每組小白鼠肝部中抗氧化性指標(biāo)值如圖所示3所顯示。與一切正常組對(duì)比,D-半乳糖組小白鼠肝部機(jī)構(gòu)中SOD和GPx魅力明顯減少(P<0.05),MDA成分明顯上升(P<0.05),說明經(jīng)D-半乳糖誘發(fā),小白鼠肝部機(jī)構(gòu)中抗氧化性活力明顯降低,脂質(zhì)過氧化物明顯增加。與D-半乳糖組對(duì)比,試品1的低、中、高使用量組小白鼠肝部機(jī)構(gòu)中SOD和GPx魅力均明顯提升,MDA成分明顯降低,在其中高使用量組SOD和GPx魅力各自提高了96.51%和122.52%(P<0.05),MDA成分減少38.2%(P<0.05);試品2的低、中、高使用量組小白鼠肝部機(jī)構(gòu)中SOD和GPx魅力較D-半乳糖組均明顯提升,在其中高使用量組SOD和GPx魅力各自提高了192.06%和189.83%(P<0.05),試品2的低、中使用量組小白鼠肝部?jī)?nèi)MDA與D-半乳糖組中間無顯著性差異,而高使用量組MDA成分較D-半乳糖組明顯減少了34.1%(P<0.05)。二種甜葉菊廢料提取液中間對(duì)比,對(duì)D-半乳糖解決小白鼠肝部抗氧化性指標(biāo)值(SOD,GPx和MDA)的危害無顯著性差異(P>0.05)。綜合性之上結(jié)果顯示,二種甜葉菊廢料提取液均具備提升D-半乳糖誘發(fā)變老小白鼠肝部中抗氧酶魅力和消除肝部中氧自由基和脂質(zhì)過氧化物的工作能力,具備減輕肝部氧化應(yīng)激損害的實(shí)際效果。
甜葉菊廢料提取液對(duì)小白鼠腦部中SOD,GPx和MDA的危害結(jié)果見圖4。與一切正常組對(duì)比,D-半乳糖組小白鼠腦部?jī)?nèi)SOD和GPx魅力明顯減少(P<0.05),MDA成分明顯提升(P<0.05),說明經(jīng)D-半乳糖誘發(fā),小白鼠腦部?jī)?nèi)抗氧化酶活力明顯降低,脂質(zhì)過氧化物明顯增加,實(shí)體模型搭建取得成功。二種甜葉菊廢料提取液小劑量組小白鼠腦部?jī)?nèi)SOD和GPx魅力,MDA成分與D-半乳糖組對(duì)比均無顯著性差異(P>0.05);二種甜葉菊廢料提取液中使用量組小白鼠腦部?jī)?nèi)SOD魅力較D-半乳糖組各自明顯提高了66.87%和62.16%(P<0.05),GPx魅力無顯著性差異(P>0.05),試品1中使用量組小白鼠腦部?jī)?nèi)MDA成分較D-半乳糖組明顯降低了39.10%(P<0.05),而試品2中使用量組小白鼠腦部?jī)?nèi)MDA成分與D-半乳糖組中間無顯著性差異(P>0.05);與D-半乳糖組對(duì)比,試品1高使用量組小白鼠腦部?jī)?nèi)SOD和GPx魅力各自明顯提高了73.85%和19.56%(P<0.05),MDA成分與D-半乳糖組中間無顯著性差異(P>0.05),試品2高使用量組小白鼠腦部?jī)?nèi)SOD和GPx魅力較D-半乳糖組各自明顯提高了73.48%和24.71%(P<0.05),MDA成分明顯降低了38.46%(P<0.05)。二種甜葉菊廢料提取液中間對(duì)比,對(duì)D-半乳糖解決小白鼠腦部抗氧化性指標(biāo)值(SOD,GPx和MDA)的危害無顯著性差異(P>0.05)。綜合性之上結(jié)果顯示,二種甜葉菊廢料提取液均具備提升D-半乳糖誘發(fā)變老小白鼠腦部中抗氧酶魅力和消除腦部中氧自由基和脂質(zhì)過氧化物的工作能力,合理預(yù)防或減輕腦部中氧自由基造成 的氧化應(yīng)激損害,進(jìn)而具有清除自由基的功效。
綜合性之上結(jié)果得知,二種甜葉菊廢料提取液高使用量組對(duì)D-半乳糖誘發(fā)的小白鼠身體氧化應(yīng)激損害抑制效果實(shí)際效果好于小劑量與立使用量組,因而挑選高使用量組科學(xué)研究甜葉菊廢料提取液對(duì)D-半乳糖解決小白鼠腦部中抗氧化酶有關(guān)基因表達(dá)水準(zhǔn)。如圖所示5所顯示,與一切正常組對(duì)比,D-半乳糖解決可明顯減少小白鼠肝部機(jī)構(gòu)中GPx1,SOD1,HO-1和Nrf-2遺傳基因相對(duì)性表述水準(zhǔn)(P<0.05)。與D-半乳糖組對(duì)比,試品1高使用量組GPx1,SOD1,HO-1和Nrf-2遺傳基因相對(duì)性表述水準(zhǔn)各自明顯增強(qiáng)了37.55%,68.95%,94.53%和58.74%(P<0.05);試品2高使用量組GPx1,SOD1,HO-1和Nrf-2遺傳基因相對(duì)性表述水準(zhǔn)各自明顯增強(qiáng)了39.79%,60.21%,98.16%和58.01%(P<0.05)。二種甜葉菊廢料提取液中間對(duì)比,對(duì)D-半乳糖解決小白鼠腦部抗氧化性遺傳基因的相對(duì)性表述(GPx1,SOD1,HO-1和Nrf-2)水準(zhǔn)無顯著性差異(P>0.05)。綜合性之上結(jié)果顯示,二種甜葉菊廢料提取液高使用量組均能激話D-半乳糖解決小白鼠體腦部?jī)?nèi)抗氧化性基因表達(dá),提高其身體抗氧化性活力。
Barroso等根據(jù)HPLC-DAD-ESI/MS對(duì)二種存儲(chǔ)標(biāo)準(zhǔn)下的甜葉菊提取液成份開展評(píng)定,發(fā)覺其含有18種酚酸和黃酮類化合物、多糖類化學(xué)物質(zhì),在其中占比最多的為綠原酸和異綠原酸A。本科學(xué)研究評(píng)定的二種甜葉菊廢料提取液中的主要成分為咖啡酸、綠原酸、隱綠原酸、異綠原酸A、異綠原酸B、異綠原酸C、原兒茶醛和槲皮苷,均包括在Barroso等報(bào)導(dǎo)的18種酚酸和黃酮類化學(xué)物質(zhì)當(dāng)中,在其中占比最多的為咖啡酸、異綠原酸C和異綠原酸B,Barroso等分析的甜葉菊提取液是以甜葉菊葉子中獲取獲得,而本分析采用的甜葉菊廢料提取液是以甜菊糖苷生產(chǎn)過程中形成的斜板沉淀池廢料中獲取獲得,因而二者主要成分中間出現(xiàn)差別Shukla等和Tadhani等研究表明甜葉菊提取液具備極強(qiáng)的身體之外抗氧化性活力,能抑止一系列氧自由基,如DPPH、羥氧自由基、一氧化氮等。此外,有分析表明原兒茶醛具備極強(qiáng)的抗氧化性功效,其身體之外抗氧化性功效與維他命C和維生素E功效非常,與此同時(shí)原兒茶醛還能夠提升二甲基亞砜誘發(fā)小白鼠身體總抗氧化能力,綠原酸和咖啡酸能夠 提高腦栓塞再灌注損傷實(shí)體模型大白鼠身體的抗氧化能力。
本科學(xué)研究評(píng)定的二種甜葉菊廢料提取液均富含這種已報(bào)導(dǎo)的具備抗氧化性功效的成份,因而甜葉菊廢料提取液具備增強(qiáng)人體抗氧酶魅力,降低膽固醇和脂質(zhì)過氧化物的工作能力,可合理預(yù)防或減輕氧自由基造成 的氧化應(yīng)激損害。
D-半乳糖誘發(fā)變老實(shí)體模型最開始在1985年,由徐敝本在應(yīng)用嚙齒類動(dòng)物變老實(shí)體模型開展防衰老藥品的分析中明確提出。D-半乳糖的作用體制與氧化應(yīng)激損害,鈣穩(wěn)定失衡,膜蛋白脆化,非酶糖基化反映,端粒短縮及端粒酶的活力降低,及其免疫力功能減退相關(guān)。D-半乳糖誘發(fā)變老實(shí)體模型與其他變老實(shí)體模型對(duì)比,與當(dāng)然變老更為相仿,成模簡(jiǎn)單,結(jié)果平穩(wěn),因而獲得較普遍應(yīng)用推廣。本實(shí)驗(yàn)中,小白鼠經(jīng)頭頸皮內(nèi)注射D-半乳糖11周以后,肝部、腦和血清蛋白中SOD和GPx活力均明顯減少,MDA成分明顯上升,抗氧化酶基因的表達(dá)量明顯降低,這與高璐等和Lei等的結(jié)果一致,說明變老實(shí)體模型搭建取得成功。
酶促反應(yīng)系統(tǒng)軟件被覺得是身體抗氧化性體系的第一道防線,具備降低膽固醇,催化反應(yīng)體細(xì)胞內(nèi)氯丁二烯溶解等功效,避免氧化應(yīng)激對(duì)人體導(dǎo)致的損害,對(duì)體細(xì)胞有著防護(hù)功效,關(guān)鍵由一些酶構(gòu)成,如SOD,GPx等,非酶促反應(yīng)管理體系主要是為維他命、碳水化合物和金屬材料蛋白。本探究數(shù)據(jù)顯示,與D-半乳糖組小白鼠對(duì)比,二種甜葉菊廢料提取液高使用量組小白鼠身體SOD,GPx活力明顯提升,MDA成分明顯減少,抗氧化酶遺傳基因的相對(duì)性表述量相應(yīng)提升,這與符莎露等報(bào)導(dǎo)綠色植物花青素對(duì)變老小白鼠抗氧化性功效科學(xué)研究結(jié)論一致,說明甜葉菊廢料提取液具備優(yōu)良的抗氧化性、延緩衰老功效。Nrf-2在抗氧化酶遺傳基因的基因表達(dá)中起著關(guān)鍵功效,是體細(xì)胞氧化應(yīng)激反映中的主要因素,與抗氧化性反映元器件融合,運(yùn)行中下游靶遺傳基因如HO-1,SOD和GPx等基因表達(dá),進(jìn)而提升抗氧化性酶的活性。參考文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)一些純天然化學(xué)物質(zhì),如原兒茶醛、綠原酸等,可根據(jù)激話Nrf-2,提升HO-1等抗氧活性酶的mRNA表述,本實(shí)驗(yàn)中的甜葉菊廢料提取液高使用量組含有花青素黃酮類化合物、多糖類化學(xué)物質(zhì),能提升抗氧化性遺傳基因GPx1,SOD1,HO-1和Nrf2的表述,科學(xué)研究結(jié)果與文獻(xiàn)資料報(bào)導(dǎo)一致。Jeong等研究表明,綠色植物多酚類化合物能夠 經(jīng)過激話D-半乳糖實(shí)體模型小白鼠身體PI3K/Akt/Nrf2轉(zhuǎn)錄因子,減輕身體氧化應(yīng)激損害,因而甜葉菊廢料提取液對(duì)D-半乳糖致變老小白鼠的抗氧化性體制很有可能與激話小白鼠身體PI3K/Akt/Nrf2轉(zhuǎn)錄因子,提升小白鼠身體抗氧化酶活力和抑止脂質(zhì)過氧化化學(xué)物質(zhì)的產(chǎn)生相關(guān),對(duì)其抗氧化性作用機(jī)制開展進(jìn)一步科學(xué)研究有著關(guān)鍵實(shí)際意義。
二種甜葉菊廢料提取液含有酚酸和黃酮類化合物、多糖類化學(xué)物質(zhì),能提升變老實(shí)體模型小白鼠血清蛋白、肝部、腦部SOD和GPx魅力,減少M(fèi)DA成分,提高抗氧化酶遺傳基因的相對(duì)性表述,表明二種甜葉菊廢料提取液均能有效的減輕D-半乳糖對(duì)小白鼠導(dǎo)致的氧化應(yīng)激損害。因而,甜葉菊廢料提取液具備優(yōu)良的身體抗氧化性功效,為將來甜葉菊廢料提取液相關(guān)產(chǎn)品的開發(fā)帶來了一定的科學(xué)論證。
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