(2)底物濃度值
底物濃度值對酶解實際效果的干擾如圖2,底物濃度值越大酶解高效率越低,做到高還原性糖提取率所需的時間就越長。在反映開展到60h的情況下底物濃度值為10g/L的產(chǎn)率為67.25%,底物濃度值為70g/L的提取率僅有48.42%。在現(xiàn)實生產(chǎn)過程中,過高或過低的底物濃度值都不太適合用于工業(yè)化生產(chǎn),因而挑選30g/L、40g/L、50g/L開展提升實驗。
(3)pH
pH對還原性糖提取率的危害如圖所示3所顯示,從圖上能夠看得出,伴隨著pH的減少外切酶的酶解實際效果越變越好。在pH為3時反映60h還原性糖得率能夠達到73.38%。因此 挑選pH為3、4、5開展提升實驗。
(4)加酶量
加酶量對酶解實際效果的干擾如圖4,加酶量越大做到反映均衡的時間就越少酶解實際效果就越高。加酶量為20U/g時反映60h的還原性糖得率為42.18%,加酶量為100U/g,反映36h就可達70.13%。雖然加酶量越大酶解實際效果就越高,但綜合性經(jīng)濟發(fā)展要素,挑選40U/g,60U/g,80U/g開展提升實驗。
2、正交實驗結果
應用Minitab開展正交實驗剖析,依照一般線性模型開展方差分析。偏差剖析結果顯示,各要素的層次次序為:D(加酶量)>C(底物濃度值)>B(pH)>A(溫度)。表3的方差分析結果顯示加酶量D,底物濃度值C是明顯的影響因素與偏差剖析結果相一致。充分考慮工業(yè)化生產(chǎn)中的社會經(jīng)濟要素,pH越貼近中性化加上的緩沖劑就越低,原材料費用就越低因而挑選pH=5;較低的環(huán)境溫度需要的耗能就越低,因而挑選溫度為450C。融合標準差與偏差結果剖析菊粉外切酶酶解最好的技術標準為A1B3C3D3,即挑選450C的反映溫度,pH為5,底物濃度值50g/L,加酶量80U/g做為酶解的最好反映標準。
3、可重復性實驗結果
依照正交實驗的結果開展認證實驗,在450C,pH=5,加酶量為80U/g,底物濃度值為50g/L的標準下反映60h。開展6組平行面實驗結果如表4,反復6組平行面實驗均值得率為83.63%。汪倫記等應用試驗室自提純菊粉外切酶能夠達到73.52%的酶解率(界定與文中中得率界定同樣)。菊粉酶來源于不一樣,菊粉原材料原產(chǎn)地不一樣可能是酶解率可能是酶解率區(qū)別的首要緣故。
三、結果
本實驗選用菊粉外切酶酶解菊粉生產(chǎn)制造高果糖漿,根據(jù)單要素實驗與正交實驗,得到各要素危害還原性糖提取率的尺寸次序先后為:底物濃度值>加酶量>pH>溫度。最后確認最好酶解標準為:底物濃度值為50g/L,加酶量80U/g(底物),pH=5,溫度450C,在這里最佳情況下能夠得到83.63%的還原性糖得率。可重復性實驗表明,該方法具備優(yōu)良的可重復性,能為工業(yè)化生產(chǎn)高果糖漿給予理論來源與參照。