8、響應面提升試驗設(shè)計與結(jié)果

（1）響應面試驗設(shè)計

依據(jù)Box-Behnken結(jié)構(gòu)設(shè)計，開展四要素三水準實驗，提升酶輔助超聲波獲取阿爾泰金銀花黃酮類物質(zhì)的提煉加工工藝標準。實驗結(jié)果見表2。以黃酮類物質(zhì)獲取率是指標值，根據(jù)Design-ExpertV8.05手機軟件對表中實驗統(tǒng)計數(shù)據(jù)開展多元線性回歸線性擬合，得到黃酮類物質(zhì)獲取率（Y）對酶加上量（A）、乙醇濃度（B）、獲取時間（C）和獲取溫度（D）四要素的二次多種重歸仿真模擬方程式為：Y=18.03-0.15A-0.55B-0.35C-0.12D 0.39AB-0.59A²-0.93B²-0.42C²-0.41D²。
0.43AC 0.018AD-0.42BC 0.012BD-0.072CD

對該模式開展方差分析，結(jié)果如表3所顯示，該回歸分析F值14.88，P＜0.0001，方程式實體模型做到極明顯；決定系數(shù)R²=0.9320，校準指數(shù)AdjR²=0.8639；失擬項超過0.05，失擬不明顯，表明線性回歸方程線性擬合情況優(yōu)良；變異系數(shù)C.V為1.63%，說明實體模型的再現(xiàn)性非常好，因而還可以使用該實體模型提升阿爾泰金銀花黃酮類物質(zhì)的酶輔助超聲波獲取加工工藝。由各要素A、B、C、D的F值（或P值）尺寸能夠得到各要素對黃酮類物質(zhì)得率危害尺寸次序為B＞C＞A＞D。B、C的P值均低于0.01，表明乙醇濃度和獲取時間對黃酮類獲取危害極明顯。AB、AC、BC的P值低于0.01，表明酶加上量和乙醇濃度、獲取時間，乙醇濃度和獲取時間之間有顯著的配對t檢驗；而AD、BD、CD的P值超過0.05，說明她們中間的功效對黃酮類物質(zhì)獲取率沒有顯著的危害。不一樣因素配對t檢驗的響應面分析圖見圖8。根據(jù)DesignExpert8.0.5手機軟件剖析得到阿爾泰金銀花黃酮類物質(zhì)纖維素酶輔助超聲波獲取的最好工藝技術(shù)標準為:酶加上量1.42%，乙醇濃度47.10%，獲取時間38.19min，獲取溫度39.28℃；在這里加工工藝標準下，阿爾泰金銀花基礎(chǔ)理論預測分析獲取率是18.16%。

（2）認證實驗

為檢測響應面法提升后的加工工藝穩(wěn)定性，考慮到實驗過程的可行性分析，融合單要素試驗結(jié)果，將以上獲取加工工藝標準調(diào)整為：酶加上量1.4%，乙醇濃度47.0%，獲取時間38.0min，獲取溫度39.0℃。在這里前提下，開展3組平行面實驗，所得的阿爾泰金銀花黃酮類物質(zhì)獲取率平均值為18.02±0.24%，與標準偏差的相對偏差為0.8%，線性回歸方程估計值與真實值相符合，表明應用響應面法提升獲得的建模主要參數(shù)精確靠譜，能真正反應各要素對阿爾泰金銀花黃酮類物質(zhì)獲取率的危害。

三、探討

文中討論了纖維素酶、半纖維素酶、果膠酶和中性化胰蛋白酶對超聲波獲取阿爾泰金銀花黃酮類物質(zhì)的協(xié)助功效，結(jié)果發(fā)覺他們均能提升黃酮類物質(zhì)的獲取率，但比較之下，纖維素酶在水溶液pH=4時功效較大。在提煉全過程中，纖維素酶水解反應可毀壞植物細胞的植物細胞，推動了其胞內(nèi)所含黃酮類類物質(zhì)的很多外滲，再融合超聲波的功效，水溶液中化學物質(zhì)濃度值擴大，獲取率獲得很大提升伴隨著料液比的擴大，黃酮類物質(zhì)的獲取率也持續(xù)擴大，在1:40之后，獲取率不會再提升，趨向輕緩。根據(jù)此，依據(jù)Box-Behnken結(jié)構(gòu)設(shè)計，挑選對獲取率危害很大的要素：酶加上量、乙醇濃度、獲取時間和獲取溫度，開展四要素三水準實驗，響應面提升阿爾泰金銀花黃酮類物質(zhì)的纖維素酶輔助超聲波獲取加工工藝，最好獲取加工工藝標準為：pH為4，料液比1:40，超聲波輸出功率90W，酶加上量1.4%，乙醇濃度47.0%，獲取時間38.0min，獲取溫度39.0℃，在這里加工工藝標準下阿爾泰金銀花黃酮類物質(zhì)獲取率可以達到18.0%之上，高過早期流回獲取加工工藝科學研究得到的獲取率17.05%；且該辦法簡便高效率、低成本、便于實際操作?？茖W研究結(jié)論能為阿爾泰金銀花以及黃酮類物質(zhì)的深層次開發(fā)設(shè)計給予科學論證。