(2)正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果
根據(jù)單要素實(shí)驗(yàn)結(jié)果,正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案及結(jié)果見表1。
表1偏差數(shù)據(jù)顯示,水料比(C)對(duì)末水壇海菜含糖量獲取率危害較大 ,次之是獲取溫度(A),而獲取時(shí)間(B)對(duì)含糖量獲取率危害最少。末水壇海菜含糖量最佳獲取加工工藝為A2B2C1,按此加工工藝獲取含糖量,隨后用2%(mg/mL)的纖維素酶在45℃下水解反應(yīng)60min除去蛋白質(zhì),含糖量獲取率是8.5%,高過表1中全部實(shí)驗(yàn)結(jié)果。因而,超音波輔助水提末水壇海菜含糖量最佳加工工藝技術(shù)參數(shù)明確如下所示:獲取溫度65℃、獲取時(shí)間3.5min、水料比30:1(mL/g)。
2、番木瓜胰蛋白酶除去蛋白質(zhì)加工工藝提升結(jié)果
(1)單要素實(shí)驗(yàn)結(jié)果
加酶量、水解反應(yīng)溫度、水解反應(yīng)時(shí)間三個(gè)要素對(duì)末水壇海菜含糖量獲取率的危害見圖2。
由圖2得知:①含糖量獲取率隨加酶量的提高而擴(kuò)大,當(dāng)加酶量超出2%(mg/mL)后,含糖量獲取率提升遲緩并日趨輕緩。這主要是因?yàn)樵谝欢笣舛戎捣懂爟?nèi),底物蛋白質(zhì)水解率隨酶濃度值提高而顯著增加,因此測(cè)出的含糖量濃度值也持續(xù)擴(kuò)大,但當(dāng)酶濃度值超出該范疇后,蛋白的水解反應(yīng)率提升遲緩直到趨向均衡,這時(shí)測(cè)出的含糖量濃度值也慢慢平穩(wěn)。②伴隨著水解反應(yīng)溫度的提升,含糖量獲取首先擴(kuò)大后減少,在50℃時(shí),含糖量獲取率最大。這表明該溫度處在蛋白酶k的適宜反映溫度范圍內(nèi),這時(shí)蛋白質(zhì)水解率最大,因此測(cè)得含糖量濃度值最大。③伴隨著水解反應(yīng)時(shí)間的增加,含糖量獲取首先擴(kuò)大后減少,表明在一定時(shí)間段內(nèi),蛋白質(zhì)水解率伴隨著水解反應(yīng)時(shí)間增加而提升,因此測(cè)出的含糖量濃度值也持續(xù)擴(kuò)大,但時(shí)間太長(zhǎng)會(huì)造成蛋白酶k轉(zhuǎn)性降解,使蛋白質(zhì)水解率降低,此外長(zhǎng)期也會(huì)造成含糖量的溶解。
(2)正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果
根據(jù)單要素實(shí)驗(yàn)結(jié)果,正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案及結(jié)果見表2。
表2偏差數(shù)據(jù)顯示,水解反應(yīng)溫度(E)對(duì)末水壇海菜含糖量獲取率危害較大 ,加酶量(D)的知名度其次,而水解反應(yīng)時(shí)間(F)對(duì)含糖量獲取率危害最少。蛋白酶k除去蛋白質(zhì)最佳加工工藝為D3E2F1。選用超音波輔助水說法最佳加工工藝獲取含糖量后,再用D3E2F1加工工藝除去蛋白質(zhì),最后含糖量獲取率是9.6%,與表2中6號(hào)實(shí)驗(yàn)結(jié)果9.5%基本上差不多。6號(hào)實(shí)驗(yàn)加工工藝為D3E2F1,即加酶量為3%,從節(jié)省實(shí)驗(yàn)試劑視角采用加酶量為2%的D3E2F1加工工藝更有效。最后明確蛋白酶k除去蛋白質(zhì)最佳加工工藝如下所示:加酶量2%(mg/mL)、水解反應(yīng)溫度50℃、獲取時(shí)間60min。
三、結(jié)果與探討
(1)末水壇海菜做為壇海菜生產(chǎn)制造中的邊角料,經(jīng)濟(jì)價(jià)值較低。殊不知末水壇海菜中含糖量成分特別高,如能高效率獲取,則可進(jìn)一步提高末水壇海菜的增加值。充分考慮超音波粉碎體細(xì)胞后含糖量可溶出,及其蛋白酶k可高效率水解反應(yīng)粗多糖中的蛋白,因此本探討選用超音波輔助水提一胰蛋白酶法獲取末水壇海菜含糖量,以求提升含糖量獲取率。
(2)最先根據(jù)單要素實(shí)驗(yàn)考查了獲取溫度、獲取時(shí)間及水料比三個(gè)要素對(duì)含糖量獲取率的危害,并根據(jù)正交實(shí)驗(yàn)得到了超音波輔助水提末水壇海菜含糖量的最佳加工工藝主要參數(shù):獲取溫度65℃、獲取時(shí)間3.5min、水料比30:1(mL/g)。隨后,根據(jù)單要素實(shí)驗(yàn)調(diào)查了加酶量、水解反應(yīng)溫度及水解反應(yīng)時(shí)間對(duì)含糖量獲取率的危害,并根據(jù)正交實(shí)驗(yàn)得到了蛋白酶k除去蛋白質(zhì)的最佳加工工藝主要參數(shù):加酶量2%(mg/mL)、水解反應(yīng)溫度50℃、獲取時(shí)間60min。在以上最佳情況下獲取末水壇海菜含糖量,含糖量獲取率達(dá)9.5%?,F(xiàn)階段,參考文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)的海菜含糖量獲取率結(jié)果區(qū)別很大,如王賢等選用微波加熱法獲取末水壇海菜含糖量,獲取率是5.054%;張雙靈和吳瓊英等均選用微波加熱法獲取條斑海菜含糖量,獲取率各自為8.47%和5.358;而馬波等采取超音波輔助偏堿果膠酶獲取條斑海菜含糖量,得率為13.8%。由此可見,超音波輔助水提-胰蛋白酶法是一種獲取海菜含糖量的有效的方式。
(3)末水壇海菜獲取含糖量后,邊角余料可再次用以獲取別的活力成份或立即作為化肥或精飼料,進(jìn)而使末水壇海菜獲得最高程度上運(yùn)用。檢測(cè)分析末水壇海菜含糖量的分子質(zhì)量、構(gòu)造構(gòu)成以及生物活性,將是大家將來的分析關(guān)鍵。