目地：創(chuàng)建HPLC法一起測量引陽索中五味子醇甲、五味子乙素的成分。方式：選用AgilentExtendC18(250mm×4.6mm，5μm)離子交換柱；以工業(yè)甲醇-乙腈-0.1%硫酸銨水溶液為流動性相，流動速度為1.1mL·min^-1；梯度方向過柱；氣相量為10μL；檢驗光波長為250nm；柱溫為32℃。結(jié)果：五味子醇甲、五味子乙素的線形范疇各自為7.013～175.3mg·L^-1(r=0.9998，n=7)和7.040-176.0mg·L^-1(r=0.9998，n=7)；獲取利用率：五味子醇甲96.05%(RSD=0.7%，n=6)，五味子乙素96.48%(RSD=0.9%，n=6)。結(jié)果：此方法實際操作專屬性強、迅速、簡單、結(jié)果精確，可用以引陽索的質(zhì)量管理。
引陽索載于于《中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標準》中藥材成方中藥制劑第三冊，由霪羊霍中藥浸膏與五味子中藥浸膏按2∶1混和做成片劑，具備壯陽補腎，生津止渴作用，用以陽萎早泄，腰酸腿軟，津虧自汗，頭暈眼花等癥。執(zhí)行標準中缺乏對藥方中五味子中藥浸膏質(zhì)量管理的方式 ，譚文明行為和孟淑智依次報導(dǎo)了引陽索中五味子中藥浸膏指標值成份五味子甲素和五味子醇甲的TLC識別方法，現(xiàn)階段暫未有引陽索中五味子中藥浸膏指標值成份五味子醇甲和五味子乙素成分檢測的報導(dǎo)，文中構(gòu)建了與此同時測量引陽索中五味子醇甲和五味子乙素的成分方式，本科學(xué)研究專屬性強，可用以引陽索中五味子中藥浸膏的質(zhì)量管理。

1儀器設(shè)備

Waters2695高效率液相色譜(包含工作平臺、自動進樣、柱溫箱、2998型二極管列陣探測器英國Waters企業(yè))，XPE205電子分析天平(METTLERTOLEDO企業(yè))，超聲波清洗機(HT300輸出功率：40KHZ濟寧市盛通超聲電子機器設(shè)備)，超純水機(Milli-QAdvantageA10默克密理博企業(yè))。

2原材料

五味子醇甲標準品(生產(chǎn)批號110857-201010成分99.4%)、五味子甲素標準品(生產(chǎn)批號110764-201010成分99.6%)、五味子乙素標準品(生產(chǎn)批號110765-200710)均購自中國藥品生物制藥檢定所，引陽索藥物3批(生產(chǎn)批號：20170704，20180604，20191103，市面上)，霪羊霍(生產(chǎn)批號：1910001，安國市聚藥堂醫(yī)藥有限責(zé)任公司)，超純水系統(tǒng)(自做)，別的實驗試劑(色譜純，市面上)。

3方式和結(jié)果

3.1色譜儀標準與系統(tǒng)軟件適用范圍實驗

離子交換柱：AgilentExtendC18柱(250mm×4.6mm，5μm)；流動性相：工業(yè)甲醇(A)-乙腈(B)-0.1%硫酸銨水溶液(C)，梯度方向過柱：0～24min為35%～55%A，30%～30%B；24～27min為55%～35%A，30%～30%B；27～30min為35%～35%A，30%～30%B；檢驗光波長：250nm；流動速度：1.1mL·min^-1；進樣量：10μL；柱溫：32℃。五味子醇甲、五味子乙素與鄰近色譜儀峰的分離度均超過1.5，基礎(chǔ)理論板數(shù)均不少于5000。

3.2水溶液的制取

3.2.1對比貯備液

取P2O5干躁13h的五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素標準品，各自高精密稱量14.11mg、16.62mg、14.08mg置20mL量瓶中，加工業(yè)甲醇適當(dāng)，超聲波使融解，用工業(yè)甲醇稀釋液至標尺，做為標準品貯備液(五味子醇甲701.3mg·L^-1，五味子甲素827.7mg·L^-1，五味子乙素704.0mg·L^-1)。各自高精密量取1mL，置同一10mL量瓶中，用工業(yè)甲醇稀釋液至標尺，得混和標準品水溶液。

3.2.2供試品水溶液

取供樣品5袋，高精密秤重，研細，高精密稱量5g(等同于1袋)，置100mL具塞錐形瓶中，加摩爾分數(shù)75%甲醇溶液50mL，密塞，秤重，超聲波獲取30min；置放至室內(nèi)溫度，稱取凈重，用以上甲醇溶液補充減失凈重，用0.45μm微孔濾膜過慮，預(yù)留。

3.2.3陰性對照水溶液
按引陽索藥方，不用五味子中藥浸膏，按“3.2.2”條方式制取陰性對照水溶液。按“3.1”條色譜儀標準氣相，紀錄色譜見圖1。

3.3線性相關(guān)調(diào)查

先后高精密量取五味子醇甲、五味子乙素標準品貯備液各0.1、0.2、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mL，各自置10mL量瓶中，用工業(yè)甲醇稀釋液至標尺，混勻，得不一樣濃度值系列產(chǎn)品混和對比水溶液。按“3.1”條色譜儀標準，氣相10μL，以峰總面積(Y)對濃度值X(mg·L^-1)開展多元回歸分析，得：五味子醇甲線性回歸方程Y=2.062×104X-7.829×104(r=0.9998，n=7)，在7.013～175.3mg·L-1內(nèi)，五味子醇甲線形優(yōu)良；五味子乙素線性回歸方程Y=1.543×104X-6.039×104(r=0.9998，n=7)，在7.040～176.0mg·L-1內(nèi)，五味子乙素線形優(yōu)良。

3.4精度實驗

取五味子醇甲、五味子乙素混和標準品貯備液，用0.45μm微孔濾膜濾過，按“3.1”條色譜儀標準，持續(xù)氣相5次，每一次10μL，測得五味子醇甲峰總面積各自為1386130、1413230、1416601、1409903、1398858，RSD為0.9%(n=5)；五味子乙素峰總面積各自為1039735、1068231、1064348、1059376、1053065，RSD為1.1%(n=5)，結(jié)果顯示儀器設(shè)備有優(yōu)良的精度。

3.5可靠性實驗

取引陽索顆粒物適當(dāng)，按“3.2.2”條方式制取供試水溶液，先后在0、2、6、10、18、24、48h，反復(fù)氣相，每一次10μL，測得五味子醇甲峰總面積各自為1439032、1428035、1419366、1418367、1421035、1416534、1403982，RSD為0.8%(n=7)；五味子乙素峰總面積各自為505762、504927、506354、498756、492769、503262、491965，RSD為1.2%(n=7)，結(jié)果顯示試品在48h內(nèi)平穩(wěn)。

3.6可重復(fù)性實驗

各自高精密稱量同一批引陽索(生產(chǎn)批號20180604)5份，按“3.2.2”條方式制取供試水溶液，精確測量五味子醇甲成分各自為3.63、3.68、3.67、3.69、3.64mg/袋，RSD為0.7%(n=5)，五味子乙素成分各自為1.82、1.81、1.79、1.83、1.84mg/袋，RSD為1.0%(n=5)，結(jié)果顯示方式可重復(fù)性優(yōu)良。

3.7利用率實驗

各自高精密稱量已經(jīng)知道成分的引陽索(生產(chǎn)批號20180604)約2.5g，6份，各自置100mL錐形瓶中，各自高精密添加對比水溶液：五味子醇甲對比水溶液(0.9165mg·mL^-1)、五味子乙素(0.9118mg·mL^-1)、各2.0、1.0mL，按“3.2.2”條方式制取供試水溶液，氣相10μL，結(jié)果測得五味子醇甲、五味子乙素均值利用率各自為96.05%(RSD=0.7%，n=6)、96.48%(RSD=0.9%，n=6)，結(jié)果見表1。

3.8試品的含量測量
取引陽索10袋，按“3.2.2”條方式制取供試水溶液，平行面3份。按“3.2.1”條方式制取標準品水溶液，按“3.1”條色譜儀標準，氣相10μL，用外標法測量3批引陽索試品中五味子醇甲和五味子乙素的成分，結(jié)果見表2。

4探討

4.1測量光波長的挑選

宣東公平報導(dǎo)了五味子醇甲和五味子乙素與此同時監(jiān)測的光波長為254nm，《中國藥典》2015版五味子成分檢測項下測量五味子醇甲的光波長為250nm，綜合性考慮到被測化學(xué)物質(zhì)較大消化吸收光波長、消化吸收抗壓強度，最后選中250nm做為檢驗光波長。

4.2流動性相的挑選

流動性相較為了工業(yè)甲醇-0.1%硫酸銨水溶液(35：65)、乙腈-0.1%硫酸銨水溶液(30：70)，發(fā)覺被測成份能夠 做到基準線分離出來，但五味子乙素保存期超出60min，與楊志向等科學(xué)研究結(jié)果同樣，最后挑選工業(yè)甲醇-乙腈-0.1%硫酸銨水溶液三元系統(tǒng)軟件為流動性相，梯度方向過柱，流動性相根據(jù)引進乙腈減少被測化學(xué)物質(zhì)保存期，線形調(diào)節(jié)工業(yè)甲醇和0.1%硫酸銨水溶液占比使3種木脂素與其它化學(xué)物質(zhì)合理分離出來，結(jié)果試品中五味子醇甲、五味子甲素和五味子乙素分離出來效果非常的好，沒有雜質(zhì)影響，且出峰快，保存期各自為五味子醇甲5.18min、五味子甲素16.88min、五味子乙素20.35min。

4.3成分測量指標值挑選

任偉光等報導(dǎo)了五味子醇甲、甲素、乙素是五味子中關(guān)鍵木脂素類物質(zhì)，有保護肝臟、神經(jīng)中樞抑止、降血糖、抗感染等藥用價值。馬瑩慧等報導(dǎo)了五味子醇甲、醇乙、酯甲、甲素、乙素為指標值的成分統(tǒng)計分析方法，李寶等報導(dǎo)了五味子中藥浸膏中五味子醇甲、甲素、乙素的含水量測定法，本研究發(fā)現(xiàn)引陽索試品色譜中五味子甲素色譜儀紛紛總面積較小，因而本篇文章僅挑選了五味子醇甲和五味子乙素兩個指標值開展成分測量。五味子甲素色譜儀峰可做為特點峰之一，用以引陽索中五味子中藥浸膏的判定辨別。