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Copine-3-增強(qiáng)型綠色熒光蛋白融合蛋白在細(xì)胞中的表達(dá)和定位(三)

來(lái)源:鄭州天順食品添加劑有限公司 發(fā)布時(shí)間:2021-09-19 15:51:56 關(guān)注: 0 次
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在Copines蛋白質(zhì)大家族中,Copine-3蛋白質(zhì)最開始是在科學(xué)研究白體細(xì)胞介素2(interleukin-2,IL-2)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)試驗(yàn)中,因?yàn)镸ikbeta1(白細(xì)胞介素2蛋白激酶β鏈的抗原)的交叉式反映活力被偶然發(fā)現(xiàn)。Heinrich等發(fā)覺,在乳癌體細(xì)胞中Copine-3蛋白質(zhì)以Ca2 依賴感方法定坐落于膜,并與ERBB2相互影響推動(dòng)腫瘤干細(xì)胞轉(zhuǎn)移,Copine-3可能是一個(gè)根據(jù)人表層細(xì)胞生長(zhǎng)因子蛋白激酶-2(human epidermal growth factor receptor 2,HER2,又被稱為ERBB1)調(diào)整腫瘤干細(xì)胞健身運(yùn)動(dòng)的因素,與惡性腫瘤細(xì)胞質(zhì)膜上ERBB2的激話相關(guān)。研究發(fā)現(xiàn),Copine-3蛋白質(zhì)是一個(gè)非小細(xì)胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的腫瘤轉(zhuǎn)移推動(dòng)因素,并與NSCLC的欠佳療效有關(guān),推斷Copine-3與磷酸化色氨酸蛋白激酶蛋白激酶和活性的蛋白激酶C1蛋白激酶(receptor for activated C kinase1,RACK1)相互影響,并激話NSCLC體細(xì)胞中的粘附斑蛋白激酶(focal adhesion kinase,FAK)數(shù)據(jù)信號(hào)傳輸通道,推動(dòng)非小細(xì)胞肺癌轉(zhuǎn)移和侵蝕。Chen等發(fā)覺,Copine-3蛋白質(zhì)高表述與末期肺癌病人對(duì)索拉菲尼醫(yī)治的欠佳愈后相關(guān),推斷Copine-3蛋白質(zhì)很有可能參加管控上皮細(xì)胞-質(zhì)間轉(zhuǎn)換(epithelial-mesenchymal transition,EMT)方式,提高索拉菲尼抑止晚期肝癌體細(xì)胞MHCC97-H的轉(zhuǎn)移和侵蝕。這種分析都提醒,Copine-3蛋白質(zhì)在植物體內(nèi),尤其是腫瘤干細(xì)胞中很有可能擔(dān)負(fù)著至關(guān)重要的生態(tài)學(xué)作用。

總的來(lái)說(shuō),Copine-3蛋白質(zhì)在人體細(xì)胞中擔(dān)負(fù)的生態(tài)學(xué)作用繁雜,與多種多樣腫瘤干細(xì)胞的轉(zhuǎn)移或遷移相關(guān),并很有可能參加有關(guān)轉(zhuǎn)錄因子的管控。蛋白是生命活動(dòng)的首要責(zé)任者,體細(xì)胞的很多特點(diǎn)和作用都和蛋白質(zhì)有關(guān),而一些功能蛋白具備機(jī)構(gòu)表述非特異。蛋白的體細(xì)胞精準(zhǔn)定位與其說(shuō)分子生物學(xué)作用息息相關(guān),特別是在腫瘤干細(xì)胞中,蛋白質(zhì)的屬七和弦入核會(huì)造成其作用的更改,從而危害體細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。科學(xué)研究蛋白質(zhì)精準(zhǔn)定位,對(duì)研究其參加有關(guān)數(shù)據(jù)信號(hào)傳輸及確立轉(zhuǎn)錄因子體制有關(guān)鍵功效。研究發(fā)現(xiàn),在T47D和SKBr3體細(xì)胞中,用離子霉素解決后,運(yùn)用免疫熒光在細(xì)胞質(zhì)中都檢驗(yàn)到Copine-3蛋白質(zhì),而對(duì)照實(shí)驗(yàn)體細(xì)胞(二甲基亞砜解決)中,Copine-3蛋白質(zhì)則主要是出現(xiàn)于細(xì)胞核中。本研究組在對(duì)惡性腫瘤功能蛋白的分析中發(fā)覺,Copine-3蛋白質(zhì)危害腫瘤干細(xì)胞的成長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移,并參加有關(guān)轉(zhuǎn)錄因子管控。Copine-3蛋白質(zhì)的屬七和弦入核和有關(guān)轉(zhuǎn)錄因子科學(xué)研究,提醒其在惡性腫瘤的出現(xiàn)和未來(lái)發(fā)展全過(guò)程,尤其是體細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中具有關(guān)鍵功效。

大家從HBE體細(xì)胞中復(fù)制獲得編號(hào)人Copine-3蛋白質(zhì)的CPNE3遺傳基因,搭建p EGFP-N1-CPNE3真核表達(dá)載體,各自轉(zhuǎn)染人293T和H1299體細(xì)胞,激光器掃描儀共焦顯微鏡、免疫印跡法檢驗(yàn)體細(xì)胞試品,免疫力機(jī)構(gòu)化學(xué)檢測(cè)肺癌臨床醫(yī)學(xué)試品,結(jié)果顯示,Copine-3蛋白質(zhì)定坐落于細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)。大家的試驗(yàn)為進(jìn)一步科學(xué)研究該蛋白質(zhì)在腫瘤干細(xì)胞內(nèi)的作用,以及胞內(nèi)精準(zhǔn)定位與細(xì)胞學(xué)作用相互之間的關(guān)聯(lián)確立了基本。

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