2、菌種MCDA02的評定菌種MCDA02為革蘭氏陽性菌呈陰性短鏈球菌(圖2b),無芽胞。該菌種在LB固態(tài)塑造上塑造48h后:淡黃色,不全透明,表層光潔潮濕,環(huán)形,邊沿整齊,核心稍凸起,易挑菌(圖2a)。該菌種果膠酶、吲哚實(shí)驗(yàn)、氯化氫造成、VP實(shí)驗(yàn)、磷酸鹽復(fù)原實(shí)驗(yàn)、尿素溶液酶、檸檬酸鈉鹽均呈呈陰性,抗霉素、觸碰酶實(shí)驗(yàn)均為呈陽性(表1)。菌種MCDA0216SrDNA序列遞交GenBank(登錄名:MH454348),BLAST核對后發(fā)覺菌種MCDA02與Microbacteriumesteraromaticum的開放閱讀框最大。運(yùn)用MEGA9.0手機(jī)軟件根據(jù)臨接法搭建系統(tǒng)發(fā)育樹(圖3),菌種MCDA02與Microbacteriumesteraromaticum親緣關(guān)系近期,將菌種MCDA02評定為Microbacteriumesteraromaticum。現(xiàn)階段還沒見酯香微鏈球菌產(chǎn)幾丁質(zhì)脫乙酰酶的報(bào)導(dǎo)。
3、發(fā)醇培養(yǎng)液成份對菌種MCDA02發(fā)醇產(chǎn)CDA的危害
(1)發(fā)醇培養(yǎng)液氮源對菌種MCDA02產(chǎn)酶的危害
氮源對菌種MCDA02發(fā)醇產(chǎn)酶的干擾如圖4,選定的8種不一樣的氮源中,木薯淀粉為氮源時(shí)該菌種產(chǎn)酶最大,次之為乳清蛋白,其相對性酶活也做到了70%之上,玉米粉相對性酶活最少僅有10%。因而最后采用木薯淀粉做為發(fā)醇培養(yǎng)液的氮源。
(2)發(fā)醇培養(yǎng)液氮源對菌種MCDA02發(fā)醇產(chǎn)CDA的危害
氮源對菌種MCDA02生長發(fā)育的危害如圖所示5,選定的11種不一樣的氮源中,加上蛋白胨時(shí)該菌種產(chǎn)酶最大,次之為玉米漿,其相對性酶活也做到75%之上,而其他氮源相對性酶活均為做到70%。因而最后采用蛋白胨做為發(fā)醇培養(yǎng)液的氮源。
(3)發(fā)醇培養(yǎng)液碳酸鹽對菌種MCDA02發(fā)醇產(chǎn)CDA的危害
碳酸鹽對菌種MCDA02生長發(fā)育的危害如圖所示6,選定的9種不一樣的碳酸鹽中,加上ZnSO4時(shí)該菌種產(chǎn)酶最大,隨后是KH2PO4,其相對性酶活達(dá)75%之上,加上CuSO4時(shí)相對性酶活最少,不夠25%。因而最后采用ZnSO4為配置發(fā)醇培養(yǎng)液常用碳酸鹽。
4、發(fā)醇前提對菌種MCDA02發(fā)醇產(chǎn)CDA的危害
(1)發(fā)酵時(shí)間對菌種MCDA02發(fā)醇產(chǎn)CDA的危害
發(fā)酵時(shí)間對菌種MCDA02生長發(fā)育的危害如圖所示7,發(fā)酵時(shí)間在36h~48h時(shí),產(chǎn)酶量明顯提升。發(fā)酵時(shí)間處在48h~72h中間時(shí),產(chǎn)酶量增速緩解。發(fā)酵時(shí)間做到72h時(shí)產(chǎn)酶量做到最高處,發(fā)醇72h后菌種MCDA02產(chǎn)酶量逐漸降低。
(2)發(fā)酵溫度對菌種MCDA02發(fā)醇產(chǎn)CDA的危害
發(fā)酵溫度對菌種MCDA02生長發(fā)育的危害如圖所示8,在30℃時(shí)菌種MCDA02產(chǎn)幾丁質(zhì)脫乙酰酶的量最大。溫度高于30℃時(shí),菌種的產(chǎn)酶量快速降低,溫度抵達(dá)40℃時(shí),菌種MCDA02的相對性酶活低至10%上下。
(3)發(fā)醇培養(yǎng)液起止pH對菌種MCDA02發(fā)醇產(chǎn)CDA的危害
發(fā)醇培養(yǎng)液起止pH對菌種MCDA02生長發(fā)育的危害如圖所示9,伴隨著發(fā)醇培養(yǎng)液原始pH的上升,菌種產(chǎn)酶工作能力隨著提高,pH為8.0時(shí),產(chǎn)酶量做到最大。pH再次上升,菌種MCDA02產(chǎn)酶量減少,pH為10.0時(shí),菌種MCDA02相對性酶活低至20%下列。