3.2嬰兒奶粉試品中沙門菌的檢測(cè)分析
3.2.1試品中沙門菌的平板電腦分離出來
試品經(jīng)2次增菌后,畫線注射于BS瓊脂粉平板電腦、XLD瓊脂粉平板電腦和沙門菌著色平板電腦上開展分離出來塑造,結(jié)果見表2:W試品在BS、XLD及其沙門菌著色3種平板電腦上均發(fā)生異常沙門菌菌體,在其中在BS和XLD平板電腦上由此可見典型性沙門菌落③和④,而在沙門菌著色平板電腦上均為異常菌體取①和②兩個(gè)菌體評(píng)定。Q試品在BS平板電腦無異常菌體,而在XLD和沙門菌著色平板電腦上無典型性菌體,很有可能是是非非典型性菌體或影響菌。
沙門氏菌屬能造成非特異極強(qiáng)的辛脂酶,具備辛脂酶活力的影響菌有銅綠假單胞菌、粘質(zhì)沙雷氏菌和蜂窩狀哈夫犬菌,這種菌在沙門菌著色培養(yǎng)液上面轉(zhuǎn)化成暗紫色影響菌。結(jié)腸炎沙門氏菌兩相加利福尼亞亞種在沙門菌著色培養(yǎng)液上展現(xiàn)因培養(yǎng)液生產(chǎn)廠家不一樣而不一樣深綠色到深藍(lán)色菌體,這非常容易與其他腸桿菌搞混。楊云斌較為了沙門菌和影響菌在3種分離出來平板電腦上的特性,見表3。從表2和表3能夠發(fā)覺,在BS平板電腦上,典型性沙門菌落和沙門菌關(guān)鍵影響菌的菌體特性非常容易區(qū)別起來,而在別的2種平板電腦上則非常容易搞混。
3.2.2嬰兒奶粉試品中沙門菌生物化學(xué)和血清蛋白評(píng)定結(jié)果
因?yàn)楦ナ蠙幟仕徕c鏈球菌和腸子埃希氏菌的很多抗原體與沙門菌的抗原體徹底或一部分同樣,且這2種菌與沙門氏菌屬O鞭毛抗原A-F確診血清蛋白會(huì)產(chǎn)生交叉式凝集反應(yīng),因而血清蛋白評(píng)定陽(yáng)性者務(wù)必進(jìn)一步做其他生物化學(xué)評(píng)定。一般狀況,做TSI和血清學(xué)評(píng)定后,只對(duì)血清蛋白評(píng)定陽(yáng)性菌落進(jìn)一步做事后生物化學(xué)評(píng)定。為謹(jǐn)慎考慮,此次對(duì)疑是呈陰性的考評(píng)試品的菌體依然干了事后生物化學(xué)評(píng)定。
W和Q試品平板電腦分離出來出的6種異常菌體TSI和血清蛋白學(xué)評(píng)定結(jié)果見表4。表4說明,W試品在沙門菌著色平板電腦上分離出來到的暗紫色異常菌體中兩個(gè)菌體(菌體①和②)為血清學(xué)評(píng)定呈陰性,而在BS和XLD 兩個(gè)平板電腦上挑出來的2個(gè)異常菌體(菌體③和④)血清學(xué)評(píng)定呈陽(yáng)性,且生物化學(xué)評(píng)定合乎,判斷為沙門菌驗(yàn)出,菌體①②③和④歸屬于同一試品,因此①②不必生物化學(xué)再評(píng)定。Q試品在XLD平板電腦上的異常菌體(菌體⑤和⑥)經(jīng)生物化學(xué)和血清蛋白評(píng)定,結(jié)果為非沙門菌。在功能考評(píng)中,驗(yàn)出呈陽(yáng)性的分辨比呈陰性試品的要非常容易,而針對(duì)眾多形狀異常菌體的呈陰性試品,需對(duì)異常菌體逐一評(píng)定,不然易犯錯(cuò)誤。
3.3嬰兒奶粉試品中阪崎腸桿菌的檢測(cè)分析
3.3.1平板電腦分離出來
阪崎腸桿菌古代歷史一直被誤以為是淡黃色陰溝腸桿菌,因而二者相互之間影響菌;阪崎腸桿菌著色平板電腦是借助其α-葡萄糖苷酶呈陽(yáng)性,在TSA中添加XαGlc(5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-葡萄糖水苷酸),α-葡萄糖苷酶功效于XαGlc進(jìn)而阪崎腸桿菌轉(zhuǎn)化成非特異深藍(lán)色菌體。試品V在阪崎腸桿菌著色平板電腦發(fā)生異常深藍(lán)色菌體(表5),因此挑菌10個(gè)異常菌體于1 mL無菌檢測(cè)鹽水中,稀釋液攪拌后在TSA畫線分離出來塑造,依靠高倍放大鏡觀查菌體,結(jié)果發(fā)生2種菌體,有淡黃色菌體和淺黃粉紅色菌體,再進(jìn)一步做生物化學(xué)評(píng)定。試品G無阪崎腸桿菌異常菌體,算為未驗(yàn)出。挑菌異常菌體是關(guān)鍵因素,挑菌的具體位置和數(shù)量盡量擴(kuò)大捕獲幾率,假如心存僥幸讀取2~3個(gè)異常菌體,則有可能會(huì)漏驗(yàn)。
3.3.2生物化學(xué)評(píng)定
對(duì)試品V在TSA平板電腦上生長(zhǎng)發(fā)育的2種菌體⑦和⑧開展生物化學(xué)評(píng)定,如表6,結(jié)果顯示,異常菌體⑦產(chǎn)黃色素,抗霉素、山梨糖醇、磷酸氫鈣呈陰性,精氨酸雙核糖核苷酸、鼠李糖、綿白糖、蜜二糖、苦杏仁甙呈陽(yáng)性,評(píng)定結(jié)果合乎阪崎腸桿菌生物化學(xué)特點(diǎn)。菌體⑧的生物化學(xué)評(píng)定結(jié)果不符阪崎腸桿菌生物化學(xué)特點(diǎn)。不難看出,α-葡萄糖苷酶呈陽(yáng)性是阪崎腸桿菌的特性,可是并不是唯一;阪崎腸桿菌著色培養(yǎng)液對(duì)阪崎腸桿菌的非特異是有局限的,這與吳清平等的闡述一致。當(dāng)在著色平板電腦上發(fā)覺有異常菌體,若評(píng)定為弱陽(yáng)時(shí),要用全排列組合問題,不然很容易發(fā)生假陰性。
3.4嬰兒奶粉試品中沙門菌和阪崎腸桿菌檢驗(yàn)結(jié)果
W試品驗(yàn)出沙門菌,Q試品未驗(yàn)出沙門菌;V試品驗(yàn)出阪崎腸桿菌,G試品未驗(yàn)出阪崎腸桿菌,檢驗(yàn)結(jié)果令人滿意。
4結(jié)果和探討
在分離出來辨別沙門菌時(shí),BS平板電腦具備關(guān)鍵的關(guān)鍵性功效,而其他2種平板電腦上很容易受影響菌的危害,只有起輔助辨別功效。這一結(jié)果與與楊云斌等的“沙門著色培養(yǎng)液的分離出來評(píng)定實(shí)際效果最好是”的依據(jù)不一樣,但與國(guó)家行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)GB4789.4-2016的技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)中心思想一致。
辛脂酶是沙門菌著色塑造挑選設(shè)計(jì)方案的關(guān)鍵根據(jù),其對(duì)沙門菌的精確度和特異度各自為100%和84.09%。此次試驗(yàn)中,W試品在著色平板電腦上顯著全是沙門菌異常菌體,選擇2個(gè)菌體試驗(yàn)可是血清蛋白評(píng)定結(jié)果則是呈陰性,緣故是表明辛脂酶陽(yáng)性菌除開大部分沙門菌外,也有銅綠假單胞菌、粘質(zhì)沙雷氏菌、蜂窩狀哈夫犬菌、瑩光假單孢菌和惡臭味假單孢菌等。
除此之外,在本次試驗(yàn)中本試驗(yàn)室還累積了二點(diǎn)工作經(jīng)驗(yàn):第一,在打算全過程中,有心設(shè)計(jì)方案了二種規(guī)范菌互動(dòng)塑造和剝離的試驗(yàn),關(guān)鍵目標(biāo)為學(xué)習(xí)知識(shí),提高鑒別工作能力。第二,能力驗(yàn)證試品有別于一般食品類樣,應(yīng)考全過程針對(duì)典型性菌,一般作業(yè)者不易犯錯(cuò)誤,確診相對(duì)性非常容易;但針對(duì)非典型菌,則必須細(xì)心作出事后評(píng)定,而無法隨便得出結(jié)論;針對(duì)初篩是疑是陽(yáng)性者事后評(píng)定為弱陽(yáng)時(shí),則需增加異常菌的評(píng)定,必需時(shí)要全排列組合問題。