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應用二乙酰一肟分光光度法準確測定牛乳中尿素的含量(一)

來源:鄭州天順食品添加劑有限公司 發(fā)布時間:2021-09-19 13:11:37 關(guān)注: 0 次
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一切正常牛乳中的尿素溶液成分約200-300mg/L,近些年,一些非法商戶為了能提升盈利室內(nèi)空間,在牛奶中添加尿素溶液過高蛋白質(zhì)含量,而濃度較高的尿素溶液會導致泌尿生殖系統(tǒng)代謝阻礙,造成人體電解質(zhì)溶液失調(diào),對身體產(chǎn)生危害。因而,測量牛奶中尿素溶液的成分十分關(guān)鍵。

現(xiàn)階段,尿素溶液成分的檢查辦法具體有二乙酰一肟酶活性測定、流動性注入檢測儀法、電化學發(fā)光法、液相色譜儀法等,對牛奶中尿素溶液的定量分析檢驗方式較少。小編根據(jù)參照和參考游泳館水里尿素溶液成分的測量及牛奶前解決的方式 ,對牛奶中尿素溶液成分的測量開展了研究和探尋論述,依據(jù)二乙酰一肟與尿素溶液的反映基本原理,對危害尿素溶液顯色反應的試驗標準干了挑選科學研究,最終對該辦法的正確度、利用率及檢出限進一步認證,最后確認該辦法可使用于牛奶中尿素溶液成分的檢驗。

一、原材料與儀器設(shè)備

1.試驗原材料。

試驗用乳購于商場中不一樣牌子的成袋奶及農(nóng)貿(mào)批發(fā)市場市場銷售的散稱奶。

2.關(guān)鍵儀器設(shè)備。

SP-756P紫外線由此可見光度計(上海市光譜儀器有限責任公司),普利賽斯ES225SM-DR電子分析天平(法國普利賽斯企業(yè))。

3.實驗試劑。

(1)尿素溶液國家標準物質(zhì)(99.8%):精確稱量尿素溶液純品國家標準物質(zhì)100mg,溶解0.05mol/L鹽酸中,輕輕地振搖,使尿素溶液徹底融解,并且于100mL容量瓶中滴定劑至標尺,使最后濃度值為1000mg/L,攪拌后將其轉(zhuǎn)到深棕色瓶中,于-4℃冰柜中儲存預留。

(2)尿素溶液規(guī)范應用液:汲取10.0mL的尿素溶液規(guī)范貯備液并且用純凈水稀釋液至100mL,使其含量為100mg/L。

(3)二乙酰一肟水溶液(0.5%):稱量5.0g二乙酰一肟并溶解水里,用容量瓶滴定劑至1000mL。

(4)三氯化鐵-氨基硫脲-鹽酸混和實驗試劑:將200mL的硫酸慢慢添加800mL水里,制冷后添加0.1g三氯化鐵和1.0g氨基硫脲,用純凈水滴定劑至1000mL。

(5)亞鐵氰化鉀水溶液(10.6%):稱量10.6g亞鐵氰化鉀,放水融解滴定劑至100mL。

(6)乙酸鋅水溶液(22.0%):稱量乙酸鋅22.0g,放水融解并添加5.0mL冰乙酸,滴定劑至100mL。

二、實驗方法

1.實驗原理。

二乙酰一肟在弱酸性情況下水解反應轉(zhuǎn)換為雙乙酰,與尿素溶液在強堿標準下縮合反應變成鮮紅色的二嗪化學物質(zhì)。該結(jié)合
物色調(diào)的深度與尿素溶液成分正相關(guān),在光波長525nm上有較大吸取峰。

2.測定法。

取攪拌試品10.0mL于100mL容量瓶中,添加亞鐵氰化鉀和乙酸鋅水溶液各4.0mL,用純凈水滴定劑,振搖均
勻。置放30min后,取10.0mL上清液,添加2.0mL二乙酰一肟水溶液,再添加三氯化鐵-氨基硫脲-鹽酸混和實驗試劑10.0mL,攪拌。將以上各管在開水浴中加溫14min,置流動性水里制冷2min,并且用純凈水稀釋液至
25mL。以純凈水作對照品,用1cm比色皿,于525nm光波長處測量OD值值。

3.試驗標準。

(1)消化吸收光波長的明確。加入適量標液,在480nm-560nm范疇內(nèi)開展全光波長掃描儀,結(jié)果見圖1。

由圖1得知,吸光度值在480nm-525nm范疇內(nèi)慢慢提升,且在525nm處做到較大,在525nm-560nm范疇內(nèi)又慢慢減少,從而明確最好消化吸收光波長為525nm。

(2)反映溫度的挑選。因為該反映在常溫狀態(tài)顯色反應開展得比較慢,故考慮到在升溫的水浴中開展反映,各自將恒溫水浴鍋的溫度設(shè)定為60℃、70℃、80℃、90℃、100℃,觀查其顯色反應,作出反映溫度與OD值的關(guān)系圖,詳細圖2。

由圖2能夠看得出,試品OD值受氣溫干擾很大,伴隨著氣溫的上升而持續(xù)擴大,在溫度貼近100℃時,OD值做到最大,因此 挑選沸水浴加熱為最好的溫度標準。

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