1963年，俞?；莸劝l(fā)覺二氫查爾酮以及化合物可做為甜味素，并從柑桔黃烷酮中獲取了柚皮苷二氫查爾酮（NariNgiNDC）等。二氫查爾酮的清甜味延遲時間長，口味清新，糖度高，發(fā)熱量低，安全性無毒性，能合理的屏蔽掉苦澀味。二氫查爾酮類物質(zhì)對糖尿病患者有一定功效。除此之外，二氫查爾酮類物質(zhì)具備藥力官能團-2，6-二甲基苯乙酮構造，該官能團有清除自由基功效，根據(jù)清除氯丁二烯、消除羥氧自由基來完成?；矢ξ膭P以柚皮渣為原材料，超音波協(xié)助獲取柚皮苷，并且用D101大孔樹脂分離出來聚集，獲得含量為83.7%的柚皮苷；對柚皮苷在偏堿情況下充壓并以鈀碳做為金屬催化劑生成柚皮苷二氫查爾酮（NariNgiNDC），產(chǎn)出率為85.2%。參考文獻和以超音波輔助酒精獲取香柚皮中的柚皮苷，并且用弱正負極AB-8環(huán)氧樹脂分離純化柚皮苷，NaOH做為過柱劑，獲得含量為77.26%的柚皮苷堿溶液，最終將該燒堿溶液在金屬催化劑雷尼鎳的效果下，加氫裂化生成NariNgiNDC。李晚誼等研究表明云南省甜茶很強的皮膚過敏功效，其抗敏功能的成分是二氫查爾酮-4’-β-D葡萄糖水苷和二氫查爾酮-2’-β-D葡萄糖水苷。方旭兵等研究表明龍血樹醇提取液龍血竭的主要成分——龍血素A跟龍血素B均為二氫查爾酮類物質(zhì)，經(jīng)對有關二氫查爾酮生成和裝飾及其用HepG2體細胞開展抗晚期肝癌惡性腫瘤活力挑選，發(fā)覺二氫查爾酮類物質(zhì)中F-18和F-16抗晚期肝癌惡性腫瘤活力不錯。楊美琪研究表明運用硅橡膠、大孔樹脂、MCi-CHP20P及聚糖疑膠柱等分離出來方式，融合薄層色譜及HPLC剖析木棗棗根醇提物，獲得成分較高的二氫查爾酮-4’-β-D-吡喃葡萄糖水苷等16個化學物質(zhì)。現(xiàn)階段，NariNgiNDC的活力科學研究報導較少，本分析對其抗氧化性活力和美白皮膚活力開展基本討論。

1原材料與方式

1.1原材料、實驗試劑與機器設備

柚皮苷標準物質(zhì)，上海源葉；NariNgiNDC標準物質(zhì)，上海源葉；新橙皮苷二氫查爾酮標準物質(zhì)，上海源葉；ABTs，碧云天生物；酪氨酸酶，上海源葉；其他實驗試劑均為分析純；AuToｄoCkviNa1.1.2，英國sCripps研究室。EL204-iC電子分析天平，英國METTLERTOLEDO企業(yè)；5ML移液器，英國EppeNｄorF企業(yè)；syNergyTX多用途酶標儀，英國伯騰儀器設備有限責任公司；MuLTiskaNGo全光波長讀值儀，英國TherMosCieNTiFiC企業(yè)。

1.2實驗方式

1.2.1ABTs氧自由基消除工作能力測量

根據(jù)3.0Mg/ML柚皮苷、1.0Mg/MLNariNgiNDC、0.30Mg/MLNHDC、0.0025Mg/ML原兒茶醛與ABTs自由基反應，測量其吸光度值，制作TroLox（0.15，0.30，0.60，0.90，1.20，1.50MMoL/L）標曲，測算其與TroLox的同樣消除工作能力時的使用量。實際操作流程：

1）在96孔板的每一個檢驗孔內(nèi)添加200μLABTs切削液。

2）空白試驗孔內(nèi)添加10μL純凈水或PBs等適度水溶液，標曲檢驗孔壁添加10μL各種各樣含量的TroLox標液，試品檢驗孔壁添加10μL試品，輕輕地攪拌。

3）室內(nèi)溫度孵育2～6MiN，于光波長734NM處測量OD值。

4）依據(jù)標曲測算試品的總抗氧化能力，用TroLox等效電路抗氧化能力（TroLoxEquivaLeNTANTioxiｄaNCapaCiLy，TEAC）來表明。

1.2.2羥氧自由基消除工作能力測量

根據(jù)3.0Mg/ML柚皮苷、1.0Mg/MLNariNgiNDC、0.50Mg/MLNHDC、0.15Mg/ML原兒茶醛與羥自由基反應，測量其吸光度值，制作TroLox（0.01，0.025，0.05，0.10，0.15Mg/L）標曲，測算其與TroLox的劑量，從而較為抗氧化能力強、弱。

依照表1列出次序向酶標板中添加相匹配實驗試劑，按表1要求的標準實際操作，以TroLox為標準物質(zhì)制作標曲。

試品的抗氧化能力依據(jù)式（1）開展測算?？寡趸芰χ狄訲roLox同樣抗氧化能力時的使用量（μMoLTroLox摩爾質(zhì)量/g）表明，即1g試品等同于TroLox的μMoL數(shù)。

式中，A_試品—試品OD值；A_空缺—試品空缺O(jiān)D值；A_TroLox—TroLox水溶液OD值；M_TroLox—TroLox水溶液的摩爾質(zhì)量（μMoL）；M_試品—試品的品質(zhì)（Mg）。

FerriC-TPTZ切削液[300MMoL/L醋酸鹽緩沖溶液（0.31g三水合乙酸鈉 1.6ML醋酸 超純水系統(tǒng)至100ML，pH3.6]、10MMoL/LTPTZ的40MMoL/鹽酸溶液和20MMoL/LFeCL₃·6H₂O水溶液，以容積比10∶1∶1混和），室內(nèi)溫度反映30MiN后，于光波長593NM處用酶標儀測量其OD值。吸光度值的尺寸與試品的抗氧化能力正相關。維他命C的標曲配置含量為：25，50，100，200，400，800μMoL/L，測量結果以維他命C為參照規(guī)范，結果表明為μMoLAAE/g體力勞動。平行測定3次，結果取均值測算。

1.2.4 ORAC測定方法試品的自由基消除工作能力

根據(jù)3.00g/L柚皮苷、1.00g/LNariNgiNDC、3.00g/LNHDC、0.0125Mg/ML原兒茶醛與過氧化物自由基反應，測量其吸光度值，制作TroLox（62.5，125，250，500，500，1000MoL/L）標曲，測算其與TroLox的摩爾質(zhì)量，較為抗氧化能力強、弱。

該辦法以甲酰胺類物質(zhì)AAPH做為過自由基來源于，熒光素鈉鹽為瑩光顯色劑。將熒光素鈉鹽、AAPH和水溶維他命C類似物TroLox各自用磷酸緩沖溶液（pH7.0）融解，在96孔板中先后添加25μL各含量的TroLox標準物質(zhì)水溶液和試品及其200μL瑩光光素醋酸鹽水溶液（8.68NMoL/L），隨后，將填料放進熒光酶標儀中，用GeNe5程序編程實際操作，37℃加熱30MiN，快速添加AAPH水溶液25μL（153MMoL/L），全自動震蕩混勻，在激起光波長485NM，發(fā)送光波長528NM處用熒光酶標儀測量。原始吸光度抗壓強度值記作f₀，之后每過1MiN測量一個點，共測量120MiN，瑩光抗壓強度各自記作f₀，f₁，f₂…f₁₂₀，依據(jù)公式計算（2）統(tǒng)計分析各含量的曲線圖下總面積AUC值。ORAC的含水量越高，抗氧化能力越強。

TroLox標曲配置濃度值分別為62.5，125，250，500，1000μMoL/L，測量結果以TroLox為參照規(guī)范，結果表明為μMoLTroLox（TE）/g體力勞動。平行測定3次，結果取均值測算。

1.2.5 NariNgiNDC和人銅鋅超氧化物歧化酶sOD的分子對接

選用CheMBioDrawULTra14.0繪制化學物質(zhì)原兒茶醛和NariNgiNDC的構造，隨后用CheMBio3DULTra14.0轉(zhuǎn)換為三維構造，并且用sybyL手機軟件的MMFF94引力場開展提升。人銅鋅超氧化物歧化酶sOD的三維構造（PDBiD：3RE0）從RCsB蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫下載。銅鋅超氧化物歧化酶和化學物質(zhì)均應用AuToｄoCkTooLs1.5.6轉(zhuǎn)換為PDBQT文件格式。選用AuToｄoCkviNa1.1.2開展分子對接。銅鋅超氧化物歧化酶活力結構域的座標設定為：size_x=15，size_y=15，size_z=15；CeNTer_x=1.346，CeNTer_y=-3.077，CeNTer_z=30.419。為了更好地提升測算的精確度，將主要參數(shù)exhausTiveNess設定為20。除開尤其表明，其他參數(shù)均選用初始值。最終，選擇打得分最大的構像用PyMoL1.7.6開展結果剖析。1.2.6酪氨酸酶活力抑止實驗根據(jù)熊果素（0.625，1.25，2.5，5，10Mg/ML）、柚皮苷（0.625，1.25，2.5，5，10Mg/ML）、NariNgiNDC（0.625，1.25，2.5，5，10Mg/ML）、NHDC（0.625，1.25，2.5，5，10Mg/ML）與酪氨酸酶反映測量其吸光度值并制作曲線圖，算出iC50值，從而較為抗氧化能力強、弱。