一、方式選用的根據
木薯淀粉可立即被酸水解反應轉化成葡萄糖水;或被酶水解反應轉化成麥牙糖和麥芽糊精,寄內酸水解反應轉化成葡萄糖水,可測量葡萄糖水成分(還原性糖)再估算出木薯淀粉成分。此外,木薯淀粉經分散化和酸解后具備一定的旋光性,也可以用旋光測定方法木薯淀粉成分。這兒要強調的是,酸水打法不但使淀粉水解,并且也可以溶解木質素,結果形成了具備復原力的麥芽糖醇、阿拉伯糖等單糖,使木薯淀粉測量結果較高。
有些人曾以鼓皮、小米手機殼、苞米及紅薯等試件用糖化酶法及立即酸水解反應測定方法木薯淀粉含最,結果糖化酶法均較立即水解反應法為低,由于立即酸水打法中木薯淀粉與半化學纖維家均被溶解為還原性糖,而糖化酶法僅能糖化木薯淀粉,半化學纖維索則失靈,因而木質素留于沉淀中,將糖化后的滲瀝液與沉淀各自水解反應后滴定管糖,二者結果之和與立即酸水打法滴定管糖的結果相貼近。用立即酸水解反應測定方法木薯淀粉,易將木質素誤作木薯淀粉,以至得到問題的結果。這節(jié)除詳細介紹經典的酶水解反應法外,還強烈推薦谷類種籽粗木薯淀粉測量的國家行業(yè)標準法—旋光法。
二、谷類種籽中粗木薯淀粉的測量(CaC12-HOAc萃取法-旋光法)
1、方式基本原理淀粉是含糖量高聚物,可以用CaC12-HOAc(密度1.3,pH2.3)為分散化和汽化劑,在一定的酸值和加溫情況下,使木薯淀粉融解和一部分酸解,轉化成具備一定旋光性的溶解物質可以用旋光計測量。用此方法時,各種各樣木薯淀粉的溶解物質的比旋特定為203。全國各地谷類木薯淀粉統(tǒng)計分析方法規(guī)范化科學研究學組覺得,此方法結果的可重復性好,實際操作簡單、迅速。
2、儀器設備及機器設備旋光計:電加熱控溫凡士林浴(±1°C)。
3、實驗試劑
(1) CaCl2-HOAc水溶液:融解5份重的CaC12•2H2O(分析純)于6份水里,調整其密度(20℃時)為1.30。此水溶液約含CaC12330g•L-1。再向此水溶液中添加冰HOAc(每1000mL約加1.3mL冰HOAc),用pH計檢測調整至pH2.3,過慮至清亮才行。
(2)磷酸二氫鈉水溶液:稱量ZnSO4•7H2O 30g溶解100 mL水里。
(3)亞鐵氰化鉀水溶液:稱亞鐵氰化鉀(K4Fe (CN )6•3H2O,分析純)15g溶解100 mL水里。
4、操作流程
(1)待測液制取稱量研磨谷類試品2.500g,放進250 mL三角瓶中(與此同時測量水份),添加CaCl2-HOAc水溶液10mL和6個~八個小玻璃彈珠或粒大石英沙,輕輕地混勻,不必讓試品粘在瓶底。再用CaC12-HOAc水溶液50mL沿瓶壁滲濾粘附在瓶內壁的試品,蓋緊小布氏漏斗,放在1180±10C控溫油浴中,使之在5 min內做到控溫,再次控溫加溫25 min。在升溫歷程中不必拌和,使其當然分散化水解反應(可以用玻棒將瓶壁附屬物送到液位下列)。煮畢馬上取下,放置水流制冷槽中充足制冷(約15min),隨后用30mL上下水份次高質量地清洗所有內容物轉到100mL容量瓶中,添加磷酸二氫鈉水溶液1mL,充足混勻后再添加亞鐵氛化鉀水溶液1mL,再混勻,若有泡沫塑料,可加少量酒精清除之,自來水定溶,用中等速度過濾紙過慮,棄去初滲瀝液(15mL±20mL)。取回應液待測。
(2)測量:測量先用清澈的待測液洗旋日光燈管2次~3次,隨后將水溶液放滿管內,使支管液態(tài)呈一突起,將運動的圓玻璃鏡片與旋日光燈管豎直方位插進蓋緊(可防止留出汽泡)。將管蓋擰緊,查驗管內是不是有汽泡。隨后測讀旋光儀上的旋光度或檢糖計上的0S,取3次測讀的平均值。
5、結果測算
α—旋光視角的讀值;
L—旋日光燈管長(dm);
m—試品品質(g);
203—木薯淀粉的比旋;
H—試品水份成分,%。
6、常見問題
(1) CaC12-HOAc水溶液的酸值務必調整至pH2.3(用酸度計調節(jié)),若pH>2.5,易使分散化液濃稠,難以過慮;若pH<2.5,易造成木薯淀粉進一步水解反應而減少比旋。
(2)試品中富含水溶糖原,須先用80%酒精洗糖,但絕大部分谷類種籽中水溶糖成分微乎其微,一般可忽略,無須開展脫糖辦理手續(xù)。
(3) CaC12-HOAc水溶液應在放進凡士林浴前約5mi。添加,防止試品枯附在瓶底,危害分散化實際效果
(4)實驗證實,在加溫前期拌和,木薯淀粉易結團;但在放進凡士林浴前務必輕輕地搖晃,使試品勻稱分散化在CaC12-HOAc物質中,勿使試品粘在瓶底,必需時可以用鏟形玻棒將其攪開,加溫后使其當然水解反應,測量效果的可重復性不錯。
三、麥麩、小米手機殼、苞米、紅薯、木本植物(青飼料等)的葉莖中面粉的測量(木薯淀粉糖化酶一酸水打法)
1、方式基本原理木薯淀粉先經過胃蛋白酶水解反應成麥牙糖及麥芽糊精,寄內酸水解反應,最終成葡萄糖水。測量所取得的葡萄糖水量,就可測算木薯淀粉成分。
2、儀器設備及機器設備恒溫箱(隔熱保溫60℃下列創(chuàng)業(yè)孵化器。