每升木耳發(fā)酵物能獲取含糖量244mg,純凈度為85.3%,F(xiàn)T-IR光譜儀表明,木耳胞外含糖量為具備典型性β-吡喃糖構(gòu)造的繁雜含糖量(圖1),官能團(tuán)異構(gòu)分析表明,在3419cm-1處的寬峰是-OH伸縮式震動(dòng)消化吸收峰,2973cm-1和2918cm-1處的弱消化吸收帶是-CH伸縮式震動(dòng)消化吸收峰,1735cm-1和1638cm-1處的消化吸收峰說明帶有糖醛酸,1383cm-1是-CH彎折震動(dòng)消化吸收峰,1078cm-1和1048cm-1處的消化吸收峰是C-O-H和C-O-C中的C-O造成的振蕩消化吸收;880cm-1是β-糖苷鍵的特點(diǎn)消化吸收峰。
木耳胞外含糖量歷經(jīng)酸水解反應(yīng)和衍化化時(shí),運(yùn)用HPLC剖析其單糖構(gòu)成。數(shù)據(jù)顯示,葡萄糖水和麥芽糖醇為其具體的單糖成分(摩爾質(zhì)量之比53.85%和25.05%),也有少許的甘露糖、葡萄糖、巖藻糖、阿拉伯糖和葡萄糖醛酸(表1)。與紅外線定量分析結(jié)果一致,木耳胞外含糖量是由多種多樣單糖成分組成的雜合含糖量。
與實(shí)驗(yàn)組對比,灌胃木耳胞外含糖量后小白鼠休重?zé)o顯著轉(zhuǎn)變(圖2)。內(nèi)臟器官指數(shù)是體現(xiàn)動(dòng)物器官生長發(fā)育的主要指標(biāo)值,可直接體現(xiàn)受試物對小動(dòng)物存有的危害功效。本分析根據(jù)稱重小白鼠各內(nèi)臟器官機(jī)構(gòu)品質(zhì),測算其內(nèi)臟器官指數(shù)。木耳胞外含糖量對小白鼠內(nèi)臟器官指數(shù)的危害見表2,數(shù)據(jù)分析表明,試品組和對比結(jié)果無顯著性差異(P>0.05)。以上實(shí)驗(yàn)說明,灌胃木耳胞外含糖量不容易造成小白鼠內(nèi)臟器官產(chǎn)生生理性出現(xiàn)異常。
本實(shí)驗(yàn)運(yùn)用微生物菌種16SrRNA高通量測序技術(shù)性,探尋了灌胃木耳胞外含糖量小白鼠腸菌的變動(dòng)狀況。轉(zhuǎn)錄組測序所得的原始記錄經(jīng)挑選過慮后,對得到的隊(duì)列開展可實(shí)際操作模塊剖析(OTU)合并區(qū)劃,選用Greengenes數(shù)據(jù)庫開展注解,根據(jù)多種多樣多自變量應(yīng)用統(tǒng)計(jì)學(xué)分析工具對不一樣樣版(組)微生物菌種群落結(jié)構(gòu)差別開展剖析,獲得了小白鼠腸道微生物16SrRNA在屬水準(zhǔn)OTU編碼序列的相對豐度(圖3)。根據(jù)Metastats對樣版小組之間編碼序列量差別的較為檢測發(fā)覺,與實(shí)驗(yàn)組對比,擬桿菌屬和羅氏菌屬明顯提升(P<0.05),擬桿菌屬在含糖量組腸道微生物群中占(10.31±1.5)%,而對照實(shí)驗(yàn)為(5.4±1.38)%;羅氏菌屬在含糖量組里占(0.17±0.07)%,而在對照實(shí)驗(yàn)中未監(jiān)測到。
腸道微生物根據(jù)膳食纖維素的發(fā)醇和短鏈脂肪酸(SCFAs)的形成來提升能量利用率,進(jìn)而提升寄主新陳代謝高效率。本實(shí)驗(yàn)將小白鼠排泄物試品依照低溫干燥排泄物試品,精確稱量50mg試品,添加1.2mL聚磷酸鹽緩沖溶液(pH7.3)攪拌,4℃14000r/min離心式20min,汲取上清液至5mL離心管架中。每200μL上清添加0.1mL的稀釋液后鹽酸(摩爾分?jǐn)?shù)50%),充足攪拌3min,用2mL二氯甲烷(色譜儀級)開展提純,4℃靜放2h,隨后用0.22μm有機(jī)濾膜過慮。選用氣象色譜儀(GC)檢驗(yàn)試樣中短鏈脂肪酸的成分,試品獲取方式參考Zhao等并做一部分改動(dòng)。GC剖析選用基本HP-FFAP(25m×0.32mm,0.5μm)配備柱,程序流程設(shè)置參考賈益群等在微生物試品油酸獲取與解析的分析結(jié)果,并更改其分離之比20∶1。SCFA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)水溶液的配制及其標(biāo)曲制作參考孟拓等對氣象色譜儀-質(zhì)譜分析聯(lián)用分析法腸道炎小白鼠短鏈脂肪酸新陳代謝科學(xué)研究結(jié)果。