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酶底物法快速測定地表水中糞大腸菌群實驗研究

來源:鄭州天順食品添加劑有限公司 發(fā)布時間:2021-09-12 10:03:19 關(guān)注: 0 次
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沙門氏菌群是總大腸桿菌中的一部分。 關(guān)鍵來源于排泄物遙在 44.5益溫度下會生長發(fā)育并發(fā)醇乳清蛋白產(chǎn)酸脹氣的大腸桿菌稱之為糞大腸菌群。用提升 塑造溫度的辦法將地理環(huán)境中的大腸桿菌與排泄物中的大腸桿菌區(qū)別開, 使培育出的菌具體為來源于排泄物中的大腸桿菌, 進而更確切地體現(xiàn)出水體受排泄物嚴重污染的狀況 目前袁糞大腸菌群檢驗最常見的辦法是多管發(fā)酵和濾膜法。 可是這2種方式測量的時間段都較長袁最少必須 48 h,流程繁雜必須 認證實驗,與此同時無菌操作原則對試驗室硬件設(shè)施的規(guī)定 十分高。 而固定不動底物酶底物分析法 1 個試品在試驗室內(nèi)實際操作的時間僅必須 1 min塑造時間也減少為 24 h在一般試驗室內(nèi)就能開展, 酶底物法可抑 制 200 萬只異常病菌精準(zhǔn)檢驗到每 100 mL 試品中的 1 個糞大腸菌群。

1 試驗一部分

1.1 儀器設(shè)備與實驗試劑

關(guān)鍵儀器設(shè)備與實驗試劑詳細表 1。

1.2 實驗原理

在塑造溫度為 44.5依1益標(biāo)準(zhǔn)下袁糞大腸菌群細 菌 能 特 異 性 產(chǎn) 生 茁 一 半 乳 糖 苷 ,該生物菌能夠溶解色原底物釋放出來色 衣原體陽性使細胞培養(yǎng)液呈淡黃色袁 使細胞培養(yǎng)液呈淡黃色轉(zhuǎn)變 的原 理來測量水里糞大腸菌群。

1.3 實驗步驟

1 選用 100mL 無菌檢測取樣瓶取 100mL 攪拌水 樣 (假如水質(zhì)采樣糞大腸菌群數(shù)超過2005 個/L則酌情考慮少 取并且用新配制的超純水系統(tǒng)稀釋液至 100mL 標(biāo)尺線)。 

2 在配有水質(zhì)采樣的取樣瓶中添加科即得 TM(Colilert余)實驗試劑袁充足混勻袁使實驗試劑徹底融解。 

3 把融解徹底水質(zhì)采樣倒進無菌檢測塑造定量分析盤(97孔)。

4 選用帶 97 孔定量分析盤硫化橡膠托墊在全自動封口機上 開展封裝。

5 把封裝好的 97 孔定量分析盤裝人 44.5 1oC 恒 溫恒溫箱中塑造 24h。

6 塑造 24h 后從恒溫箱中取下與 97 孔呈陽性規(guī)范色度盤開展較為淡黃色孔色調(diào)比 97 孔呈陽性 規(guī)范色度盤深的說明為陽性反應(yīng)依據(jù) 97 孔定量分析盤里的呈陽性孔眼 對比 IDEXX 企業(yè)供應(yīng)的 MPN表報出結(jié)果。

1.3 試品來源于

水質(zhì)采樣來自慶陽市蒲河地下水及巴家咀地面生活用水源水體袁 依照 葉地下水和污水監(jiān)測技術(shù)性規(guī) HJ/T91-2002的要求收集并于 0耀4益超低溫避 光儲存6h 內(nèi)開展材料分析測試。

 2 結(jié)果與探討

2.1 實驗結(jié)果
此次試驗各取慶陽市蒲河地下水和巴家咀飲 用水資源水 30 份試品各自用酶底物法和多管發(fā)醇 法開展檢測數(shù)據(jù)分析袁結(jié)果見表 2。

2.2 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

應(yīng)用手機軟件 Excel2007, 對 2 種方式檢測的糞大腸菌群結(jié)果開展匹配 t 檢測袁為了更好地使 2 組數(shù)據(jù)信息呈正 態(tài)遍布 現(xiàn)對信息開展多數(shù)解決后再開展 t 檢測結(jié)果見表 3。

由表 3 由此可見泊松相關(guān)系數(shù)r為 0.98堯0.994屬 強有關(guān)淵指數(shù)越趨向 1袁關(guān)聯(lián)性直越好袁表明2組 數(shù)據(jù)信息的關(guān)聯(lián)性非常好曰 P=0.426 和 0.725袁躍0.05袁表明 2組數(shù)據(jù)信息無統(tǒng)計學(xué)意義上的顯著性差異可覺得多管發(fā)酵與酶底物法試驗結(jié)論具備對比性與 有關(guān)參考文獻相符合具備不錯的一致性。

2.3 探討

1 酶底物法與多管發(fā)酵各自測量以慶陽 市地區(qū)的蒲河為象征的水質(zhì)采樣中的糞大腸菌群兩 者沒有統(tǒng)計學(xué)意義上的差別遙 原文中的解析結(jié)論與 有關(guān)文獻的結(jié)果有不錯的一致性 。

2 酶底物測定方法地下水中的糞大腸菌群袁操 作簡單檢測的及時性好于傳統(tǒng)式的統(tǒng)計分析方法袁檢測周期時間短早期準(zhǔn)備工作少袁對試驗標(biāo)準(zhǔn)和工作人員規(guī)定 低袁可以更快的檢測水體微生物菌種環(huán)境污染程序流程袁達到環(huán)保監(jiān)測技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)。

3 酶底物法在國外堯歐洲地區(qū)及一部分東南亞國家被普遍使用于水里堯 糞大腸菌群及腸子埃希氏菌的檢驗并根據(jù)英國 EPA 驗證遙 我國也納入了葉日常生活 飲 用 水 標(biāo) 準(zhǔn) 檢 驗 方 法 微 生 物 指 標(biāo) 曳 (GB 轅 T 5750援12要2006)袁能夠測量生活用水中總大腸桿菌和腸子埃希氏菌 廣東質(zhì)量監(jiān)督局于 2013 年準(zhǔn)許公布了行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)葉水里菌落總數(shù) 復(fù)合型 酶底物檢驗方式曳(DB44 轅 T 1163要2013)遙 酶底物法在我國正逐漸逐漸營銷推廣 可是因為該辦法的費用較高袁現(xiàn)階段都還沒被普遍應(yīng)用 假如未來實驗試劑堯耗 材價錢能有些降低 水質(zhì)采樣的測量范疇能進一步提 高一定會獲得更快的營銷推廣。 

3 結(jié)果

固定不動底物酶底物測定方法水質(zhì)采樣中的糞大腸菌群具備較高的準(zhǔn)確度和精確性袁與多管發(fā)酵進 行較為在統(tǒng)計學(xué)意義上無顯著性差異 能達到環(huán) 境監(jiān)測系統(tǒng)規(guī)定遙 該辦法使用簡單堯便捷袁工作中效 率獲得了明顯增強袁合適大批量剖析水體類試品建 議國家相關(guān)單位頒布水里糞大腸菌群酶底物統(tǒng)計分析方法。

申明:文中常用照片、文本來自《環(huán)境研究與監(jiān)測》,著作權(quán)歸原作全部。

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