5、最陡上坡試驗

挑選適宜的步幅，對X₂、X₂、X₆，3個明顯要素開展最陡上坡試驗，結果如表3所顯示，隨X₂，X₂，X₆成分的提升，發(fā)酵物中黑色素OD值值(Y)先上升后減少，在第3組做到最大，因而以第3組濃度值做為響應面試驗的定位點。

6、響應面實驗方案設計及結果

依據(jù)最陡上坡試驗結果，對X₂，X₂，X₆開展響應面設計方案，各要素水準如表4所顯示，響應面試驗設計及結果如表5所顯示。對試驗結論開展數(shù)學方程線性擬合，獲得黑色素吸光度值(Y)與3個顯著性差異要素的二次回歸分析：

吸光度值=1.0037 0.0204X₂ 0.0489X₄ 0.0442X₆-0.1100X₂X₂-0.0925X₄X₄-0.1522X₆X₆-0.0132X₂X₄ 0.0595X₂X₆ 0.0640X₄X₆

有回歸分析的方差分析(表6)得知：F=8.08、P=0.017(P＜0.05)表明回歸分析明顯，決定系數(shù)R²=0.9357(R²＞0.85)，失擬項P=0.052(P＞0.05)表明失擬項不明顯、回歸分析擬合程度優(yōu)良。由表7得知X₂X₂，X₄X₄的P值低于0.05，說明NaN0₃、MgS0₄·7H₂0的二次項模型擬合具備明顯危害，X₆X₆的P值低于0.01，說明CS的二次項模型擬合具備極明顯危害，而一次項和交互項的顯著性差異較弱，也證實了各要素與響應值中間并不是線性相關。

運用Minitabl7獲得該實體模型X₂、X₄、X₆的極大值各自為0.1313、0.3333、0.2323，融合最陡上坡實驗方案設計的基本原理獲得X₂、X₄、X₆的實際值各自為0.6803、0.0366、14.4646，操作過程中可用X₂=0.68、X₄=0.037、X₆=14.5，故提升后的發(fā)醇培養(yǎng)液的成份為：NaNO₃ 0.68g/L，K₂HPO₄ 0.48g/L，MgSO₄·7H₂O 0.037g/L，CaCl₂·2H₂O 0.036g/L，葡萄糖水18g/L，CS14.5mL/L，TM1mL/L。歷經(jīng)可重復性試驗獲得提升后培養(yǎng)液中黑色素OD值數(shù)值1.004，是提升前0.612的1.64倍。

三、結果

（1）細菌DT06造成的淡黃色黑色素是一種新黑色素，為多甲基化學物質(zhì)。

（2）DT06黑色素有優(yōu)良的抗氧化和可靠性，具備潛在性使用使用價值。

（3）培養(yǎng)液提升后DT06黑色素的生產(chǎn)量是提升前的1.64倍。