糞沙門氏菌群是總大腸桿菌中的一部分。 關(guān)鍵來(lái)源于排泄物遙在 44.5益溫度下會(huì)生長(zhǎng)發(fā)育并發(fā)醇乳清蛋白產(chǎn)酸脹氣的大腸桿菌稱之為糞大腸菌群。用提升塑造溫度的辦法將地理環(huán)境中的大腸桿菌與排泄物中的大腸桿菌區(qū)別開(kāi), 使培育出的菌具體為來(lái)源于排泄物中的大腸桿菌, 進(jìn)而更確切地體現(xiàn)出水體受排泄物嚴(yán)重污染的狀況 目前袁糞大腸菌群檢驗(yàn)最常見(jiàn)的辦法是多管發(fā)酵和濾膜法。 可是這2種方式測(cè)量的時(shí)間段都較長(zhǎng)袁最少必須 48 h,流程繁雜必須認(rèn)證實(shí)驗(yàn),與此同時(shí)無(wú)菌操作原則對(duì)試驗(yàn)室硬件設(shè)施的規(guī)定 十分高。 而固定不動(dòng)底物酶底物分析法 1 個(gè)試品在試驗(yàn)室內(nèi)實(shí)際操作的時(shí)間僅必須 1 min塑造時(shí)間也減少為 24 h在一般試驗(yàn)室內(nèi)就能開(kāi)展, 酶底物法可抑 制 200 萬(wàn)只異常病菌精準(zhǔn)檢驗(yàn)到每 100 mL 試品中的 1 個(gè)糞大腸菌群。
1 試驗(yàn)一部分
1.1 儀器設(shè)備與實(shí)驗(yàn)試劑
關(guān)鍵儀器設(shè)備與實(shí)驗(yàn)試劑詳細(xì)表 1。
1.2 實(shí)驗(yàn)原理
在塑造溫度為 44.5依1益標(biāo)準(zhǔn)下袁糞大腸菌群細(xì) 菌 能 特 異 性 產(chǎn) 生 茁 一 半 乳 糖 苷 酶,該生物菌能夠溶解色原底物釋放出來(lái)色 衣原體陽(yáng)性使細(xì)胞培養(yǎng)液呈淡黃色袁 使細(xì)胞培養(yǎng)液呈淡黃色轉(zhuǎn)變的原 理來(lái)測(cè)量水里糞大腸菌群。
1.3 實(shí)驗(yàn)步驟
1 選用 100mL 無(wú)菌檢測(cè)取樣瓶取 100mL 攪拌水 樣 (假如水質(zhì)采樣糞大腸菌群數(shù)超過(guò)2005 個(gè)/L則酌情考慮少 取并且用新配制的超純水系統(tǒng)稀釋液至 100mL 標(biāo)尺線)。
2 在配有水質(zhì)采樣的取樣瓶中添加科即得 TM(Colilert余)實(shí)驗(yàn)試劑袁充足混勻袁使實(shí)驗(yàn)試劑徹底融解。
3 把融解徹底水質(zhì)采樣倒進(jìn)無(wú)菌檢測(cè)塑造定量分析盤(97孔)。
4 選用帶 97 孔定量分析盤硫化橡膠托墊在全自動(dòng)封口機(jī)上 開(kāi)展封裝。
5 把封裝好的 97 孔定量分析盤裝人 44.5 1oC 恒 溫恒溫箱中塑造 24h。
6 塑造 24h 后從恒溫箱中取下與 97 孔呈陽(yáng)性規(guī)范色度盤開(kāi)展較為淡黃色孔色調(diào)比 97 孔呈陽(yáng)性 規(guī)范色度盤深的說(shuō)明為陽(yáng)性反應(yīng)依據(jù) 97 孔定量分析盤里的呈陽(yáng)性孔眼 對(duì)比 IDEXX 企業(yè)供應(yīng)的 MPN表報(bào)出結(jié)果。
1.3 試品來(lái)源于
水質(zhì)采樣來(lái)自慶陽(yáng)市蒲河地下水及巴家咀地面生活用水源水體袁 依照 葉地下水和污水監(jiān)測(cè)技術(shù)性規(guī) HJ/T91-2002的要求收集并于 0耀4益超低溫避 光儲(chǔ)存6h 內(nèi)開(kāi)展材料分析測(cè)試。
2 結(jié)果與探討
2.1 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
此次試驗(yàn)各取慶陽(yáng)市蒲河地下水和巴家咀飲 用水資源水 30 份試品各自用酶底物法和多管發(fā)醇 法開(kāi)展檢測(cè)數(shù)據(jù)分析袁結(jié)果見(jiàn)表 2。
2.2 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
應(yīng)用手機(jī)軟件 Excel2007, 對(duì) 2 種方式檢測(cè)的糞大腸菌群結(jié)果開(kāi)展匹配 t 檢測(cè)袁為了更好地使 2 組數(shù)據(jù)信息呈正 態(tài)遍布 現(xiàn)對(duì)信息開(kāi)展多數(shù)解決后再開(kāi)展 t 檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表 3。
由表 3 由此可見(jiàn)泊松相關(guān)系數(shù)r為 0.98堯0.994屬 強(qiáng)有關(guān)淵指數(shù)越趨向 1袁關(guān)聯(lián)性直越好袁表明2組 數(shù)據(jù)信息的關(guān)聯(lián)性非常好曰 P=0.426 和 0.725袁躍0.05袁表明 2組數(shù)據(jù)信息無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義上的顯著性差異可覺(jué)得多管發(fā)酵與酶底物法試驗(yàn)結(jié)論具備對(duì)比性與 有關(guān)參考文獻(xiàn)相符合具備不錯(cuò)的一致性。
2.3 探討
1 酶底物法與多管發(fā)酵各自測(cè)量以慶陽(yáng) 市地區(qū)的蒲河為象征的水質(zhì)采樣中的糞大腸菌群兩 者沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義上的差別遙 原文中的解析結(jié)論與 有關(guān)文獻(xiàn)的結(jié)果有不錯(cuò)的一致性 。
2 酶底物測(cè)定方法地下水中的糞大腸菌群袁操 作簡(jiǎn)單檢測(cè)的及時(shí)性好于傳統(tǒng)式的統(tǒng)計(jì)分析方法袁檢測(cè)周期時(shí)間短早期準(zhǔn)備工作少袁對(duì)試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)和工作人員規(guī)定 低袁可以更快的檢測(cè)水體微生物菌種環(huán)境污染程序流程袁達(dá)到環(huán)保監(jiān)測(cè)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)。
3 酶底物法在國(guó)外堯歐洲地區(qū)及一部分東南亞國(guó)家被普遍使用于水里堯 糞大腸菌群及腸子埃希氏菌的檢驗(yàn)并根據(jù)英國(guó) EPA 驗(yàn)證遙 我國(guó)也納入了葉日常生活 飲 用 水 標(biāo) 準(zhǔn) 檢 驗(yàn) 方 法 微 生 物 指 標(biāo) 曳 (GB 轅 T 5750援12要2006)袁能夠測(cè)量生活用水中總大腸桿菌和腸子埃希氏菌 廣東質(zhì)量監(jiān)督局于 2013 年準(zhǔn)許公布了行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)葉水里菌落總數(shù) 復(fù)合型 酶底物檢驗(yàn)方式曳(DB44 轅 T 1163要2013)遙 酶底物法在我國(guó)正逐漸逐漸營(yíng)銷推廣 可是鑒于該辦法的費(fèi)用較高袁現(xiàn)階段都還沒(méi)被普遍應(yīng)用 假如未來(lái)實(shí)驗(yàn)試劑堯耗 材價(jià)錢能有些降低 水質(zhì)采樣的測(cè)量范疇能進(jìn)一步提 高一定會(huì)獲得更快的營(yíng)銷推廣。
3 結(jié)果
固定不動(dòng)底物酶底物測(cè)定方法水質(zhì)采樣中的糞大腸菌群具備較高的準(zhǔn)確度和精確性袁與多管發(fā)酵進(jìn) 行較為在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義上無(wú)顯著性差異 能達(dá)到環(huán) 境監(jiān)測(cè)系統(tǒng)規(guī)定遙 該辦法使用簡(jiǎn)單堯便捷袁工作中效 率獲得了明顯增強(qiáng)袁合適大批量剖析水體類試品建 議國(guó)家相關(guān)單位頒布水里糞大腸菌群酶底物統(tǒng)計(jì)分析方法。