一、鹽藻的現(xiàn)況

鹽藻是一種喜鹽的單細胞微藻，常見于福清田和陸上鹽湖中。在自然中，非常少有微生物像鹽藻那樣，可以在這樣高鹽的條件下存活。鹽藻身體帶有大量的的β-胡羅卜素，是純天然β-胡羅卜素的主要來源于。鹽藻源β-胡羅卜素在中國及其全球的保健品中擁有一定的應(yīng)用前景。

1、鹽藻

鹽藻，拉丁名為Dundliellasalina，又被稱為杜氏藻(下列通稱鹽藻)，屬植物界、藻類綱、團藻目、杜氏藻科、杜氏藻屬的單細胞藻類。

鹽藻由羅馬尼亞人E.C.Teodoresco初次發(fā)覺，并在1838年初次被法國的MichelFelixDuIlal報導(dǎo)。1905年，法國的Teodoresco和ClaraHamburger將這類微生物敘述為一個新的、單獨的屬，且這類歸類持續(xù)迄今?，F(xiàn)階段，杜氏藻屬(Dunaliella)中已評定了53種藻種。

杜氏藻屬的種群在形狀上與萊因氏支原體(Chlamydomonasreinhardtii)類似，二者的區(qū)分取決于：杜氏藻屬的種群欠缺植物細胞和收攏液泡，有兩根等長微絨毛和一個單杯狀葉綠體，且常帶有中間核，在其中的葉綠體中包含大量的的β-胡羅卜素，使藻體呈橙紅色。除開胡羅卜素外，鹽藻身體還存有很多的凡士林。藻體的外形和對稱在于自然環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)。鹽藻欠缺硬實的植物細胞，這促使生物非常容易遭受滲透濃度的危害。凡士林被作為保持滲入均衡和酶促反應(yīng)的關(guān)鍵化學(xué)物質(zhì)而很多存有于藻身體。D.salinaTeodor具備較高的β-胡羅卜素成分(均值14％，w／w)，D.sp.SPMO980625-IE具備較高的藻油成分(均值37％，w/w)。

2、β-胡羅卜素

β-胡羅卜素是一種胡羅卜素，其習(xí)慣性取名為β-胡羅卜素，半系統(tǒng)軟件取名為β-胡羅卜素，化學(xué)式為C40H56，CAS號為7235-40-7。β-胡羅卜素分子結(jié)構(gòu)由中間多聚烯鏈和兩邊的六元環(huán)尾端官能團構(gòu)成，為雙孔構(gòu)造，其全反式同分異構(gòu)體呈幾何軸對稱。因為中間共軛點多烯鏈的存有，使全部分子結(jié)構(gòu)具備極度的不飽和脂肪性，可產(chǎn)生多種多樣幾何圖形同分異構(gòu)體。盡管在自然中它常常以全反式同分異構(gòu)體的方式存有，但也普遍其13Z-和9Z-順式同分異構(gòu)體的存有。

早在一個世紀(jì)前，人們就了解，β-胡羅卜素可在哺乳類動物的結(jié)腸中水解反應(yīng)轉(zhuǎn)化成維生素D，從而參加視覺效果生理學(xué)新陳代謝。因而，它被稱作維生素D原。β-胡羅卜素類是較好的氧自由基猝滅劑，具備優(yōu)良的抗氧化性功效。它可合理地阻隔體細胞內(nèi)的鏈條式自由基反應(yīng)，因此被覺得是診治和防止從而造成的眾多頑癥的理想化化學(xué)物質(zhì)。歷經(jīng)上世紀(jì)90年代的科學(xué)研究，9Z-同分異構(gòu)體與眾不同的養(yǎng)生作用(如溶出度高、增強免疫作用明顯等)已漸被認知能力，變成我們探討的關(guān)鍵。

3、鹽藻源β-胡羅卜素

為了更好地在高鹽標(biāo)準(zhǔn)下存活，鹽藻身體累積了濃度較高的的β-胡羅卜素，以避免劇烈的照射和濃度較高的的鹽對體細胞產(chǎn)生滲透濃度差產(chǎn)生的損害。因為能在身體內(nèi)累積很多的β-胡羅卜素，鹽藻以及提取液具備較強的清除自由基活力。因而，鹽藻及提取液(關(guān)鍵含β-胡羅卜素)在中國及世界各地已被用以保健品中，做成了以抗氧化性、增強免疫等為作用的商品。

常常用以生產(chǎn)制造β-胡羅卜素的藻種是D.salina，成分為2％～14％(w／dw)。在我國內(nèi)蒙古自治區(qū)和甘肅省鹽湖中種植的鹽藻中β-胡羅卜素的成分為4％～5％(w／dw)。與高等植物源和人造的β-胡羅卜素不一樣，鹽藻中的β-胡羅卜素成分帶有很多Z-同分異構(gòu)體，關(guān)鍵包含9Z-和13Z-同分異構(gòu)體等。

1966年，原蘇聯(lián)創(chuàng)建了全世界第一個用以商業(yè)服務(wù)生產(chǎn)制造的鹽藻源β-胡羅卜素小試加工廠?，F(xiàn)階段，從中低端的鹽湖大規(guī)模飼養(yǎng)到高檔的密度高的聚合塑造，全球用以生產(chǎn)制造β-胡羅卜素的鹽藻商業(yè)化的繁殖技術(shù)早已完善，包含獲得、“運動場池”和深圳鹽田飼養(yǎng)等技術(shù)性。在中國，以青海地區(qū)的鹽湖產(chǎn)業(yè)基地為技術(shù)骨干，從鹽藻中制取純天然β-胡羅卜素的行業(yè)早已進步成單獨的制造業(yè)管理體系。

因為鹽藻藻粉的水分含量很低，不一樣原材料中病菌和有危害微生物菌種的總數(shù)均可操縱在很低的水準(zhǔn)。因為鹽藻提取液為水溶性的脂質(zhì)提取液，不一樣原材料中病菌和有危害微生物菌種均未驗出。鹽藻及提取液中金屬元素的檢驗指標(biāo)值包含鉛、砷和汞(以鉛計)。在其中，不一樣原材料中砷的成分差別很大，這也是由繁殖技術(shù)的不同所產(chǎn)生的。高砷成分商品絕大多數(shù)源自應(yīng)用冷卻循環(huán)水的養(yǎng)殖廠。

早已相繼完善的獲取辦法有：(1)有機化學(xué)溶酶萃取原理，包含：正己烷、乙醚、乙酸丁酯、甲苯等萃取原理，(2)超臨界萃取二氧化碳液體萃取原理。

因為鹽藻的植物細胞很敏感，且β-胡羅卜素在其身體處在化合態(tài)，故以上提純技術(shù)性均可獲得認可的β-胡羅卜素轉(zhuǎn)移率，一般可做到92％～95％(w／w)。

在我國已公布的新食品原料公示，規(guī)定鹽藻提取液中β-胡羅卜素的成分≥8％(w／w)。事實上，在我國青海地區(qū)生產(chǎn)制造的提取液中β-胡羅卜素的成分可實現(xiàn)12％～15％(w／w)。

二、鹽藻源產(chǎn)胡羅卜素在保健品中幾何圖形同分異構(gòu)體構(gòu)成的測量

1、β-胡羅卜素幾何圖形同分異構(gòu)體構(gòu)成的測量

總β-胡羅卜素的UV-VIS測定法詳細GB8821-2011和GB28310-2012。總β-胡羅卜素的HPLC測定法詳細NY/T82.15-1988和DB64/T1514-2017。這種方式均可運用于檢驗保健品中鹽藻源總β-胡羅卜素的成分。各種胡羅卜素成分的評定也已創(chuàng)建。鹽藻源β-胡羅卜素在保健品中幾何圖形同分異構(gòu)體構(gòu)成的測量并未報導(dǎo)。

（1）幾何圖形同分異構(gòu)體的分離出來

大家都知道，β-胡羅卜素成分能夠 運用HPLC在C18柱上被有效地與其他胡羅卜素成分分離出來。相互配合線上的PDA探測器，β-胡羅卜素成分能夠 在大部分試品中獲得評定和定量分析。

因而，C18-HPLC-PDA已變成判定、定量分析檢驗β-胡羅卜素的常見方式。可是，β-胡羅卜素幾何圖形同分異構(gòu)體的分離出來在C18柱上碰到較大艱難。C30柱的產(chǎn)生為β-胡羅卜素幾何圖形同分異構(gòu)體的分離出來保證了新的挑選。因為C30烷基的鏈長與胡羅卜素分子結(jié)構(gòu)的長短貼近，因此二者的相互影響獲得了提高。因此 ，C30柱在分離出來幾何圖形同分異構(gòu)體時展現(xiàn)出突出的優(yōu)點。此外，C30固定不動相比長的烷基鏈也增多了固定不動相的疏水性，造成 非極性胡羅卜素的保存期提升，進而增強了柱效。圖1為惠伯棣等發(fā)布的β-胡羅卜素在C30-HPLC的分離出來色譜。