因而，本試驗(yàn)選用AtlantisT3離子交換柱，以2.5mmol/L乙酸銨甲醇溶液-2.5mmol/L乙酸銨溶液開展梯度方向過柱。圖3由此可見15種化學(xué)物質(zhì)在12min內(nèi)所有排出，日標(biāo)化學(xué)物質(zhì)保存期適度，峰總面積、頻率穩(wěn)定度較高，雜峰回應(yīng)較小；在空缺栽培基質(zhì)中加上日標(biāo)化學(xué)物質(zhì)，在以上檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)下，譜圖無影響雜峰，13種PFCs回應(yīng)好。隨碳鏈的提升，PFCs在C₁₈柱上的保存慢慢提高，同一碳鏈數(shù)全氟磺酸類物質(zhì)保存強(qiáng)過全氟羧基類物質(zhì)。PFBA最開始排出，PFDoS最終排出。

2.1.2質(zhì)譜分析標(biāo)準(zhǔn)挑選

PFCs化學(xué)結(jié)構(gòu)中具備羧基或磺酸基，因而選用空氣負(fù)離子方式檢驗(yàn)。本試驗(yàn)選用流動(dòng)性注入氣相方法，各自對(duì)5μg/mL標(biāo)液開展m/z200-1000ESI一級(jí)全掃捕，南試驗(yàn)結(jié)果發(fā)覺，PFCs關(guān)鍵以水解后喪失甲基上氫原子[M-H]^–最強(qiáng)，明確其為標(biāo)準(zhǔn)分子離子，并提升噴霧器工作電壓、蒸汽溫度、正離子傳送管溫度以得到極強(qiáng)的響應(yīng)值。下面，以其做為母正離子開展子離子掃描儀并提升撞擊動(dòng)能，明確判定正離子和定量分析正離子。在研究操作過程中，PFCAs轉(zhuǎn)化成[M-H-44]^–子離子，推論是PFCAs產(chǎn)生中性化遺失CO₂造成；PFSAs轉(zhuǎn)化成m/z99和m/z80子離子，推論是PFSAs破裂轉(zhuǎn)化成[FSO₃]和[SO₃]^–。此次試驗(yàn)選是PFSAs破裂轉(zhuǎn)化成[FSO₃]和[SO₃]。此次試驗(yàn)選擇進(jìn)化速率較高且影響較少的子離子[M-H-44]-和[SO₃]^–各自做為PFCAs和PFSAs的定量分析正離子。

2.2前解決提升

對(duì)于小動(dòng)物原性食品類(肝部、腎臟功能、全身肌肉)栽培基質(zhì)繁雜、帶有大量的蛋白及內(nèi)源化學(xué)物質(zhì)等特性，本探討選用改進(jìn)的QuEChERS試品前解決方式，堿化乙腈獲取，C₁₈、PSA和GCB混和吸收劑分散化固相蒂取凈化處理，降低栽培基質(zhì)巾殘?jiān)绊?、提升利用率?/p>

2.2.1獲取有機(jī)溶劑提升

已報(bào)導(dǎo)的參考文獻(xiàn)中選用乙腈、硫酸-乙腈做為獲取有機(jī)溶劑獲取小動(dòng)物原性食品類的肌肉組織和肝部栽培基質(zhì)中的PFCs。由于乙腈是較常用的小動(dòng)物原性食品類有機(jī)化學(xué)獲取有機(jī)溶劑，并且PFCs是酸堿性化學(xué)物質(zhì)，在酸堿性條件下呈非離解情況，有益于進(jìn)到有機(jī)相，因此本試驗(yàn)挑選硫酸-乙腈做為獲取有機(jī)溶劑。

與此同時(shí)，調(diào)查了0.05％、0.1％、0.2％、0.3％網(wǎng)個(gè)不一樣濃度值硫酸-乙腈對(duì)各種動(dòng)物原性食品類中13種PFCs的獲取同成品率。圖4結(jié)果顯示，在0.05％～0.3％范同內(nèi)，9種PFCAs的利用率基本上是逐步提升發(fā)展趨勢(shì)，4種勢(shì)，0.1％、0.2％、0.3％硫酸-乙腈的利用率均在有效范疇內(nèi)，各自為76.3％～114.6％、95.3％～119.4％、85.8％～118.9％。以上三個(gè)濃度值全是適合的獲取濃度值，但0.2％硫酸-乙腈的利用率較集中化，遍布在95％～120％之問，最少利用率95.3％均超過其它2個(gè)濃度值；與此同時(shí)為防止提升硫酸使用量對(duì)事后剖析造成十?dāng)_，因此 挑選0.2％硫酸-乙腈做為獲取有機(jī)溶劑。在提煉全過程中，0.2％硫酸-乙腈使試品栽培基質(zhì)中很多蛋白質(zhì)水解產(chǎn)生沉積，并利用快速離心式除去。但含脂量較高的試樣開展蛋白沉淀時(shí)，易將試樣中的脂質(zhì)和水溶殘?jiān)搏@取出去，導(dǎo)致萃取液渾濁，很有可能對(duì)LC-MS/MS剖析造成栽培基質(zhì)影響，因而對(duì)萃取液要進(jìn)一步凈化處理。

2.2.2凈化處理方法提升

QuEChERS方式是采用分散化固相葦取技術(shù)性凈化處理，根據(jù)將固相吸收劑立即添加到試品萃取液中做到吸咐影響成分的目地。小動(dòng)物原性食品類中存有蛋白、糖類與碳水化合物、黑色素、人體脂肪、谷甾醇等化學(xué)物質(zhì)，能夠利用使用不一樣種類吸收劑做到清潔實(shí)際效果。已經(jīng)有參考文獻(xiàn)采用C₁₈、PSA、GCB三種吸收劑單一或不一樣配制開展PFCs凈化處理，但存有試品栽培基質(zhì)類型較少或檢驗(yàn)新項(xiàng)目少等缺陷。本試驗(yàn)較為了3種吸收劑單一和混和方法對(duì)各種動(dòng)物原性食品類的肝部、腎臟功能和全身肌肉中多種多樣PFCs的清潔作用及利用率。

2.2.2.1C₁₈提升

C₁₈關(guān)鍵吸咐人體脂肪和脂類等非極性共萃物。根據(jù)在空缺試品中加上總體目標(biāo)物，做2μg/kg加上濃度值3個(gè)平行面，較為40～100mg單一吸收劑C₁₈對(duì)PFCs利用率的危害，發(fā)覺伴隨著C₁₈使用量由40mg提升到80mg，同成品率亦提升，在80mg做到88.4％～116.3％(見圖5)；由80mg提升到100mg，大部分PFCAs利用率基本上維持不會(huì)改變，4種PFSAs和PFHpA、PFDA利用率有一定的降低，但13種PFCs利用率仍處在85.5％～118.0％的有效范疇(見圖5)。因而選用有效同成品率的最少使用量80mg。但凈化處理后的溶劑有黑色素殘余，會(huì)環(huán)境污染色涪柱及測(cè)試儀器，必須進(jìn)一步除去黑色素。

2.2.2.2PSA優(yōu)化

PSA是一種弱陰離子交換劑，能夠吸咐糖類與碳水化合物、有機(jī)物、小量黑色素等正負(fù)極影響化學(xué)物質(zhì)。在空缺試品中加上日標(biāo)物，做2μg/kg加上濃度值3個(gè)平行面，在80mgC₁₈凈化處理基本上，與此同時(shí)添加80～140mgPSA觀查PFCs的叫成品率轉(zhuǎn)變狀況。由圖6能夠 獲知伴隨著PSA使用量的提升，PFCAs利用率呈先升高后下降趨勢(shì)，并在100、120mg時(shí)利用率做到有效最高值；PFSAs同成品率呈下降趨勢(shì)，80、100mg同成品率是83.9％～92.1％。綜合性考慮到，挑選100mgPSA為最好使用量。但凈化處理后的溶劑有黑色素殘余，必須添加GCB除去。