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耐酸性β-甘露聚糖酶產(chǎn)生菌的篩選鑒定及培養(yǎng)基優(yōu)化(三)

來源:鄭州天順食品添加劑有限公司 發(fā)布時(shí)間:2021-09-17 16:52:20 關(guān)注: 0 次
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對(duì)取得的多元化回歸分析實(shí)體模型開展方差分析和顯著性檢驗(yàn),結(jié)果見表4,磨芋分、酵母菌浸粉和硫酸錳對(duì)酶活有極其明顯(p<0.01實(shí)體模型的擬合程度(R-Squared)為0.9958,精確測(cè)量頻率穩(wěn)定度(AdeqPrecision)為48.993超過4;實(shí)體模型的糾正決定系數(shù)(AdjR-Squared)為0.9903且Pred-R-Squared為0.9323,彼此之間的差別低于0.2。

從上述剖析可有,該模式與具體實(shí)驗(yàn)線性擬合優(yōu)良,試驗(yàn)誤差小,證實(shí)本試驗(yàn)選用響應(yīng)面法提升培養(yǎng)液是有效的。

(2)回應(yīng)斜面圖剖析

三要素兩者之間的回應(yīng)斜面見圖6,從這當(dāng)中能夠看得出三者中間有顯著的配對(duì)t檢驗(yàn)。在試驗(yàn)設(shè)計(jì)范疇以內(nèi),從圖6-a和圖6-b能夠看得出,在酵母菌浸粉和硫酸錳的增加量固定不動(dòng)不會(huì)改變的情形下,產(chǎn)酶魅力伴隨著魔芋精粉加入量的提高而擴(kuò)大;從圖6-a和圖6-c能夠看得出,在魔芋精粉和硫酸錳加上量固定不動(dòng)的情形下,酶魅力伴隨著酵母菌浸粉加上量的提升先升高后逐漸降低;從圖6–b和圖6-c可看得出,在魔芋精粉和酵母菌浸粉加上量固定不動(dòng)不會(huì)改變的情形下,產(chǎn)酶魅力伴隨著硫酸錳加上量的提升先升高后逐漸降低。

在本實(shí)驗(yàn)取值范圍以內(nèi),以較大酶活為總體目標(biāo),依據(jù)手機(jī)軟件Design-Expert10.0.7剖析,培養(yǎng)液的較佳比例為:魔芋精粉3.0%、酵母菌浸粉2.734%、硫酸錳0.439%,預(yù)測(cè)分析酶魅力為6.187U/mL,期待值為0.997。融合操作過程便捷,將培養(yǎng)液加上量改成:魔芋精粉3.00%、酵母菌浸粉2.70%、硫酸錳0.45%,在這里前提下開展三次認(rèn)證試驗(yàn),測(cè)出酶魅力均值為6.179U/mL,與標(biāo)準(zhǔn)偏差的相對(duì)偏差不大,表明本試驗(yàn)選用響應(yīng)面法對(duì)培養(yǎng)液成份開展多元回歸分析,做到了主要參數(shù)調(diào)優(yōu)的目地。

三、結(jié)果與探討

以甘露聚糖為唯一氮源,從魔芋種植土壤層中篩得一株產(chǎn)耐堿性β-甘露聚糖酶的菌種,所產(chǎn)酶在pH4酸堿性緩沖溶液中解決一小時(shí)后酶魅力僅減少13%。根據(jù)16SrDNA測(cè)序并開展系統(tǒng)發(fā)育剖析得知該菌為路德維希腸桿菌。對(duì)該菌的培養(yǎng)液和發(fā)醇情況開展提升,最后將該菌搖瓶發(fā)醇后粗酶液酶活從2.050U/mL提升到6.179U/mL,提升 了三倍。

本科學(xué)研究分離出來獲得的路德維希腸桿菌于2005年由HaraldHoffmann等發(fā)覺并取名,多用來對(duì)水里工業(yè)污染和土壤層農(nóng)殘的整治,也是有報(bào)導(dǎo)該菌具備綠色植物的促生長(zhǎng)發(fā)育性,也有報(bào)導(dǎo)該菌產(chǎn)β-甘露聚糖酶和β-木糖苷酶等。世界各國(guó)對(duì)該菌的分析較少,由于其對(duì)空氣污染的處理與對(duì)綠色植物的促生長(zhǎng)發(fā)育功效及產(chǎn)各種各樣酶,因而該菌在未來依然有很好的分析及應(yīng)用前景。本科學(xué)研究取得的路德維希腸桿菌從現(xiàn)在的研究看來產(chǎn)酶魅力不太高且耐堿性不強(qiáng),可根據(jù)誘變、更改新陳代謝流等方式提升其產(chǎn)酶魅力和耐堿性;由于該菌可使用于許多行業(yè),也需要對(duì)該菌的身理生物化學(xué)特點(diǎn)等信息開展深入分析,為進(jìn)一步科學(xué)研究該菌和運(yùn)用打下基礎(chǔ)。

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