荼葉是中華傳統(tǒng)綠色植物來源于健康飲品，具備久遠(yuǎn)的食用歷史時(shí)間。荼葉中含有各種營養(yǎng)物質(zhì)和揮發(fā)物化學(xué)物質(zhì)，其關(guān)鍵活性物質(zhì)成分隨產(chǎn)區(qū)不一樣而有一定的差別，相關(guān)成分的類別和成分變成荼葉質(zhì)量的關(guān)鍵點(diǎn)評根據(jù)。依據(jù)荼葉收集和制造方式的不一樣還可以分成綠茶葉、綠茶、黃茶、綠茶（烏龍）、黑荼和白牡丹茶6類別。荼葉中最首要的清除自由基活力成份為茶氨酸（Teapolyphenols，TP），茶氨酸是一大類多甲基酚類的統(tǒng)稱，此外，荼葉中還含有有咖啡因、碳水化合物、茶多糖和各種維生素等營養(yǎng)元素。茶氨酸約占荼葉體力勞動(dòng)的20%～30%，是普洱茶中最重要抗氧化性健康保健成份。茶氨酸關(guān)鍵包含黃烷醇類、花色苷類、黃酮類化合物、多糖類、黃酮醇類和酚酸類等，在其中關(guān)鍵的揮發(fā)化學(xué)成分是兒茶酸類物質(zhì)約占60%～80%，包含兒茶酸、表兒茶素、表沒食子兒茶酸沒食子酸酯、表兒茶素沒食子酸酯、表沒食子兒茶酸、沒食子酸和咖啡堿等。荼葉中茶氨酸類型和成分隨時(shí)節(jié)差異而轉(zhuǎn)變 ，春天荼葉中表沒食子兒茶酸沒食子酸酯（epigallocatechingallate，EGCG）成分要高過秋天。茶氨酸具備抗氧化性、調(diào)整免疫力、祛毒、防輻射和消除疲勞等各種作用，但其構(gòu)成及成分隨種類、采收時(shí)節(jié)期及原產(chǎn)地等各個(gè)方面的危害。茶氨酸一般從普洱茶中獲取，在其中兒茶酸類物質(zhì)占茶氨酸的60%～80%，次之是黃酮類化合物、多糖類，別的酚類物質(zhì)較少。

茶氨酸除存有在荼葉、茶樹花等多種多樣油茶樹資源中。沙棘中茶氨酸依據(jù)獲取加工工藝不一樣成分能夠做到11.3%～16.9%。茶氨酸也是核桃仁和枇杷果中活力成份。毛枝連蕊茶中綠葉子和楓葉主莖葉子中可溶性糖、茶氨酸和總花青苷。

茶氨酸可溶于開水、乙酸丁酯、酒精，微溶解植物油脂，難溶有機(jī)溶液。茶氨酸具備一定的吸水性，可開展絡(luò)合反應(yīng)、氧化還原反應(yīng)反映等。納米技術(shù)磁珠能夠 完成茶氨酸的迅速獲取分離出來。荼葉中茶氨酸在提煉全過程中尤其是加溫時(shí)很有可能受到損壞，在定性分析的環(huán)節(jié)中需創(chuàng)建穩(wěn)定的統(tǒng)計(jì)分析方法完成定量分析。

兒茶酚中不一樣成份成分是開展荼葉質(zhì)量等綠色植物辨別的重要環(huán)節(jié)。茶氨酸為多酚類物質(zhì)具備純天然抗氧化能力，在提煉全過程中很有可能會產(chǎn)生氧化還原反應(yīng)反映，因此 適合的提煉加工工藝前提對茶氨酸的定量分析檢驗(yàn)尤為重要。光度法是測量多酚類物質(zhì)成分的常見方式，關(guān)鍵包含紫外線光度法。關(guān)鍵活力成份茶氨酸、總皂苷、黃酮類物質(zhì)和總含糖量。茶氨酸能夠 選用紅外光譜法開展判定和定量分析檢驗(yàn)。液相色譜儀質(zhì)譜測量荼葉中茶氨酸實(shí)際操作更加繁雜。紫外線光度法測量相對性敏感度較低，紅外光譜法的定量分析測量屬半定量，茶氨酸中有酚類物質(zhì)構(gòu)造貼近均為兒茶酸類構(gòu)造，與此同時(shí)茶氨酸中多種多樣活力成份化學(xué)物質(zhì)的類別和成分及其占比對點(diǎn)評荼葉質(zhì)量和開展別的帶有茶氨酸綠色植物種類辨別具備關(guān)鍵實(shí)際意義。

本科學(xué)研究運(yùn)用高效液相色譜色譜法創(chuàng)建了與此同時(shí)測量6種關(guān)鍵茶氨酸的與此同時(shí)定性分析方式 ，該辦法還可以用以荼葉等綠色植物商品中茶氨酸類型及成分的檢驗(yàn)，對綠色植物評定和質(zhì)量確定具備關(guān)鍵實(shí)際意義。白牡丹茶歸屬于輕度半發(fā)酵茶，綠茶葉屬未半發(fā)酵茶，均屬在我國六大茶種類。白牡丹茶因特有的身心健康使用價(jià)值及可常年存放的特性而備受顧客和股民的親睞，銷售量與市場份額持續(xù)飆升，2013年～2016年，全國各地白牡丹茶總產(chǎn)量持續(xù)四年維持了15%上下的增長幅度。不一樣獲取標(biāo)準(zhǔn)對荼葉中主要成分的總混有影響。本科學(xué)研究運(yùn)用響應(yīng)面法提升荼葉中不一樣獲取方式 的提煉加工工藝，挑選 最佳獲取加工工藝，在這個(gè)基礎(chǔ)上運(yùn)用高效率液相色譜儀進(jìn)行不一樣荼葉中茶氨酸類型和成分定量分析測量，為茶葉種類和綠色植物種類辨別給予至關(guān)重要的方法學(xué)適用。

1 原材料與方式

1.1 實(shí)驗(yàn)試劑與原材料

沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（純凈度均≥98%）、沒食子酸兒茶酸沒食子酸酯標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（純凈度均≥98%）、表兒茶素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（純凈度均≥98%）、表沒食子酸兒茶酸標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（純凈度均≥98%）、表兒茶素沒食子酸酯標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（純凈度均≥98%）、表沒食子酸兒茶酸沒食子酸酯標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（純凈度均≥98%），福林酚試劑（分析純），工業(yè)甲醇（色譜純）、苯甲酸（色譜純）、工業(yè)乙醇（分析純），實(shí)驗(yàn)試劑均購自阿拉丁企業(yè)。白牡丹茶試品：貢眉白茶（原產(chǎn)地福建福鼎，2018年），綠茶葉試品：竹葉青（原產(chǎn)地四川）。

1.2 儀器設(shè)備與機(jī)器設(shè)備

高效率液相色譜儀（Agilent1260）：安捷倫科技（我國）有限責(zé)任公司；剖析電子分析天平（AR224CN）：奧豪斯進(jìn)出口貿(mào)易（上海市）有限責(zé)任公司；超聲波清洗機(jī)（SB-120DT）：上海市予騰生物技術(shù)有限責(zé)任公司；集快熱式控溫加溫磁力攪拌器（DF-101S）：上海市凌科實(shí)業(yè)公司發(fā)展有限責(zé)任公司；中藥材粉碎機(jī)（DFT150）：上海新諾實(shí)驗(yàn)儀器有限責(zé)任公司；紫外線-由此可見光度計(jì)（UV-1800PC-DS2）：上海美譜達(dá)儀器設(shè)備有限責(zé)任公司。

1.3 實(shí)驗(yàn)方式

1.3.1 試品制取

取荼葉試品破碎，精確稱量0.5g荼葉破碎過80目篩，干躁至恒重備用。

1.3.2 獲取加工工藝提升

本試驗(yàn)運(yùn)用響應(yīng)面法提升荼葉中茶氨酸獲取加工工藝。

1.3.2.1 單要素試驗(yàn)

選擇超聲波獲取和開水萃取法二種獲取方式 ，獲取時(shí)間、獲取溫度、非均相比、有機(jī)溶劑濃度值4個(gè)單要素，運(yùn)用單要素試驗(yàn)明確獲取標(biāo)準(zhǔn)范疇。

1.3.2.2 CCD響應(yīng)面法獲取

依據(jù)單要素實(shí)驗(yàn)結(jié)果，各自選擇溫度、乙醇濃度、獲取時(shí)間做為回應(yīng)自變量，自變量的水準(zhǔn)以-1、0、1表明，以荼葉提取液中總酚成分為響應(yīng)值，利用計(jì)算機(jī)DesignExpert8.0.6開展三要素三水準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)和數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。荼葉中茶氨酸獲取秘方提升試驗(yàn)設(shè)計(jì)如表1所顯示。

1.3.2.3 總酚成分的測量

精確稱量沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)200mg加小量70％酒精將試品融化，用70％酒精滴定劑至100mL混勻，靜放。再用移液器汲取20mL，用70％酒精滴定劑至100mL，混勻，配出濃度值為400μg/mL的沒食子酸標(biāo)液，備用。精確汲取沒食子酸標(biāo)液0mL、0.05mL、0.1mL、0.15mL、0.2mL、0.25mL于試管嬰兒中。各自添加純凈水2.0mL、1.95mL、1.9mL、1mL、1.85mL、1.8mL、1.75mL再各添加福林實(shí)驗(yàn)試劑1mL，充足震蕩后靜放3～4min，各自添加10％碳酸鉀1mL于25℃，混勻放置恒溫水浴槽中反映2h，與此同時(shí)做實(shí)驗(yàn)試劑空缺，于765nm下測量OD值，以成分對OD值開展平行線重歸，測算線性回歸方程。將萃取液離心式，取上清液，按標(biāo)曲制作的測定法，先后添加實(shí)驗(yàn)試劑，以實(shí)驗(yàn)試劑空缺作對照品，在765nm處測量OD值，測算茶氨酸成分做為響應(yīng)值。