食用色素可分成天然色素和人造黑色素兩類。天然色素來自小動(dòng)物和綠色植物,對身體傷害較小,但天然色素價(jià)錢高,在食品工業(yè)、存儲(chǔ)環(huán)節(jié)中非常容易掉色和掉色。原花青素是最首要的天然色素。原花青素(Anthocyanidin)又叫花色素,是一類普遍出現(xiàn)于綠植中的水溶黑色素,屬黃酮素化學(xué)物質(zhì),是組成花朵和果子色調(diào)的關(guān)鍵黑色素之一。原花青素一詞根于Marguart在1853年對矢車菊花瓣中深藍(lán)色提取液的取名,是一類化學(xué)物質(zhì)的統(tǒng)稱?,F(xiàn)階段,已發(fā)覺并獲得科學(xué)研究的原花青素有大花天竺葵黑色素(Pelargonidin)、矢車菊素(Cyanidin)、芍藥花黑色素(Peonidin)、飛燕草黑色素(Delphinidin)、喇叭花黑色素(Petunidin)和錦葵黑色素(Malvidin)等6類。
天然色素與生成黑色素對比安全系數(shù)高,且具備一定的營養(yǎng)價(jià)值和藥用價(jià)值。現(xiàn)階段原花青素所具備的防衰老、抗氧化性、抗基因突變、抑止腫瘤干細(xì)胞產(chǎn)生、防止心血管病癥、保護(hù)肝臟、減少DNA空氣氧化危害、降血脂等多種多樣生理作用已取得世界認(rèn)同。原花青素類化合物可溶強(qiáng)電解質(zhì)、工業(yè)甲醇、酒精、稀堿或稀堿等極性溶劑,是至關(guān)重要的食用色素。生成黑色素成本費(fèi)便宜,顏色艷麗,特性平穩(wěn),便于色調(diào),上色力好,方便使用,已在食品行業(yè)中獲得普遍應(yīng)用。生成黑色素多是以中溫煤焦油中的苯甲醛為原材料而生成的,因此又稱之為“中溫煤焦油黑色素”或“苯甲醛黑色素”,歸屬于甲酰胺類物質(zhì),可造成 中毒的表現(xiàn)并有至癌功效,很多我國提升了對服用生成黑色素的應(yīng)用管理方法。
現(xiàn)階段主要是采取的獲取辦法有熱逆流獲取法、超聲波法、微波加熱法、超臨界萃取CO2萃取原理。常見于原花青素類化合物剖析的辦法具體有紫外線-可見光譜法(UV)、高效液相色譜色譜法(HPLC)、質(zhì)譜分析技術(shù)性(MS)、磁共振波譜法(NMR)、紙層析法(PC)、薄層層析法(TLC)、毛細(xì)血管區(qū)帶電泳原理法(PCE)、紅外線光譜圖法(IR)和近紅外光譜儀光譜圖法(NIR)等,這種辦法均有分別的優(yōu)點(diǎn)和局限。傳統(tǒng)式的檢驗(yàn)黑色素的辦法有國家行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)要求的液相色譜法(HPLC)、超高效液相色譜色譜法(UPLC)、高效率液相色譜儀一質(zhì)譜分析聯(lián)使用方法(HPLC—MS)、毛細(xì)管電泳法、膠束毛細(xì)血管色譜法、二階導(dǎo)數(shù)光譜法和紫外線光度法等,這種辦法均需技術(shù)專業(yè)技術(shù)人員在技術(shù)專業(yè)試驗(yàn)室里進(jìn)行,現(xiàn)場采樣長,花費(fèi)較高,不可以達(dá)到日常食品類當(dāng)場快速檢測的要求。急缺產(chǎn)品研發(fā)一種迅速并適用人力加上著色劑和純天然原花青素鑒別的當(dāng)場檢查的統(tǒng)計(jì)分析方法,為操縱生成黑色素亂用的食品類流人銷售市場給予合理的檢驗(yàn)方式,是現(xiàn)如今日常衛(wèi)生監(jiān)督所稽查工作上必須處理的主要難題。
純天然原花青素帶有黃酮類構(gòu)造,和配位糖基化構(gòu)造,盡管展現(xiàn)出不一樣色調(diào),可是在未溶解的標(biāo)準(zhǔn)下,黃酮類的共軛點(diǎn)構(gòu)造被糖基化構(gòu)造遮蓋,黃酮類原來弱共軛點(diǎn)性、瑩光性消退。而人造黑色素和染劑帶有甲酰胺正已烷,或是甲酰胺萘環(huán)類構(gòu)造,在一般狀況下主要表現(xiàn)出一定的共軛點(diǎn)特性和構(gòu)造。徹底能夠按照兩大類物質(zhì)結(jié)構(gòu)特性不一樣,迅速區(qū)別,辨別食品類中能否加上生成黑色素替代純天然原花青素。
室內(nèi)溫度離子液體具備構(gòu)造可制定性,依據(jù)其不一樣構(gòu)造,能夠 極迅速的吸咐融解與其說構(gòu)造類似的化學(xué)物質(zhì)。因此設(shè)計(jì)方案生成一種高共軛點(diǎn)型離子液體,其具備目的性的吸咐人造黑色素而不吸咐純天然原花青素的特點(diǎn)。并將該離子液體運(yùn)用在原花青素造假人造黑色素的快速檢測中。
苯甲酸:優(yōu)級(jí)純,上海市麥克林生物化學(xué)高新科技有限責(zé)任公司;芐基氯:優(yōu)級(jí)純,上海市麥克林生物化學(xué)高新科技有限責(zé)任公司;六氟磷酸鉀:分析純,阿拉丁試劑上海市有限責(zé)任公司;乙酸丁酯:色譜純,北京市百靈威高新科技有限責(zé)任公司;工業(yè)甲醇:色譜純,北京市百靈威高新科技有限責(zé)任公司;紅提暗紫色黑色素服用添加物:液態(tài),廣東省東莞市添之彩食品加工廠;含原花青素的試品包含野生黑枸杞、黑豆、果汁飲品、野生黑枸杞飲品、紅酒等試品:在甘肅蘭州每個(gè)商場、以簡單隨機(jī)抽樣的方法收集各種試品。
1.2 儀器設(shè)備與機(jī)器設(shè)備
液相色譜:安捷倫1260型,配二級(jí)管列陣探測器,安捷倫科技有限責(zé)任公司;紫外線光度計(jì):723-PC型,上海市恒平儀器設(shè)備有限責(zé)任公司;離心脫水機(jī):RX-II型,締妍我國儀器設(shè)備有限責(zé)任公司。
生成1-辛基-3-羥基咪唑六氟聚磷酸鹽離子液體。
稱量1-辛基-3-羥基咪唑六氟聚磷酸鹽1g,2,3-萘二胺8.0g,苯甲酸8.0mL,放置圓底燒瓶中攪拌,70℃加溫流回,拌和1h,獲得混和反映水溶液。添加15mLpH為2的硫酸溶液提純以上混和反映水溶液,反復(fù)3次。合拼鹽酸溶液。用10%氫氧化鈉溶液溶液調(diào)整pH為10±0.5,這時(shí)會(huì)進(jìn)行析出乳白色結(jié)晶狀沉積。過慮獲得厭氧顆粒污泥。用50%的酒精溶液將厭氧顆粒污泥重結(jié)晶,干躁,獲得乳白色纖維狀結(jié)晶,即是萘并咪唑。
稱量萘并咪唑16.0g,芐基氯12.0g,40%氫氧化鈉溶液40mL,四丁基溴化銨4g做為相轉(zhuǎn)金屬催化劑,放置圓底燒瓶中攪拌,100℃加溫,拌和,流回3h。反映結(jié)束后,將混和生成物制冷至室內(nèi)溫度,旋蒸,獲得厭氧顆粒污泥。將厭氧顆粒污泥溶解50mL乙酸丁酯中,向乙酸丁酯水溶液中添加30mL超純水系統(tǒng),渦流波動(dòng)2min清洗乙酸丁酯。靜放分層次后,并棄去下一層水相,反復(fù)以上超純水系統(tǒng)清洗流程一次,獲得的乙酸丁酯水溶液于60℃揮干有機(jī)溶液,獲得淡黃色粉末,1-芐基萘并咪唑,干躁秤重25.34g,成品率94.07%。
稱量1-芐基萘并咪唑22g,溴乙烷9g,放置圓底燒瓶中,添加50mL乙腈,攪拌,75℃加溫,拌和,流回8h。反映結(jié)束后,將混和生成物制冷至室內(nèi)溫度,添加20mL正己烷,渦流波動(dòng)2min清洗混和生成物,靜放分層次,棄去頂層正己烷相,反復(fù)以上正己烷清洗流程一次,獲得的水溶液于60℃揮干有機(jī)溶液,獲得淡黃色粉末,1-芐基-3-乙基萘并咪唑溴化鹽,干躁秤重27.21g,成品率88.10%。
稱量1-芐基-3-乙基萘并咪唑溴化鹽20g,溶解50mL超純水系統(tǒng)中,添加10.0g六氟磷酸銨,放置燒瓶中,拌和2h。旋蒸,獲得淡黃色粉末,將所有淡黃色粉末溶解50mL工業(yè)甲醇中,添加5g活性碳褪色,60℃揮干有機(jī)溶液后,獲得白色粉末,1-芐基-3-乙基萘并咪唑六氟聚磷酸鹽,干躁秤重27.63g,成品率92.10%。1.3.3混和離子液體制取稱量1-辛基-3-羥基咪唑六氟聚磷酸鹽10g,1-芐基-3-乙基萘并咪唑六氟聚磷酸鹽10g,放置雞胗瓶中,添加工業(yè)甲醇50mL,振搖攪拌。80℃轉(zhuǎn)動(dòng)揮發(fā)1h。獲得沒有顏色全透明粘稠的液態(tài),獲得混和離子液體。
將玻纖過濾紙剪裁成5cm長,1cm寬的小紙條。將小紙條侵潤在混和離子液體中,超聲波解決30min,放置微波爐加熱中200W,加溫5min。將小紙條撈起來,擦拭過濾紙表層液態(tài),獲得原花青素迅速檢測試紙。
稱量固體試品5.0g,添加20mL純凈水,開水浴獲取10min,制冷至室內(nèi)溫度,汲取萃取液2mL,添加純凈水10mL,獲得有色彩且通透的試品液,將試小紙條一端侵潤在試品液中,維持30s后取下觀查著色轉(zhuǎn)變。