2.2.3 固定化酶EC溶解酶的酒精耐受力

EC溶解酶的酒精耐受力在酒精飲料的使用中特別關(guān)鍵。從圖6能夠看得出，伴隨著酒精摩爾分?jǐn)?shù)的上升，分散酶和固定化酶EC溶解酶酶活均隨著降低，但固定化酶EC溶解酶對(duì)酒精主要表現(xiàn)出優(yōu)良的耐受力。在酒精摩爾分?jǐn)?shù)為7％～25％時(shí)，同定化EC溶解酶酶活均能保存50％之上.同分散酶的酒精耐受力對(duì)比，轉(zhuǎn)變有一定差別，基本推斷此固定化酶方式對(duì)其酒精耐受力和酶活提升有一定危害。表明此固定化酶EC溶解酶與分散酶對(duì)比，在酒精摩爾分?jǐn)?shù)相對(duì)性較低時(shí)能夠維持相對(duì)性較高的酶活，適用酒精摩爾分?jǐn)?shù)相對(duì)性較低的發(fā)醇酒精飲料。

2.2.4 固定化酶KC溶解酶的多次重復(fù)使用性

如圖所示7所顯示，在仿真模擬酒樣對(duì)固定化酶EC溶解酶開展可重復(fù)性試驗(yàn)，數(shù)據(jù)顯示，每一次運(yùn)用后酶活均有降低。當(dāng)多次重復(fù)使用8次之后，固定化酶EC溶解酶酶魅力保存在50％之上，因而在8次前應(yīng)用成效不錯(cuò)。

此結(jié)果與文獻(xiàn)資料報(bào)導(dǎo)的GO-CS復(fù)合型同定酸堿性酶應(yīng)用10次時(shí)的酶活80％對(duì)比，可應(yīng)用頻次稍顯缺點(diǎn)圈，但就所得的固定化來講，依然能夠考量將應(yīng)用頻次盡可能操控在8次之內(nèi)以獲取更快的實(shí)際效果。

2.2.5 固定化酶EC溶解酶的貯存可靠性

固定化酶EC溶解酶在不一樣存儲(chǔ)溫度隨儲(chǔ)藏時(shí)間的酶活轉(zhuǎn)變?nèi)鐖D所示8所顯示。在4℃標(biāo)準(zhǔn)下，酶活隨時(shí)隨地問慢慢減少，酶活減少速度在1～3周和4～6周的改變都較穩(wěn)定，而在3～4周的改變較大：且儲(chǔ)藏6周以內(nèi)，酶活損害不夠30％。在20℃標(biāo)準(zhǔn)下，酶活隨時(shí)間增加逐步減少，至第5周時(shí)基本上維持不會(huì)改變，但在儲(chǔ)藏6周以后，酶活僅做到60％。表明儲(chǔ)藏溫度相同定化EC溶解酶的酶活有一定危害，但并不是唯一要素。因而在該試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)下，盡可能將固定化儲(chǔ)藏在4～20℃，但根據(jù)固定化適宜反映溫度和出自于經(jīng)濟(jì)發(fā)展節(jié)省層面的考慮到，以20℃做為最好儲(chǔ)藏溫度標(biāo)準(zhǔn)。

2.3 固定化對(duì)“美樂”紅酒的危害

2.3.1 固定化在“美樂”紅酒中的可靠性

如圖所示9所顯示，伴隨著靜放時(shí)間提升，分散酶和固定化酶EC溶解酶酶活均出現(xiàn)下降趨勢(shì)，但存全部流程中，固定化酶活均高過分散酶酶活。當(dāng)靜放96h時(shí)，固定化酶活與分散酶酶活相距較大，相比于最初酶活差別，中后期的差別更高，可能是南于同樣酶量的標(biāo)準(zhǔn)下，最初分散酶更易于與底物觸碰，而隨之時(shí)間流逝，固定化因?yàn)槊浇榈谋Ｕ瞎π?，仍能漸漸地表明出較高的酶促反應(yīng)。靜放144h以前，固定化酶活的損率在50％下列，表明此酶能夠融入“美樂”紅酒的微自然環(huán)境，用以紅酒中EC的除去。

2.3. 2固定化對(duì)“美樂”紅酒中EC的污泥負(fù)荷

“美樂"紅酒試品中加上相等酶活的固定化酶EC溶解酶和分散酶一段時(shí)間后，試品中EC濃度值慢慢減少。

從圖10能夠看得出,試品里加酶解決后,解決組的EC濃度值均少于對(duì)照實(shí)驗(yàn)，解決組的EC污泥負(fù)荷高過對(duì)照實(shí)驗(yàn)，表明不論是分散或是固定化酶EC溶解酶的解決,均使“美樂”紅酒中EC濃度值獲得了減少，但分散酶酶法除去EC的成效要好于固定化解決法。在該試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)下,固定化酶EC溶解酶對(duì)“美樂”紅酒中EC的污泥負(fù)荷可以達(dá)到30.90%,是分散酶的81.53%。

2.3.3 固定化對(duì)“美樂”紅酒揮發(fā)物有機(jī)物的危害

紅酒的口味并不是單獨(dú)出現(xiàn)的，只是由醇、酯、酸、醛、酮、三萜類和C13-萜烯類物質(zhì)互相融洽而發(fā)生的，他們一同產(chǎn)生了紅酒香味的構(gòu)成成份。對(duì)“美樂”紅酒中香味化學(xué)物質(zhì)以及相對(duì)性成分開展了明確和定性分析。

對(duì)照實(shí)驗(yàn)和解決組的紅酒中揮發(fā)物口味成分的相應(yīng)成分如表1所顯示，在3種處理方法下的紅酒巾，共監(jiān)測(cè)到29種香味成份，包含12種脂類、9種醛類、3種有機(jī)物和5種醛、酮、酚類化合物。經(jīng)剖析得知，不一樣解決組中各揮發(fā)物有機(jī)物的相應(yīng)成分中間無明顯差別，可是相對(duì)于對(duì)照實(shí)驗(yàn)，解決組的有機(jī)物類型均有一定的降低，在其中固定化解決組降低了8種化學(xué)物質(zhì)，而分散酶解決組降低了12種化學(xué)物質(zhì)。表明酶解決對(duì)紅酒巾揮發(fā)物有機(jī)物的品種總數(shù)有一些危害，但對(duì)化學(xué)物質(zhì)的相應(yīng)成分危害不明顯，并且，固定化處理方法對(duì)紅酒更為友善。對(duì)比對(duì)照實(shí)驗(yàn).酶解決組里的成分均發(fā)生了總數(shù)的降低，但消退的化學(xué)物質(zhì)并不相同，固定化解決組降低的成分包含：香茅醇、正癸醛、己酸乙酯、心酸乙酯、甲酸異戊酯、甲酸己酯、甲酸苯乙酯和等保。而分散酶解決組降低的化學(xué)物質(zhì)分別是香茅醇、盧一大馬士酮、糠醛、正癸醛、己酸乙酯、苯乙酸丁酯、甲酸異戊酯、甲酸苯乙酯、丁二酸二乙酯、2，3一丁二醇、等保、1一己醇。表明不一樣種類的酶解決對(duì)紅酒的危害不一樣，但充分考慮分散酶造成芬芳味和果香氣化學(xué)物質(zhì)的損害更高，F(xiàn)向于在考慮到口味多元性時(shí)要防止不愉快口味的發(fā)展趨勢(shì)，因而提議對(duì)“美樂”紅酒應(yīng)用固定化酶EC溶解酶開展解決。

除此之外，不一樣解決組測(cè)得的揮發(fā)物口味化學(xué)物質(zhì)的構(gòu)成也是有顯著不一樣。表1和圖11表明了“美樂”紅酒中不一樣酶處理方法下關(guān)鍵揮發(fā)物香味成份(醇、脂類、酸和醛)的變化趨勢(shì)。

南C6化學(xué)物質(zhì)、揮發(fā)物酚類物質(zhì)和苯類物質(zhì)構(gòu)成的香味成份在“美樂”紅酒中伴隨著酶處理方法的差異而呈現(xiàn)不一樣的發(fā)展趨勢(shì)。酶解決后醛類和代烴占有率減少，而脂類和堿類均有所增加，別的類基本上維持不會(huì)改變，說明不一樣的酶處理方法對(duì)揮發(fā)物香味化學(xué)物質(zhì)造成了一定危害。雖然酶處理方法對(duì)紅酒巾揮發(fā)物有機(jī)物的相應(yīng)成分沒有明顯危害，但造成了香味化學(xué)物質(zhì)類型的降低和香味化學(xué)成分的更改，且分散酶對(duì)其不良危害要超過同定化酶。因而，在大家接納口味有一定的更改的條件下，同定化EC溶解酶更合適用以“美樂”紅酒。

3 總結(jié)

根據(jù)對(duì)殼聚糖與戊二醛的化學(xué)交聯(lián)標(biāo)準(zhǔn)開展提升后發(fā)覺，以摩爾分?jǐn)?shù)5％的戊二醛水溶液作偶聯(lián)劑，化學(xué)交聯(lián)反映開展8h時(shí)，媒介對(duì)酶的固定量做到較大。以后對(duì)EC溶解酶的酶學(xué)特性進(jìn)行剖析，獲得以下結(jié)果：固定化酶EC溶解酶的適宜氣溫是42℃，在這里溫度下置放24h時(shí)相對(duì)性酶活達(dá)60％之上；其適宜DH是3.6，在這里前提下置放24h的相對(duì)性酶活超過60％：在摩爾分?jǐn)?shù)7％～25％酒精下，酶活均保證在50％之上，表明該固定化的酒精承受覆蓋面廣，催化劑的活性高：該酶在多次重復(fù)使用8次能，酶活還維持在50％之上.并且各自在4℃和20℃下儲(chǔ)藏6星期過后的酶活損率不夠30％幣H40％。最終，選用ATPS融合GC-MS檢驗(yàn)不一樣酶解決的“美樂”紅酒中包含的EC，獲知同定化EC溶解酶的EC污泥負(fù)荷達(dá)30.90％，是分散酶的81.53％。EC溶解酶的處理方法對(duì)紅葡萄酒中揮發(fā)物有機(jī)物的相應(yīng)成分沒有明顯危害，僅僅造成了香味化學(xué)物質(zhì)類型的降低和香味化學(xué)成分的更改，但固定化對(duì)揮發(fā)物口味成分的不良危害遠(yuǎn)小于分散酶。