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酶法測(cè)定林芝市售不同動(dòng)物肌肉左旋肉堿含量(一)

來(lái)源:鄭州天順食品添加劑有限公司 發(fā)布時(shí)間:2021-09-17 15:54:37 關(guān)注: 0 次
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以林芝市售新鮮黃牛黨、羊、土雞、尸骨雞、白條鴨和幼鴿為原材料,對(duì)其脊、胸、臀等位置肉中的左旋肉堿成分開展測(cè)量、剖析和較為。選用酶技術(shù)性測(cè)定方法得到左旋肉堿的濃度值,并依據(jù)標(biāo)曲方程計(jì)算出左旋肉堿成分。根據(jù)對(duì)黃牛黨、羊、土雞、尸骨雞、白條鴨和幼鴿的脊、胸、臀等位置中左旋肉堿測(cè)量值的剖析發(fā)覺,黃牛黨各位置肉中左旋肉堿的成分均為最大:脊肉174.54mg/kg;臀肉173.56mg/kg;肩肉167.34mg/kg;胸肉174.241mg/kg,明顯高過羊、土雞、尸骨雞、白條雞、幼鴿中各位置肉左旋肉堿的成分(P<0.05)。在其中,幼鴿脊肉中左旋肉堿成分明顯高過胸肉、臀肉;羊胸肉左旋肉堿成分明顯高過脊肉、肩肉、臀肉;黃牛黨、尸骨雞、土雞的各位置肉間無(wú)明顯差別(P<0.05)。黃牛肉左旋肉堿成分明顯高過別的種群,同一種群的脊肉和胸肉的肉堿成分較高。

肉堿有3種電子光學(xué)同分異構(gòu)體:左旋肉堿、右旋肉堿和消旋體肉堿。右旋肉堿和消旋體肉堿全是生物中沒有的生成化學(xué)物質(zhì),僅有左旋肉堿在生物身體具備生物活性。左旋肉堿(L-carnitine亦稱vitaminBT),有機(jī)化學(xué)名叫L-β甲基-γ-三甲胺丁酸,化學(xué)式為C7H15NO3,是一種促進(jìn)人體脂肪轉(zhuǎn)換為動(dòng)能的類碳水化合物,也是一種相對(duì)性相對(duì)分子質(zhì)量較小的類蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu),又稱之為肉毒堿,其具體來(lái)源是尖肉。推動(dòng)脂質(zhì)新陳代謝是其具體作用,它是調(diào)整膜蛋白內(nèi)外?;鵆oA/CoA(輔酶A)的比例,將長(zhǎng)鏈脂?;鶐У骄€粒體基質(zhì),與此同時(shí)將膜蛋白內(nèi)發(fā)生的挎包脂?;敵?。欠缺左旋肉堿很有可能會(huì)發(fā)生易疲勞,肌肉僵硬,發(fā)慌等病癥,情況嚴(yán)重發(fā)生代謝紊亂,暈厥乃至身亡,這也是因?yàn)橛绊懹退嵝玛惔x而致使的動(dòng)能生成不夠。肉堿在食品類、營(yíng)養(yǎng)成分、精飼料及其生物醫(yī)藥等各個(gè)領(lǐng)域運(yùn)用普遍,且應(yīng)用前景較寬闊。肉堿現(xiàn)階段僅有法國(guó)、日本、西班牙等極少數(shù)我國(guó)能生產(chǎn)制造,中國(guó)對(duì)該商品科研開發(fā)設(shè)計(jì)相對(duì)性很少。

小動(dòng)物全身肌肉具備肉質(zhì)地鮮嫩、口味潤(rùn)化和肉味濃醇等特性,其脊肉、胸肉、臀肉、肩肉等機(jī)構(gòu)中左旋肉堿活力成份成分相對(duì)豐富多彩,具備一定的分析和探討使用價(jià)值。黃牛黨副產(chǎn)品的產(chǎn)銷量伴隨著在我國(guó)各個(gè)地域牛羊肉飲食業(yè)的迅速進(jìn)步而日趨提升,而其做為純天然左旋肉堿的主要來(lái)源于便造成愈來(lái)愈多的人關(guān)心?,F(xiàn)階段,世界各國(guó)對(duì)小動(dòng)物全身肌肉中左旋肉堿的獲取關(guān)鍵運(yùn)用超音波輔助高氯酸法,在這個(gè)基礎(chǔ)上選用酶法測(cè)量全身肌肉中左旋肉堿的成分能夠不錯(cuò)防止右旋肉堿和消旋體肉堿的造成,獲得天然的左旋肉堿產(chǎn)品科學(xué)研究相對(duì)性較為全方位。離子色譜法、高效率液相色譜儀質(zhì)譜分析聯(lián)使用方法等是左旋肉堿的測(cè)量關(guān)鍵采取的方式 ,而酶法是近些年快速發(fā)展起來(lái)比較靠譜的方式 ,運(yùn)用酶法測(cè)量左旋肉堿的分析還不怎么見報(bào)導(dǎo)。酶法中肉堿乙酰轉(zhuǎn)移酶專一地功能于左旋肉堿和乙酰輔酶A中間的反映,從而轉(zhuǎn)化成乙酰肉堿和分散的輔酶。

新鮮土雞、尸骨雞、白條鴨、幼鴿、黃牛和羊等小動(dòng)物身體上的結(jié)構(gòu)為原材料,討論了不一樣機(jī)構(gòu)中左旋肉堿的成分。根據(jù)酶技術(shù)性測(cè)定方法獲得左旋肉堿的濃度值,依據(jù)標(biāo)曲線性回歸方程測(cè)算左旋肉堿成分。為幼鴿、土雞、尸骨雞、白條鴨、幼鴿、黃牛和羊的脊肉、胸肉、臀肉等中的左旋肉堿成分測(cè)量給予理論來(lái)源。酶法測(cè)量全身肌肉中左旋肉堿成分較迅速簡(jiǎn)易,所得的結(jié)果較精確靈巧,能夠更好地為合理運(yùn)用小動(dòng)物全身肌肉豐富多彩的左旋肉堿資源和加大力度開發(fā)設(shè)計(jì)高效益減肥食物給予一系列科學(xué)研究手冊(cè)。

1原材料

1.1實(shí)驗(yàn)原料

實(shí)驗(yàn)原材料:黃牛肩肉、黃牛胸肉、黃牛黨臀肉、黃牛脊肉、羊肩肉、羊胸肉、羊臀肉、羊脊肉、土雞胸肉、土雞臀肉、土雞脊肉、尸骨雞脯肉、尸骨雞臀肉、尸骨雞脊肉、京東白條鴨胸肉、白條鴨臀肉、白條鴨脊肉、幼鴿胸肉、幼鴿臀肉、幼鴿脊肉

原材料來(lái)源于:林芝市農(nóng)貿(mào)批發(fā)市場(chǎng)

1.2實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)試劑

1.3儀器設(shè)備與機(jī)器設(shè)備

2方式

2.1試驗(yàn)設(shè)計(jì)

將5,5'二硫代雙-(2-氟苯苯甲醛)和分散的輔酶A反映造成淡黃色的化學(xué)物質(zhì),該化學(xué)物質(zhì)色調(diào)的深度與分散的輔酶A的成分成正比例關(guān)系。因?yàn)樽笮鈮A和分散的輔酶A是等克分子反映關(guān)聯(lián),就可以間接性得到試件中左旋肉堿的成分。簡(jiǎn)單點(diǎn)來(lái)說(shuō),便是使用酶技術(shù)性測(cè)定方法精確測(cè)量試品的OD值值,再依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方程曲線圖測(cè)算出試品中堿成分。

2.2統(tǒng)計(jì)分析數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

每一次實(shí)驗(yàn)做3組平行面實(shí)驗(yàn),數(shù)據(jù)信息用SPSS18.0手機(jī)軟件開展單要素方差分析,差別顯著者用Duncan’s開展多重比較。結(jié)果用“均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差”表明,明顯水準(zhǔn)設(shè)定為(P<0.05)。

2.3實(shí)驗(yàn)方式

2.3.1實(shí)驗(yàn)操作流程

試品測(cè)量前解決:將新鮮土雞、尸骨雞、白條鴨、幼鴿、黃牛和羊的胸肉、脊肉、臀肉等位置肉去除人體脂肪、筋腱、筋等,經(jīng)組織搗碎機(jī)搗爛后,各自稱量2g試品放置A(脊肉)、B(胸肉)、C(臀肉)等離心管架中,向每一個(gè)離心管架中添加10mL3%摩爾分?jǐn)?shù)的高氯酸(3mL100%的高氯酸加超純水系統(tǒng)稀釋液,滴定劑至100mL;先后將離心管架放到小型漩渦混和儀上勻漿5min;再將離心管架放到配有適度的水的量杯內(nèi),把量杯放進(jìn)數(shù)控機(jī)床加溫超聲波清洗機(jī)內(nèi)超音波破壁料理機(jī)解決10min;后將離心管架放進(jìn)0℃冰水混合物內(nèi)30min,最終將解決液放置低速檔臺(tái)式離心機(jī)解決10min留意配平),取上清液。加8mL3%高氯酸于沉積中,勻漿5min,超音波解決10min后,再離心式10min,一樣于0℃下靜放30min,取上清液。合拼2次上清液,用NaOH(稱量2gNaOH加超純水系統(tǒng)融解,滴定劑至100mL,濃度值為0.5mol/L)調(diào)上清液pH至7.8。旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮上清液至1mL上下。用一次性針筒提取上清液過0.45um直徑的濾紙,滴定劑至5mL。

2.3.2標(biāo)曲制作及全身肌肉左旋肉堿提獲得率測(cè)量

向各小試管嬰兒里各自添加0.4mmol/LDTNB,取其中2mL,用另一容量瓶滴定劑至50mL(遮光儲(chǔ)存)、1.33mmol/LEDTANa2,及其pH為7.5的266.7mmol/LTris-HCl緩沖溶液,滴定劑至50mL,再移取180µL的混和水溶液。左旋肉堿標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)配備成10mg/L,20mg/L,30mg/L,40mg/L,50mg/L,60mg/L,70mg/L,80mg/L不一樣濃度值水溶液,各自取60µL引入混和水溶液,并稀釋液至2.5mL。再快速添加5μL0.55mmol/L肉堿乙酰轉(zhuǎn)移酶水溶液,于37℃自然環(huán)境反映16min后,放置96孔板中,于酶標(biāo)儀內(nèi)412nm處測(cè)量其左旋肉堿的OD值。

左旋肉堿的提獲得率(mg/kg)=cv/100m

式中:C為依據(jù)標(biāo)曲得到萃取液中左旋肉堿的濃度值,mg/L;V為萃取液滴定劑后的容積,mL;m為牛羊肉的品質(zhì),g

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