2、蛋白酶響應(yīng)面可靠性設(shè)計(jì)

（1）響應(yīng)面設(shè)計(jì)方案及結(jié)果

響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表4，選用Des遠(yuǎn)nExpert8.0.6手機(jī)軟件對(duì)表4中數(shù)據(jù)開(kāi)展標(biāo)準(zhǔn)差、顯著性分析，結(jié)果見(jiàn)表5。

以酶解時(shí)間、pH、溫度、加酶量為回應(yīng)自變量，α-胃蛋白酶活力抑制率為響應(yīng)值，根據(jù)響應(yīng)面線性回歸方程剖析得知，黎麥活性多肽液具備α-胃蛋白酶活力抑制率的多元化二次線性擬合線性回歸方程為：

Y=44.09 2.53A一1.87B 4.39C 4.47D 1.86AB 1.61AC 7.67AD 9.20BC 1.90BD一4.19CD一9.11A²—12.84B²—1.78C²—9.79D²。

19CD一9.11A2—12.8482—1.78C2—9.79D2。

由表5得知，實(shí)體模型的P＜0.0001，表明實(shí)體模型重歸差別極明顯，失擬項(xiàng)P=0.8453＞0.05，不明顯，表明擬合程度優(yōu)良，能真正反應(yīng)具體情況，實(shí)體模型靠譜；實(shí)體模型重歸決定系數(shù)R²=0.9728＞0.9，表明α-胃蛋白酶活力抑制率結(jié)果與方程式預(yù)測(cè)分析結(jié)果具備一致性，實(shí)體模型相關(guān)性好。實(shí)驗(yàn)實(shí)體模型校準(zhǔn)指數(shù)R_Adj²=0.9457，說(shuō)明實(shí)體模型線性擬合程度高。表明有94.57％實(shí)驗(yàn)結(jié)果值可以用此實(shí)體模型來(lái)表述，因而結(jié)果靠譜，實(shí)體模型能夠?qū)?alpha;-胃蛋白酶活力抑制率值實(shí)現(xiàn)剖析和預(yù)測(cè)分析。由重歸表達(dá)式中一次項(xiàng)系數(shù)得知，各要素對(duì)α-胃蛋白酶活力抑制率功效尺寸次序?yàn)?；加酶?D)＞溫度(C)＞酶解時(shí)問(wèn)(A)＞pH(B)。

（2）響應(yīng)面分析與標(biāo)準(zhǔn)提升

響應(yīng)面曲線圖剖析，各要素問(wèn)等高線圖和配對(duì)t檢驗(yàn)見(jiàn)圖6。

由圖6得知，pH與時(shí)間、溫度與pH、加酶量與溫度配對(duì)t檢驗(yàn)的顯著性差異與表5中交互項(xiàng)P值的解析結(jié)果一致。a，c，e均呈橢圓型，說(shuō)明要素問(wèn)配對(duì)t檢驗(yàn)明顯，等值線的形態(tài)能夠分辨配對(duì)t檢驗(yàn)的高低，3組等高線圖里加酶量與溫度配對(duì)t檢驗(yàn)最好是，等值線中的曲線圖緊緊圍繞著響應(yīng)面在中國(guó)問(wèn)處產(chǎn)生端點(diǎn)，即抑制率最高值。a，c，e響應(yīng)面圖張口都朝下，伴隨著每一個(gè)要素值的提高而響應(yīng)值擴(kuò)大，在做到響應(yīng)值最高處后，伴隨著要素值的增加而響應(yīng)值減少，響應(yīng)面的端點(diǎn)即是較大響應(yīng)值。

經(jīng)DesignExpert8.0.6手機(jī)軟件剖析獲得提升標(biāo)準(zhǔn)為：酶解時(shí)間2.22h、pH8.95、溫度60℃、加酶量0.53×10⁴U／g，在這里前提下，曠胃蛋白酶活力抑制率的基礎(chǔ)理論最高值為47.82％，選用這一結(jié)果并聯(lián)系實(shí)際標(biāo)準(zhǔn)，將酶解標(biāo)準(zhǔn)改成：酶解時(shí)間2h、pH9.0、溫度60℃、加酶量0.5×10⁴U／g，獲得的檢驗(yàn)結(jié)果顯示為45.54％，與基礎(chǔ)理論估計(jì)值基本一致，創(chuàng)建的建模能夠比較好地體現(xiàn)黎麥活性多肽液具備抑止α-胃蛋白酶活力的工作能力，與此同時(shí)活性多肽得率為63.54％。

三、結(jié)果

以黎麥蛋白質(zhì)為實(shí)驗(yàn)原材料，科學(xué)研究酶解后的活性多肽對(duì)α-胃蛋白酶活力的抑制率，挑選出最可用酶。在單要素酶解情況下，挑選酶解時(shí)間、pH、溫度、加酶量開(kāi)展Box-Behnken試驗(yàn)設(shè)計(jì)，提升數(shù)據(jù)顯示：加酶量和酶解溫度對(duì)α-胃蛋白酶活力的抑制效果比pH和酶解時(shí)間要好。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：制取黎麥活性多肽的較佳獲取加工工藝為：酶解時(shí)問(wèn)2h、pH9、溫度60℃、加酶量0.5×10⁴U／g，在這里前提下α-胃蛋白酶活力抑制率為45.54％。為了更好地提升活性多肽液對(duì)α-胃蛋白酶的活力抑制效果，還需對(duì)酶解活性多肽液開(kāi)展進(jìn)一步的提純解決。