化學(xué)物質(zhì)13:淡黃色針晶,EI-MS:m/z 624 ,化學(xué)式為C28H32O16。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 7.87 (1H, s, H-2′), 7.53 (1H, d, J = 8.0 Hz, H-6′), 6.93 (1H, d, J = 8.0 Hz, H-5′), 6.41 (1H, s, H-8), 6.20 (1H, s, H-6), 5.45 (1H, d, J = 7.2 Hz, Glc, H-1′′), 4.44 (1H, br s, Rha, H-1′′′), 3.27 (3H, s, -OCH3), 0.99 (3H, d, J = 6.2 Hz, Rha C-6′′′), 0.99 (3H, d, J = 6.1 Hz, Rha, H-6′′′);13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ: 177.3 (C-4), 164.5 (C-7), 161.2 (C-5), 157.1 (C-2), 156.1 (C-9), 149.1 (C-4′), 147.5 (C-3′), 133.1 (C-3), 122.4 (C-6′), 121.2 (C-1′), 115.4 (C-5′), 113.4 (C-2′), 103.4 (C-10), 102.2 (C-1′′), 101.0 (C-1′′′), 99.6 (C-6), 94.4 (C-8), 76.7 (C-3′′), 76.1 (C-5′′), 74.5 (C-2′′), 72.1 (C-4′′′), 70.9 (C-2′′′), 70.7 (C-4′′), 70.3 (C-3′′′), 68.5 (C-5′′′), 67.2 (C-6′′), 56.0 (-OCH3), 18.0 (C-6′′′)。之上數(shù)據(jù)信息與文獻(xiàn)資料報(bào)導(dǎo)一致,故評(píng)定該化學(xué)物質(zhì)為原兒茶醛-3-O-蕓香糖苷。
化學(xué)物質(zhì)14:淡黃色粉末狀,EI-MS:m/z 222 ,化學(xué)式為C13H18O3。1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ: 7.01 (1H, d, J = 15.8 Hz, H-7), 6.46 (1H, d, J = 15.8 Hz, H-8), 5.97 (1H, m, H-4), 2.65 (1H, d, J = 17.8 Hz, H-2), 2.32 (3H, s, H-10), 1.91 (3H, d, J = 1.4 Hz, H-13), 1.07 (3H, s, H-12), 1.01 (3H, s, H-11);13C NMR (100 MHz, CD3OD) δ: 199.2 (C-9), 199.0 (C-3), 163.1 (C-5), 147.0 (C-7), 130.4 (C-8), 126.5 (C-4), 78.4 (C-6), 49.2 (C-2), 41.7 (C-1), 26.3 (C-10), 23.4 (C-12), 22.1 (C-11), 17.5 (C-13)。之上數(shù)據(jù)信息與文獻(xiàn)資料報(bào)導(dǎo)一致,故評(píng)定該化學(xué)物質(zhì)為去氫吐葉醇。
化學(xué)物質(zhì)15:沒有顏色油狀物質(zhì),EI-MS:m/z 224 ,化學(xué)式為C13H20O3。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 5.70 (1H, d, J = 15.5 Hz, H-7), 5.63 (1H, d, J = 15.5 Hz, H-8), 5.78 (1H, br s, H-4), 4.19 (1H, d, J = 6.4 Hz, H-9), 2.35 (1H, d, J = 16.6 Hz, H-2a), 2.05 (1H, d, J = 16.6 Hz, H-2b), 1.82 (3H, d, J = 1.2 Hz, H-13), 1.11 (3H, s, H-10), 0.93 (3H, s, H-11), 0.91 (3H, s, H-12);13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ: 197.5 (C-3), 164.5 (C-5), 135.8 (C-7), 127.9 (C-8), 125.5 (C-4), 77.9 (C-6), 65.9 (C-9), 49.4 (C-2), 41.0 (C-1), 24.1 (C-10), 23.7 (C-12), 23.1 (C-11), 19.0 (C-13)。之上數(shù)據(jù)信息與文獻(xiàn)資料報(bào)導(dǎo)一致,故評(píng)定該化學(xué)物質(zhì)為布盧門醇A。
化學(xué)物質(zhì)16:乳白色不定形粉末狀, EI-MS:m/z 196 ,化學(xué)式為C11H16O3。1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ: 5.73 (1H, s, H-7), 4.18 (1H, m, H-3), 2.42 (1H, dt, J = 14.0, 2.8 Hz, H-4b), 2.01 (1H, dt, J = 14.5, 2.8 Hz, H-2b), 1.77 (3H, s, H-11), 1.75 (1H, dd, J = 14.0, 3.8 Hz, H-4a), 1.51 (1H, dd, J = 14.5, 3.8 Hz, H-2a), 1.47 (3H, s, H-9), 1.27 (3H, s, H-10);13C NMR (100 MHz, CD3OD) δ: 185.4 (C-6), 174.4 (C-8), 113.2 (C-7), 88.8 (C-5), 67.2 (C-3), 47.7 (C-2), 46.3 (C-4), 37.2 (C-1), 30.7 (C-10), 27.1 (C-11), 26.6 (C-9)。之上數(shù)據(jù)信息與文獻(xiàn)資料報(bào)導(dǎo)一致,故評(píng)定該化學(xué)物質(zhì)為蘇丹草內(nèi)酯。
化學(xué)物質(zhì)17:淡黃色油狀物質(zhì),EI-MS:m/z 196 ,化學(xué)式為C12H20O2。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 6.75 (1H, dd, J = 7.1, 1.3 Hz, H-3), 5.88 (1H, dd, J = 17.2, 10.7 Hz, H-7), 5.21 (1H, dd, J = 17.2, 1.4 Hz, H-8a), 5.08 (1H, dd, J = 10.7, 1.4Hz, H-8b), 3.71 (3H, s, -OCH3), 2.19 (2H, m, H-4), 1.81 (3H, s, H-10), 1.62 (2H, m, H-5), 1.28 (3H, s, H-9);13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ: 168.7 (C-1), 144.4 (C-7), 142.1 (C-3), 127.6 (C-2), 112.2 (C-8), 73.1 (C-6), 51.7 (-OCH3), 40.7 (C-5), 27.9 (C-9), 23.5 (C-4), 12.2 (C-10)。之上數(shù)據(jù)信息與文獻(xiàn)資料報(bào)導(dǎo)一致,故評(píng)定該化學(xué)物質(zhì)為 (E)-6-甲基-2,6-二甲基辛-2,7-二烯酸甲酯。
化學(xué)物質(zhì)18:乳白色不定形粉末狀,EI-MS:m/z 432 ,化學(xué)式為C19H28O11。1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ: 7.15 (1H, d, J = 6.5 Hz, H-6), 7.03 (1H, d, J = 2.9 Hz, H-2), 6.95-7.02 (2H, m, H-4, 5), 4.86 (1H, d, J = 6.6 Hz, Glc, H-1′), 4.72 (1H, d, J = 1.2 Hz, Rha, H-1′′), 3.86 (3H, s, 3-OCH3), 1.21 (3H, d, J = 5.2 Hz, Rha, H-6′′);13C NMR (100 MHz, CD3OD) δ: 150.7 (C-3), 147.8 (C-1), 124.3 (C-2), 122.2 (C-5), 118.5 (C-6), 113.5 (C-4), 102.5 (C-1′), 102.2 (C-1′′), 77.9 (C-3′), 76.8 (C-5′), 75.0 (C-2′), 74.1 (C-3′′), 72.3 (C-4′′), 72.2 (C-2′′), 71.5 (C-4′), 70.1 (C-5′′), 67.9 (C-6′), 56.8 (-OCH3), 17.9 (C-6′′)。之上數(shù)據(jù)信息與文獻(xiàn)資料報(bào)導(dǎo)一致,故評(píng)定該化學(xué)物質(zhì)為3-叔丁基甲酸-1-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→6)-O-β-D-吡喃葡萄糖水苷。
化學(xué)物質(zhì)19:淡黃色粉末狀,EI-MS:m/z 134 ,化學(xué)式為C7H6N2O。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 10.71 (2H, s, 2×NH), 7.04-6.97 (4H, m, H-5, 6, 7, 8);13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ: 155.3 (C-2), 129.7 (C-4, 9), 120.4 (C-6, 7), 108.5 (C-5, 8)。之上數(shù)據(jù)信息與文獻(xiàn)資料報(bào)導(dǎo)一致,故評(píng)定該化學(xué)物質(zhì)為2-甲基苯并咪唑。
化學(xué)物質(zhì)20:沒有顏色纖維狀結(jié)晶,EI-MS:m/z 182 ,化學(xué)式為C9H10O4。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 9.79 (1H, s, 1-CHO), 7.13 (2H, s, H-2, 6), 3.91 (6H, s, 3, 5-OCH3);13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ: 190.5 (C-1), 147.1 (C-3, 5), 141.0 (C-4), 128.2 (C-1), 106.8 (C-6), 56.3 (3-OCH3, 5-OCH3)。之上數(shù)據(jù)信息與文獻(xiàn)資料報(bào)導(dǎo)一致,故評(píng)定該化學(xué)物質(zhì)為syringaldehyde。
化學(xué)物質(zhì)21:沒有顏色粉末狀,EI-MS:m/z 138 ,化學(xué)式為C8H10O2。1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ: 7.25~7.38 (5H, m, H-2, 3, 4, 5, 6), 4.67 (1H, dd, J = 7.4, 4.7 Hz, H-1′), 3.64 (2H, m, H-2′);13C NMR (100 MHz, CD3OD) δ: 143.4 (C-1), 129.1 (C-3, 5), 128.4 (C-4), 127.5 (C-2, 6), 76.1 (C-1′), 68.5 (C-2′)。之上數(shù)據(jù)信息與文獻(xiàn)資料報(bào)導(dǎo)一致,故評(píng)定該化學(xué)物質(zhì)為1-苯基-1,2-乙二醇。
試驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示,皮層酮對(duì)PC12體細(xì)胞的損害水平隨濃度值呈依賴感升高,450、550、650、750、850、950、1050、1150 μmol/L皮層酮功效PC12體細(xì)胞48 h后,其體細(xì)胞成活率各自為88.81±2.21%、77.07±4.21%、52.47±0.99%、44.78±0.95%、34.26±0.91%、26.96±3.36%、12.32±0.22%、13.21±2.02%。見圖1。
本結(jié)果證實(shí)了一定含量的皮層酮的確能損害神經(jīng)細(xì)胞,650 μmol/L皮層酮功效48 h對(duì)高分化PC12體細(xì)胞的抑制率貼近50%,故挑選以身體之外650 μmol/L皮層酮48 h功效于PC12體細(xì)胞以仿真模擬焦慮抑郁癥神經(jīng)元細(xì)胞損害情況,搭建抗焦慮活力成份身體之外體細(xì)胞挑選實(shí)體模型。
試驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示,與650 μmol/L皮層酮組對(duì)比,化學(xué)物質(zhì)1、2、3、4、5、7、9、10、11、15、16、17與650 μmol/L皮層酮一同功效PC12體細(xì)胞48 h后,體細(xì)胞成活率分別提升至92.29±2.31%、90.74±1.61%、91.62±1.83%、63.11±2.30%、61.01±1.21%、101.18±1.56%、105.23±1.11%、67.77±1.89%、65.66±1.06%、75.94±0.24%、64.39±1.47%、72.88±1.82%。苯丙素、木脂素、黃酮類、單萜類均有不一樣水平的推動(dòng)650 μmol/L誘發(fā)的PC12細(xì)胞的增殖的功效。在其中,4-O-現(xiàn)磨咖啡??崴峒柞ィ?)、綠原酸甲酯(2)、綠原酸(3)、腫柄梅瑰苷(7)、蘇式-(7R,8R)-愈創(chuàng)木基丙三醇-8-香草醛醚(9)推動(dòng)650 μmol/L誘發(fā)的PC12細(xì)胞保護(hù)功效更為明顯,試驗(yàn)結(jié)果見圖2。
本分析從睡菜狼把草冰醋酸乙酯位置分離出來并評(píng)定獲得2一個(gè)化學(xué)物質(zhì),包含3個(gè)苯丙素類(1~3),兩個(gè)香豆素類(4和5),6個(gè)木脂素類(6~11),兩個(gè)黃酮類化合物、多糖類(12和13),4個(gè)單萜類(14~17),4個(gè)別的類(18~21)。與此同時(shí)調(diào)查了2一個(gè)化學(xué)物質(zhì)對(duì)皮層酮誘發(fā)損害的PC12體細(xì)胞的保障功效。結(jié)果顯示化學(xué)物質(zhì)1、2、3、7、9主要表現(xiàn)出明顯的保障功效,化學(xué)物質(zhì)4、5、10、11、15、16、17主要表現(xiàn)出中等水平的保障功效。
北五味子做為中國(guó)傳統(tǒng)式的安神藥,近些年的分析報(bào)導(dǎo)了北五味子木脂素具備明顯的神經(jīng)中樞抑止與安神助眠功效。合歡皮經(jīng)科學(xué)研究也說明其抗焦慮的關(guān)鍵活力有效成分是 (-)-丁香花環(huán)氧樹脂酚-4-O-β-D-葡萄糖水苷,其作用機(jī)制也許與抑止PC12體細(xì)胞膜蛋白細(xì)胞凋亡相關(guān)。事后將進(jìn)一步探尋睡菜關(guān)鍵活力成份對(duì)皮層酮損害的PC12體細(xì)胞的抗細(xì)胞凋亡及維護(hù)作用機(jī)制,表明睡菜抗焦慮活力的藥力物質(zhì)條件。