在50mL離心管架中添加5.4g硫酸銨(硫酸銨的物質(zhì)的量為18%),4.2g黑色素粗提液,各自添加9.0g、10.5g、12.0g、13.5g、15.0gPEG源液,調(diào)整管理體系pH為5,雙水相提純后的可選擇性指數(shù)和原花青素與糖原殘渣的擴散系數(shù)結(jié)果如圖2所顯示。
由圖2得知,伴隨著PEG質(zhì)量濃度的提升,原花青素與糖原殘渣的擴散系數(shù)都呈下滑的發(fā)展趨勢,原花青素的減少力度更高一些,可選擇性指數(shù)k存有先降低后升高再降低的發(fā)展趨勢,在PEG質(zhì)量濃度為16%做到最大。
在50mL離心管架中添加5.4g硫酸銨,12.0gPEG6000源液(PEG質(zhì)量濃度為16%),4.2g黑色素粗提液,各自調(diào)整管理體系pH為1、2、3、4、5,雙水相提純結(jié)果如圖所示3所顯示。
如圖所示3得知,伴隨著pH的擴大,可選擇性指數(shù)先上升后減少,在pH為3時到達最大,緣故有可能是由于卷心菜黑色素歸屬于矢車菊類黑色素,在pH為3時黑色素大多數(shù)呈分子結(jié)構(gòu)的狀態(tài)存有,更加容易被提純到上看中,因而促使測出的K花較大。
在50mL離心管架中添加5.4g硫酸銨,12.0gPEG6000源液(PEG質(zhì)量濃度為16%),調(diào)整管理體系pH為3,各自添加1.8g、2.4g、3.0g、3.6g、4.2g黑色素粗提液,雙水相提純結(jié)果如圖4所顯示。
如圖4得知,伴隨著料液添加量的增加,可選擇性指數(shù)展現(xiàn)先上升后降低的發(fā)展趨勢,在料液添加量為12%時,可選擇性指數(shù)做到最大。當料液添加量超出12%時,下非常中原花青素的成分逐漸升高,造成 K花逐漸降低,可選擇性指數(shù)k逐漸出現(xiàn)下降趨勢。
從以上能夠看得出,硫酸銨的增加量仍然是越大,可選擇性指數(shù)越高,但試驗全過程不適合再提高了,緣故是一方面過高的硫酸銨濃度值非常容易在下相進行析出結(jié)晶體,另一方面提升了產(chǎn)品成本與在上相黑色素中的含量,因而確認為20%。四個要素的危害順序為:粗提液的使用量>pH>硫酸銨的使用量>PEG的使用量,綜合性單一要素試驗,最好試驗標準:粗提液的物質(zhì)的量為12%,硫酸銨質(zhì)量濃度為20%,pH為3.5,PEG的質(zhì)質(zhì)量濃度為15%,原花青素的可選擇性指數(shù)為750.26。
選用PEG/硫酸銨雙水相管理體系提純提純卷心菜中原花青素。正交試驗最好的提純標準為:粗提液的物質(zhì)的量為12%,硫酸銨質(zhì)量濃度為20%,pH為3.5,PEG的物質(zhì)的量為15%,原花青素的可選擇性指數(shù)為750.26。盡管應用PEG6000/硫酸銨雙水相管理體系對卷心菜黑色素有有效的可選擇性,可以完成卷心菜黑色素與其說糖原成分的分離出來,而且原花青素的擴散系數(shù)K花對可選擇性指數(shù)的危害的程度遠高于含糖量的擴散系數(shù)K糖,但事后怎樣完成高聚物和原花青素的分離出來仍是公司生產(chǎn)制造所面對的難點。