:鄭州天順食品添加劑有限公司 發(fā)布時(shí)間:2021-09-19 13:11:42 關(guān)注: 0 次
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3.2 效用物對α-葡萄糖苷酶的抑止原理

2效用物對α-葡萄糖苷酶的抑止原理植酸和L-抗壞血酸豆蔻酸酯對α-葡萄糖苷酶抑止原理如圖所示1所顯示。圖上的曲線圖均給予起點(diǎn),直線斜率各自隨效用物濃度值增高而減少。因而,2種效用物對α-葡萄糖苷酶均為交叉性抑止,效用物與酶以非共價(jià)鍵融合成可離解的一氧化氮合酶。在該酶活管理體系的測量中盡管酶催化反應(yīng)速度速度減少,可是沒有降低合理酶量。

3.3 效用物對α-葡萄糖苷酶的抑止種類

植酸和L-抗壞血酸豆蔻酸酯對α-葡萄糖苷酶抑止種類如圖2所顯示。圖2a所顯示,植酸的Lineweaver-Burk圖中平行線1~4交叉于第Ⅱ象限,伴隨著植酸濃度值上升,米氏常數(shù)(Km)增大,較大化學(xué)反應(yīng)速率(Vmax)減少,說明效用物植酸對α-葡萄糖苷酶是復(fù)合型抑止,具備競爭抑止和非競爭抑止2種方式。植酸既能與分散的酶融合,也可以與酶-底物一氧化氮合酶融合。根據(jù)制作Dixon圖計(jì)算抑止參量K和KIS各自為K=0.117mol/L和KIS=0.163mol/L。由K值低于KIS值,說明化學(xué)物質(zhì)與α-葡萄糖苷酶融合以外,關(guān)鍵產(chǎn)生ESI(效用物-酶-底物)一氧化氮合酶。

L-抗壞血酸豆蔻酸酯對α-葡萄糖苷酶抑止種類如圖2b所顯示,平行線1~4交叉于第Ⅰ象限,十分貼近Y軸,伴隨著L-抗壞血酸豆蔻酸酯濃度值上升,米氏常數(shù)(Km)增大,較大化學(xué)反應(yīng)速率(Vmax)不會改變(轉(zhuǎn)變輕度),說明L-抗壞血酸豆蔻酸酯對α-葡萄糖苷酶是市場競爭型抑止,主要是與α-葡萄糖苷酶融合,抑止參量K=0.202mmol/L。

3.4 分子對接結(jié)果

植酸與α-葡萄糖苷酶活力袋子的氨基酸殘基相互影響如圖所示3所顯示。如圖所示3a所顯示,植酸進(jìn)到葡萄糖苷酶的活力袋子中,活力袋子周邊關(guān)鍵的碳水化合物Phe303,Phe159,Val216,Leu219,Phe178是疏水性碳水化合物,與活力袋子的產(chǎn)生相關(guān),這與植酸進(jìn)到活力袋子也是有一定的危害。如圖所示3b,3c所顯示,植酸分子結(jié)構(gòu)含有6個(gè)磷酸根離子,所需的陽離子有益于與活力袋子周邊帶正電的氨基酸殘基相互影響。配位分子結(jié)構(gòu)植酸與α-葡萄糖苷酶活力袋子氨基酸殘基Arg315,Arg442,Gln279產(chǎn)生共價(jià)鍵。共價(jià)鍵是植酸與α-葡萄糖苷酶融合的主導(dǎo)作用。除此之外,植酸與氨基酸殘基Glu411,Gln353,Asp307,Glu277,Asp352,His351,Thr306,His280,Asn350,Tyr72,Tyr158產(chǎn)生范德華力,產(chǎn)生的非共價(jià)鍵相互作用力(共價(jià)鍵和范德華力),在平穩(wěn)植酸與α-葡萄糖苷酶一氧化氮合酶中起關(guān)鍵功效。

L-抗壞血酸豆蔻酸酯與α-葡萄糖苷酶活力袋子的氨基酸殘基相互影響如圖4所顯示。由圖4b,4c能夠看得出,L-抗壞血酸豆蔻酸酯的分子式,一端為含有酚羥基的苯環(huán),接著相互連接的是較長碳鏈構(gòu)造。含有酚羥基苯環(huán)一端進(jìn)到酶的活性袋子房屋朝向氨基酸殘基His315,Arg442,Arg446,Asp69,并與4個(gè)氨基酸殘基產(chǎn)生共價(jià)鍵。共價(jià)鍵產(chǎn)生的越大,配位分子結(jié)構(gòu)與酶融合越平穩(wěn)。全部配位分子結(jié)構(gòu)進(jìn)到酶的活性袋子中,因?yàn)樘兼溳^長,進(jìn)到活力袋子必須扭曲和變化姿態(tài)及擺脫室內(nèi)空間阻攔而耗費(fèi)大量的動能。除此之外,配位分子結(jié)構(gòu)L-抗壞血酸豆蔻酸酯的尾端房屋朝向Phe303,Phe159,Val216,Phe178疏水性碳水化合物,產(chǎn)生親水性相互影響。配位分子結(jié)構(gòu)L-抗壞血酸豆蔻酸酯與周邊的氨基酸殘基Tyr72,Gln279,Tyr158,Asp352,Asn350,Tyr347,Thr306,Glu277,Arg315,Glu411產(chǎn)生范德華力。L-抗壞血酸豆蔻酸酯與α-葡萄糖苷酶的活力袋子周邊的碳水化合物十分平穩(wěn)的融合。

4 結(jié)果

抗氧劑植酸和L-抗壞血酸豆蔻酸酯對α葡萄糖苷酶均有控制實(shí)際效果。植酸對α-葡萄糖苷酶過半數(shù)抑止?jié)舛戎禐椋?.207±3.137)mol/L,抑止種類體現(xiàn)為可逆性復(fù)合型抑止。L-抗壞血酸豆蔻酸酯對α葡萄糖苷酶的IC50數(shù)值(0.39±0.00838)mmol/L,抑止種類為可逆性市場競爭型抑止。植酸和L-抗壞血酸豆蔻酸酯各自與α-葡萄糖苷酶活力袋子的氨基酸殘基相互影響,產(chǎn)生共價(jià)鍵,親水性相互影響,范德華力等非共價(jià)鍵相互影響。此結(jié)果與酶動力學(xué)模型的抑止原理的分析效果具備一致性。除此之外,對于2種抗氧劑對酶的控制實(shí)際效果,與限制的增加量完成較為,L-抗壞血酸豆蔻酸酯對α-葡萄糖苷酶主要表現(xiàn)出精確性,在做為α-葡萄糖苷酶緩聚劑給予理論來源的與此同時(shí),也為L-抗壞血酸豆蔻酸酯的多功能性運(yùn)用帶來了概念支撐點(diǎn)。

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