由以上結(jié)果得知油荼葉提取液中的花青素與黃酮類可能是抑止5α-R的主要物質(zhì)條件,選用UPLC-TripleTOF-MS/MS對(duì)COLE中的酚類開展定性研究,結(jié)果在COLE中中國共產(chǎn)黨發(fā)覺22種酚類。圖8為空氣負(fù)離子方式下的總正離子圖,表4為COLE中酚類評(píng)定結(jié)果。RichardA.等分析證實(shí)蘆?。↖C50>100μmol/L)、原兒茶醛(IC50=23μmol/L)具備I型5α-R抑止活力。此外還發(fā)覺兒茶酸等茶氨酸類化合物,在無體細(xì)胞情況下展現(xiàn)出合理的5α-R抑制效果,但在5α-R的全體細(xì)胞剖析中抑制效果不顯著。周琛媛等在具備高5α-R抑止活力的油茶樹蒲丙烯酸樹脂組Fr8中分離純化(選用固相萃取的方法),根據(jù)質(zhì)譜分析和磁共振檢查的方式開展構(gòu)造評(píng)定出F1為3-O-沒食子?;?4,6,–α/β-D-吡喃葡萄糖水(GeminD),F(xiàn)4為3,4,6-3-O-沒食子?;?α/β-D-吡喃葡萄糖水(GAG)。這種化學(xué)物質(zhì)均在COLE中被發(fā)覺,他們是COLE充分發(fā)揮5α-R抑止活力的物質(zhì)條件。
本分析以5α-R為科學(xué)研究靶標(biāo)創(chuàng)建酶促反應(yīng)管理體系,根據(jù)明確粗酶提取液、NADPH、T的適合加上濃度值提升該管理體系,明確反映管理體系如下所示:PBS緩沖溶液(pH7.4)300μL,0.76mg/mL的粗酶提取液500μL,2mmol/L的T50μL,試品50μL,2mmol/L的NADPH100μL,37℃下反映30min。依照該管理體系用HPLC法精確測量臨床醫(yī)學(xué)上采用的I型5α-R緩聚劑度他雄胺的5α-R抑止活力,結(jié)果測出其IC50為6.24nmol/L確認(rèn)該法靠譜合理。根據(jù)可重復(fù)性實(shí)驗(yàn)確認(rèn)該反映管理體系具備可靠性。隨后用該法進(jìn)一步測量、較為不一樣油荼葉提取液5α-R抑止活力,在其中50%酒精油荼葉提取液的5α-R抑止活力最大(IC50=259.56μg/mL),證實(shí)50%酒精油荼葉提取液是不確定性的綠色植物來源的5α-R緩聚劑。最終選用UPLC-TripleTOF-MS/MS對(duì)油荼葉提取液中的成分開展了剖析評(píng)定,結(jié)果共發(fā)覺22種酚類,在其中原兒茶醛、蘆丁、兒茶酸、3-O-沒食子?;?4,6,–α/β-D-吡喃葡萄糖水(GeminD),3,4,6-3-O-沒食子?;?α/β-D-吡喃葡萄糖水可能是COLE充分發(fā)揮5α-R抑止活力的物質(zhì)條件。因而本科學(xué)研究證實(shí)了油荼葉提取液是自然的5α-R緩聚劑,在醫(yī)治雄激素依存性病癥領(lǐng)域有著優(yōu)良的應(yīng)用前景。