馬郁蘭如今全球世界各國普遍種植。馬郁蘭中富含各種化合物，主要成分為黃酮類化合物、多糖類、萜類、有機物類和其它類，萜類是成分較多的一類，現(xiàn)階段早已分離出來評定的有機化合物有迷迭香酸、鼠尾草酚、鼠尾草酸、齊墩果酸和熊果酸。迷迭香酸可溶于工業(yè)甲醇、酒精溶液、水，而難溶解乙醚、乙醚等有機溶液；耐熱工作能力強，可承受長期性240℃高溫煎炸而維持高抗氧化能力，可替代熱不穩(wěn)定的超氧化物歧化酶SOD做為氧自由基去除劑。迷迭香酸在不一樣綠色植物中的成分各不相同，其使用使用價值也不盡相同。迷迭香酸獲取提純方式關(guān)鍵存水說法、有機溶液獲取法、超聲波輔助獲取法、微波加熱輔助獲取法、膜分離設(shè)備、大孔樹脂吸咐法、結(jié)晶法等。水說法既獲取出水溶相關(guān)成分，與此同時也明確提出一些水溶殘渣，似水說法分離出來的迷迭香酸粗品中包含較多的焦糖色素、蛋白質(zhì)和核甘酸殘渣，為事后提純提升了艱難。超音波和微波加熱輔助獲取法具備獲取高效率、獲取時間較短的優(yōu)勢，但均為輔助獲取方式，且需超聲波或微波設(shè)備。有機溶液獲取法還可以有效的降低一些水溶殘渣的總混，有利于后期的剝離和提純。現(xiàn)階段選用酒精獲取獲得的迷迭香酸粗品成分基本上在3～6%。

文中以5%成分的迷迭香酸粗品為原材料，甄選萃取劑類型、提純時間、頻次、時間等要素，使設(shè)備中迷迭香酸成分超過≥35%（GB1886.172—2016《食品添加劑迷迭香提取物》規(guī)定超過5%），而且完成褪色，為執(zhí)行迷迭香酸的工業(yè)生產(chǎn)及運用給予參照。

1 原材料與方式

1.1 原材料與實驗試劑

試驗常用乙酸丁酯、乙酸甲酯、醫(yī)用乙醚、乙醚、正丁醇、三氯甲烷、正己烷、重絡(luò)酸、硫酸鈷、硫酸等分析純實驗試劑均購置國藥控股化學(xué)藥品有限責(zé)任公司。馬郁蘭干葉由河南省逸佳農(nóng)業(yè)生態(tài)有限責(zé)任公司給予。迷迭香酸標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（成分：98%），購自西安市利時生物技術(shù)有限責(zé)任公司。

1.2 儀器設(shè)備與機器設(shè)備

1260高效率液相色譜：安捷倫科技有限責(zé)任公司；752N紫外線由此可見光度計：上海精密儀器設(shè)備有限責(zé)任公司；GL-20G-C快速冷凍離心機：上海安亭科學(xué)研究儀器廠；BSA224S-CW電子分析天平：賽多利斯儀器設(shè)備（北京市）有限責(zé)任公司；RE-52A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀：上海亞榮生物化學(xué)儀器廠；RNF-0460卷式膜多用途檢樣機器設(shè)備：廈門市世達膜高新科技有限責(zé)任公司；YC-1800噴霧干燥設(shè)備：上海市雅程實驗儀器有限責(zé)任公司；20升多用途獲取系統(tǒng)軟件：河南省寧爍實驗儀器有限責(zé)任公司。

1.3 迷迭香酸粗品制取

取馬郁蘭干葉按1∶10加含75%酒精溶液（pH=2），添加到20L提純罐里，85℃流回獲取1.0h，釋放提取液，再添加8倍75%酒精溶液（pH=2），流回獲取1.0h離心式后，合拼萃取液，過四層沙布，多效蒸發(fā)儀濃縮水蒸氣蒸餾出乙醇，卷式活性炭過濾，噴霧干燥機得成分約為5%粗品。

1.4 迷迭香酸成分及飽和度測量

1.4.1 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)及試品配置

用工業(yè)甲醇融解標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)配備成0.2mg/mL迷迭香酸標(biāo)液。

將被測迷迭香酸粗品配置為2mg/mL的溶液（pH=2），測量飽和度和迷迭香酸成分。

1.4.2 高效液相色譜色譜分析測量迷迭香酸成分

色譜儀標(biāo)準(zhǔn)：二極管列陣探測器（DAD），流動性相為工業(yè)甲醇∶水=60∶40，流動速度為1mL/min，氣相量為10μL。

1.4.3 飽和度標(biāo)曲的制作及褪色率的測算

（1）飽和度標(biāo)曲的制作

規(guī)范色度單位：1L水里融解有1mg鉑和0.5mg鈷，稱該水溶液所具備的飽和度為1度。500飽和度規(guī)范應(yīng)用液配置：稱量0.0437g重絡(luò)酸和1.0g硫酸鈷，放水融解后再次添加0.5mL鹽酸，配出500mL的水溶液。以純凈水為對比液，在340nm～360nm的光波長范疇內(nèi)測量500飽和度規(guī)范應(yīng)用液的OD值，挑選出較大消化吸收光波長。各自用移液器移取1mL、2mL、3mL、4mL500飽和度規(guī)范應(yīng)用液到四個5mL容量瓶中，加蒸溜水滴定劑（稀釋液后，飽和度各自是100、200、300、400）。在較大光波長處測吸光度值。以水溶液飽和度為橫坐標(biāo)軸，以吸光度數(shù)值縱軸，制作飽和度標(biāo)曲。

（2）測算褪色率：

將萃取液稀釋液一定的倍率，在較大光波長處測吸光度值，將吸光度值帶入飽和度線形線性回歸方程，求取商品飽和度。褪色率按住式測算：
 

1.5 提純有機溶劑的挑選

稱量9份10g原材料，用60mL酸水融解，離心式除去不溶物。各自用1.0倍大小的醫(yī)用乙醚、乙酸丁酯、乙酸甲酯、甲基叔丁基醚、醫(yī)用乙醚、乙醚、正丁醇、三氯甲烷、正己烷開展提純，共提純2次，選用高效率液相色譜檢驗左右看中迷迭香酸的成分，明確最好的兩相分派加工工藝。

1.6 氣相色譜分析加工工藝提升實驗方案設(shè)計

1.6.1 正丁醇提純水相和含醇水相迷迭香酸的分配原則

各自用15%酒精和純凈水融解成分為90%的迷迭香酸試品配置成0.2mg/mL樣液，添加等大小的正丁醇開展提純，各反復(fù)3份，測量左右看中迷迭香酸的成分。

1.6.2 正丁醇提純不一樣pH水相迷迭香酸的分配原則

各自以不一樣pH的水相融解成分為90%的迷迭香酸試品，用等容積正丁醇提純，分相后，高效液相色譜色譜法檢驗左右看中迷迭香酸的成分及分配原則。

1.6.3 萃取劑的挑選

按料液比1∶8添加酸水融解馬郁蘭粗提物，離心式除去不溶物，各自用醫(yī)用乙醚、乙酸甲酯、乙酸丁酯、甲基叔丁基醚、三氯甲烷、正丁醇、乙醚、正己烷提純依照1∶1的容積比開展提純，共提純2次，檢驗2次提純后上相和最終的下相迷迭香酸的成分。

1.6.4 四種萃取劑的對比實驗

采用成分為5%的迷迭香酸粗品，用pH2～3的酸水融解配置為1mg/mL樣液，各自用等大小的正丁醇、乙酸甲酯、乙酸丁酯和乙酸甲酯提純后，測量所得的商品的飽和度及迷迭香酸的成分，明確最好的萃取劑。

1.6.5 正交實驗設(shè)計方案

設(shè)計方案L₉（3⁴）的三要素三水準(zhǔn)正交試驗調(diào)查萃取劑類型、提純水相的pH和萃取劑使用量（為水相的倍率）對褪色率及成分的危害。

1.7 數(shù)據(jù)處理方法

選用SPSS16手機軟件開展數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。