1 原材料與方式

1.1 供試土壤層

實驗地坐落于江西鷹潭市余江縣鄧家埠稻谷原種場(116°55'E，28°15′N)，該區(qū)域歸屬于典型性中亞熱帶氣候潤濕溫帶季風(fēng)氣候區(qū)，月均值最高溫度與最低溫度各自為29.9℃ 和 5.5℃，年平均溫度 17.6℃，全年度有效積溫 6 480℃，年平均降水量 1 727 mm，全年度雷暴日 289 d。本地輪種方法為：早稻–晚稻–冬天休閑娛樂。本實驗供試水稻田土壤層歸屬于江河沖積物生長發(fā)育而成的潴育型水稻土，供試原材料早稻種類為中早 33，晚稻種類為農(nóng)香 98，株行間距 20 cm × 20 cm。2008 年晚稻栽種前，土壤層基
礎(chǔ)養(yǎng)分含量為有機(jī)碳 19.20 g/kg、全氮 1.64 g/kg、全磷 0.30 g/kg、全鉀 27.26 g/kg、堿解氮 139.04 g/kg、速效性磷 5.76 mg/kg、速效性鉀 81.60 mg/kg，pH 為 4.94。

1.2 試驗設(shè)計 

實驗選用兩要素徹底任意區(qū)組的裂區(qū)設(shè)計，主區(qū)解決：①冬天還田(WS)；②春天還田(SS)；副區(qū)解決：①秸稈綜合利用，實驗期限內(nèi)全過程不加上礦質(zhì)氮 (N0)；②基本上肥，還田時不加上礦質(zhì)氮(NB)；③還田時加上早稻底肥使用量的 30% 礦質(zhì)氮(N30B)；④還田時加上早稻底肥使用量的 60% 礦質(zhì)氮 (N60B)；⑤秸桿清除(CK)； 3 次反復(fù)，共 30 個住宅小區(qū)，住宅小區(qū)總面積為 10 m × 8 m。

秸稈綜合利用解決是將晚稻獲得的所有麥草破碎至5 ~ 10 cm，勻稱分散化于田面，并按主區(qū)解決各自在冬天(12 月中下旬)或春天犁田(明年 4 月中下旬)時將田面秸桿翻進(jìn)住宅小區(qū)土壤層土壤層中，秸稈綜合利用量為 7 500 kg/hm2。秸桿清除解決是將晚稻獲得的所有麥草移除住宅小區(qū)，秸桿不還田，秸桿解決與清除解決的留茬高寬比均為 10 cm上下。 

早稻肥料施加量基肥為 N 180 kg/hm2，磷鉀肥為 P2O5 75 kg/hm2，鉀肥為 K2O 150 kg/hm2，常用的化肥基肥為尿素溶液，磷鉀肥為鈣鎂磷肥，鉀肥為氯化鉀；磷鉀肥做為底肥一次性施入，鉀肥按底肥︰抽穗肥︰穗肥 = 3︰ 4︰3 施入?；旧戏实?NB 解決按底肥︰抽穗肥︰穗 肥 = 5︰3︰2 施入，其他施于基肥及其底肥氮前施的解決其基肥使用計劃方案實際見表 1。

1.3 抽樣與測量

2013 年晚稻獲得后，在稻谷冬閑期(11 月至第二年4 月)內(nèi)共取 4 次樣，各自于 1—4 月的 10 號按時完成抽樣(冬天秸桿翻地在 2014 年 1 月 10 日)，記作：冬閑Ⅰ、冬閑Ⅱ、冬閑Ⅲ 和冬閑 Ⅳ；在 2014 年早稻生長期(4 月中下旬至 7 月中下旬)的分蘗期、拔節(jié)期、齊穗期和成熟各取一次。

試品收集于 0 ~ 15 cm 的土壤層土壤層，每一個住宅小區(qū)按“S”形 5 點取樣并攪拌。土樣置放于冰塊中，快速帶到試驗室，揀去土壤層中的由此可見根莖、秸桿等殘渣后，放置電冰箱 –20℃ 冷藏儲存，用以土壤層酶促反應(yīng)的測量。

1.4 測量新項目及方式

綿白糖轉(zhuǎn)化酶(INV)活力的測量：選用改善的二氟苯水楊酸鈉酶活性測定測量綿白糖轉(zhuǎn)換酶的活性。土壤層與綿白糖在 50℃下塑造 3 h，測量其還原性糖釋放出來總數(shù)，綿白糖轉(zhuǎn)換酶促反應(yīng)以1克土壤層每鐘頭葡萄糖水mg數(shù)表明(mg/(g·h)，50℃，3 h)。

β-葡萄糖苷酶(BG)、β-纖維二糖苷酶(CEL)、β-木甘酶(BXYL)、多酚氧化酶(PHOX)和乳酸脫氫酶(PEOX)的活力剖析選用瑩光小型板無損檢測技術(shù)。4-羥甲基-7-香豆素(MUB)在 365 nm 光波長處激起，能在
460 nm 處檢驗到瑩光，它與某種化學(xué)物質(zhì)(比如 β-D-纖維二糖)融合瑩光特點消退，根據(jù)酶的水解反應(yīng)特點將 MUB釋放出，根據(jù)檢驗瑩光量來表現(xiàn)酶的活性。

最先對 96 孔小型板依照不一樣測量的酶開展序號、系統(tǒng)分區(qū)，灰黑色和乳白色小型板(在其中，灰黑色小型板測量非氧化還原反應(yīng)酶促反應(yīng)，乳白色小型板測量氧化還原反應(yīng)酶促反應(yīng))分成緩沖溶液 緩沖溶液區(qū)、緩沖溶液 規(guī)范底物區(qū)、緩沖溶液 瑩光底物區(qū)、待測液 緩沖溶液區(qū)、待測液 規(guī)范底物區(qū)、待測液 瑩光底物區(qū)；次之為制取土壤層乳濁液實驗試劑：稱量等同于 1 g 沙質(zhì)土的鮮土，放置 250 ml殺菌乳白色塑料瓶子中，添加緩沖溶液 125 ml，波動制取成土壤層乳濁液做為待測液；隨后將配制好的緩沖溶液、被測液用 8 安全通道移液器依照次序添加早已序號系統(tǒng)分區(qū)的小型板中，最終將配制好的規(guī)范底物添加小型板，快速添加瑩光底物水溶液，將小型板放進(jìn) 25℃ 的恒溫箱黑喑塑造，在其中教室黑板塑造 4 h 后上機(jī)操作測量(測量前面10 μl 0.5 mol/L NaOH 水溶液完畢反映)，白版塑造 20 h上機(jī)操作測量。

1.5 數(shù)據(jù)分析

酶促反應(yīng)測量每一個試品設(shè)定 8 個平行面，運用平行面標(biāo)值求平均值，每一個試品得到一個測量值，隨后運用SPSS19.0 手機(jī)軟件開展解決間的方差分析。