（4）裝液量對(duì)菌種MCDA02發(fā)醇產(chǎn)CDA的危害裝液量對(duì)菌種MCDA02生長(zhǎng)發(fā)育的危害如圖所示10，裝液量小于20％時(shí)，伴隨著裝水率的提升，菌種的產(chǎn)酶量慢慢上升，當(dāng)裝水率做到20％時(shí)，產(chǎn)酶量做到最大。裝液量再次擴(kuò)大，菌種MCDA02的產(chǎn)酶量減少。
 

（5）接種量對(duì)菌種MCDA02發(fā)醇產(chǎn)CDA的危害接種量對(duì)菌種MCDA02生長(zhǎng)發(fā)育的危害如圖所示11，接種量在0.5％～4％中間時(shí)菌種都能比較好房地產(chǎn)酶，相對(duì)性酶活做到70％之上。接種量為1％時(shí)，菌種相對(duì)性酶活最大。
 

（5）響應(yīng)面提升發(fā)醇標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)

從單要素中選擇氮源、碳酸鹽和發(fā)醇培養(yǎng)液原始pH三個(gè)要素為自變量，應(yīng)用DesignofExperiments開(kāi)展三要素三水準(zhǔn)響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)，總共1七個(gè)實(shí)驗(yàn)點(diǎn)的Box-Behnken響應(yīng)面分析實(shí)驗(yàn)(表2)。實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)與響應(yīng)值結(jié)果，如表3。

應(yīng)用DesignofExperiments開(kāi)展方差分析和多元回歸分析(表3)，線性擬合獲得線性回歸方程如下所示：

Y=-52.244 8.9515*A 279.125*B 10.807*C-30.5*A*B-0.64*A*C-2l*B*C-1.107*A2-817.5*B2-0.577*C2

由表4得知：實(shí)體模型P＜0.01，說(shuō)明該方程式實(shí)體模型極明顯，不一樣解決間的差異極明顯；失擬項(xiàng)P＞0.05，說(shuō)明實(shí)體模型失擬項(xiàng)不明顯l從F值的多少能夠獲得，一次項(xiàng)中各要素對(duì)幾丁質(zhì)脫乙酰酶酶活的危害次序是C＞A＞B，互動(dòng)相對(duì)性酶活危害的層次次序?yàn)锳C＞AB＞BC。實(shí)體模型的R2為0.9512，表明該實(shí)體模型能表述95.12％響應(yīng)值的轉(zhuǎn)變，因此該實(shí)體模型擬合程度優(yōu)良，試驗(yàn)誤差小，能夠用以預(yù)測(cè)分析最佳發(fā)醇標(biāo)準(zhǔn)主要參數(shù)。結(jié)果顯示，最好發(fā)醇標(biāo)準(zhǔn)為：木薯淀粉1.09％、ZnS0₄0.05％、pH7.86，預(yù)估酶活2.01U／mL。聯(lián)系實(shí)際，大家將發(fā)醇標(biāo)準(zhǔn)調(diào)節(jié)為木薯淀粉1.1％、ZnSO₄0.05％、pH7.9。歷經(jīng)中后期認(rèn)證測(cè)出酶活2.06U／mL。與預(yù)估基本上合乎。比提升以前增強(qiáng)了1.41倍。提升后菌種MCDA02發(fā)醇產(chǎn)CDA水準(zhǔn)為2.06U／mL，小于一部分報(bào)導(dǎo)的病菌發(fā)醇幾丁質(zhì)脫乙酰酶的發(fā)醇水準(zhǔn)。

三、結(jié)果

從高公島收集的海泥中，挑選得到了3株產(chǎn)幾丁質(zhì)脫乙酰酶菌種，菌種MCDA02發(fā)醇產(chǎn)酶水準(zhǔn)最大。根據(jù)組織學(xué)特點(diǎn)、生理學(xué)生物化學(xué)特點(diǎn)及16SrDNA剖析將菌種MCDA02評(píng)定為Microbacteriumesteraromaticum。提升得到了菌種MCDA02的較佳發(fā)醇標(biāo)準(zhǔn)，提升后酶活為2.01U／mL，較提升前酶活1.43U／mL，提升 了1.41倍。