目地選用HPLC測定方法不一樣原產(chǎn)地和不一樣生長發(fā)育年代北蒼術(shù)[Atractylodeschinensis(DC.)Koidz.]中赤芍素的成分。方式搜集不一樣來源的北蒼術(shù)試品,以工業(yè)甲醇為有機(jī)溶劑,選用超聲波獲取法獲取,選用HPLC測定方法赤芍素的成分,采用DiamonsilC18(250mm×4.6mm,5μL)離子交換柱,流動性相為工業(yè)甲醇-水(79∶21),檢驗(yàn)光波長為340nm,流動速度1mL/min,柱溫25℃,進(jìn)樣量20μL。結(jié)果赤芍素的線形范疇為0.1875~0.6000mg/mL,方式精度、可重復(fù)性、可靠性優(yōu)良;加樣利用率為95.4%。不一樣原產(chǎn)地北蒼術(shù)中赤芍素的成分為0.3232%~0.5959%,阿榮旗產(chǎn)北蒼術(shù)中藥飲片中赤芍素成分最大。3年生、4年生、5年生蒼術(shù)中赤芍素的成分各自為:(0.3500±0.0048)%、(0.4550±0.0030)%、(0.3350±0.0118)%。結(jié)果本方式簡單、迅速、精確,適用北蒼術(shù)中赤芍素的含水量測量。
2015年版《中國藥典》要求,赤芍的主要來源有2種,分別是茅蒼術(shù)(Atractylodeslancea(Thunb.)DC)和北蒼術(shù)(Atractylodeschinensis(DC.)Koidz.)。茅蒼術(shù)關(guān)鍵產(chǎn)自江蘇省、湖北省、河南省等??;北蒼術(shù)關(guān)鍵產(chǎn)于內(nèi)蒙古、山西省、黑龍江省、吉林省等省。研究表明赤芍的關(guān)鍵成分為高壓聚乙烯炔和倍半萜類物質(zhì),具備防癌、抗菌、抗病毒治療等藥用價值,臨床醫(yī)學(xué)上常見于病毒性感染疾病的治療。北蒼術(shù)的原綠色植物遍布范圍普遍,全國各地環(huán)境要素各有不同,危害赤芍中草藥的品質(zhì)。本科學(xué)研究創(chuàng)建了HPLC法,測量不一樣來源于北蒼術(shù)中赤芍素的成分,現(xiàn)報導(dǎo)如下所示。
1儀器設(shè)備與試藥
1.1儀器設(shè)備
Waters2695型液相色譜(沃特世高新科技有限責(zé)任公司),MDF-492型超低溫冰箱(日本三洋公司),DFT200C型快速多用途破碎機(jī)(永康市敏業(yè)物資貿(mào)易有限責(zé)任公司),CPX3800H-C型超聲波清洗機(jī)(日本BRAN-SONIC企業(yè)),DHG-9240A型控溫鼓風(fēng)干燥箱(常州市國旺儀器設(shè)備生產(chǎn)制造有限責(zé)任公司),PALL水提純系統(tǒng)軟件(英國PallCorporation企業(yè)),ML203T/02型十萬級電子分析天平(法國梅特勒-托利多儀器設(shè)備有限責(zé)任公司),MDF-492型超低溫冰箱(日本三洋公司)。
1.2實(shí)驗(yàn)試劑
工業(yè)甲醇(色譜純,德國默克企業(yè),生產(chǎn)批號:603-001-00-x),95%酒精(天津市福晨化學(xué)藥品廠,生產(chǎn)批號:20171110),乙醚(沸程60~90℃,天津市福晨化學(xué)藥品廠,生產(chǎn)批號:20171201),赤芍素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(我國食品藥品安全檢驗(yàn)研究所,生產(chǎn)批號:111924-201806)。
1.3中藥材
市面上中藥飲片的原產(chǎn)地各自來源于內(nèi)蒙古阿榮旗、赤峰市、莫力達(dá)瓦達(dá)斡爾族自治旗(通稱“莫旗”)、扎蘭屯;3年生、4年生、5年生種植北蒼術(shù)地下莖均采自于蒙古族自治州莫力達(dá)瓦旗多熱博熱其勒村(通稱“多熱”),先后標(biāo)識為1~7號。經(jīng)齊齊哈爾市醫(yī)科院藥學(xué)院王曉麗副教授職稱評定為北蒼術(shù)[Atractylodeschinensis(DC.)Koidz.]的地下莖。
2方式與結(jié)果
2.1水溶液制取方式
2.1.1標(biāo)準(zhǔn)品水溶液
稱量赤芍素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)適當(dāng),工業(yè)甲醇融解,超聲波10min,制取20μg/mL的水溶液,經(jīng)0.45μm的微孔濾膜濾過,預(yù)留。
2.1.2供試品水溶液
取“1.3”項下不一樣來源的北蒼術(shù)中藥飲片,破碎后過三號篩,各自稱量0.2g,放置具塞錐形瓶中,添加工業(yè)甲醇50mL,用封口膜密封性后,稱取凈重,超聲波獲?。ㄝ敵龉β?50W,頻率40KHz)1h,制冷至常溫后,稱取凈重,用工業(yè)甲醇補(bǔ)充缺少的凈重,用0.45μm過慮活性炭過濾,取續(xù)滲瀝液,預(yù)留。
2.2色譜儀標(biāo)準(zhǔn)
DiamonsilC18離子交換柱(4.6mm×250mm,5μL),流動性相工業(yè)甲醇-水(79∶21)等度過柱,流動速度1.0mL/min,檢驗(yàn)光波長340nm,進(jìn)樣量20μL。
2.3方法學(xué)調(diào)查
2.3.1線性相關(guān)調(diào)查
高精密稱量標(biāo)準(zhǔn)品60mg,工業(yè)甲醇滴定劑至10mL,攪拌,移取1mL至10mL容量瓶中,用工業(yè)甲醇滴定劑至標(biāo)尺,標(biāo)識為1號。從2號中汲取5mL水溶液,用工業(yè)甲醇滴定劑至標(biāo)尺,標(biāo)識為2號。依此類推,得3、4、5、六號水溶液。按“2.1”項色譜儀標(biāo)準(zhǔn)下開展測量。以峰總面積為縱軸(Y),標(biāo)準(zhǔn)品濃度值為橫坐標(biāo)軸(X)開展回歸分析,得線性回歸方程為Y=2715.1X-9.6694(r=0.9998),標(biāo)準(zhǔn)品濃度值在0.01875~0.6000mg/mL范疇內(nèi)線性相關(guān)優(yōu)良。
2.3.2精度實(shí)驗(yàn)
汲取“2.1.2”項下供試品水溶液20μL,按“2.2”項色譜儀標(biāo)準(zhǔn),持續(xù)氣相6次,測量峰總面積,經(jīng)測算RSD為0.49%,說明儀器設(shè)備精度優(yōu)良。
2.3.3可重復(fù)性實(shí)驗(yàn)
汲取“2.1.1”項下對比水溶液20μL,按“2.2”項下色譜儀標(biāo)準(zhǔn),持續(xù)氣相6次,測量赤芍素峰總面積,經(jīng)測算RSD為1.79%,說明方式可重復(fù)性優(yōu)良。
2.3.4可靠性實(shí)驗(yàn)
汲取“2.1.1”項下供試品水溶液20μL,按“2.2”項下色譜儀標(biāo)準(zhǔn),各自在0、2、4、6、8、10h時氣相,測量赤芍素峰總面積RSD為1.74%,說明供試品水溶液在10h內(nèi)可靠性優(yōu)良。
2.3.5加樣利用率實(shí)驗(yàn)
稱量11號粉末狀0.1000g,共6份,各自添加“2.1.1”項下對比水溶液5mL,放置50mL錐形瓶中,用工業(yè)甲醇滴定劑至標(biāo)尺,超聲波獲取1h后過0.45μm微孔濾膜,取續(xù)滲瀝液,按“2.2”項下色譜儀標(biāo)準(zhǔn)測量,測算利用率為95.4%,見表1。
各自稱量1~花了7天時間赤芍試品0.2g,每一份中藥材制取3份平行面樣,按“2.1.2”項下方式制取供試品水溶液,按“22..22”項色譜儀標(biāo)準(zhǔn)測量,結(jié)果不一樣產(chǎn)區(qū)的赤芍中赤芍素的成分為0.3200%~0.5599%,阿榮旗中藥飲片中赤芍素成分最大。三年生、四年生、5年生蒼術(shù)中赤芍素的成分各自為:(0.3500±0.0048)%、(0.4550±0.0030)%、(0.3350±0.0118)%,見表2。
3探討
成分測量數(shù)據(jù)顯示,四年生人力種植北蒼術(shù)的赤芍素比三年生和5年生的成分高,以指標(biāo)值成份的成分為根據(jù),本試驗(yàn)結(jié)果顯示北蒼術(shù)的最好種植時間為四年,與市面上中藥飲片對比,內(nèi)蒙古自治區(qū)莫旗的人力仿天然的栽種赤芍中赤芍素的成分符合規(guī)定。赤芍中揮發(fā)物化學(xué)成分是關(guān)鍵活力成份,為獨(dú)特的次生新陳代謝物質(zhì),其成分受基因遺傳、個體發(fā)育和環(huán)境破壞的危害。內(nèi)蒙古為暖溫帶大陸性氣候,阿榮旗、莫旗、扎蘭屯及多熱位于內(nèi)蒙古自治區(qū)東部地區(qū),坐落于大興安嶺地區(qū)東麓中區(qū),氣侯展現(xiàn)出春溫、夏升、秋降、三九嚴(yán)寒的特性,強(qiáng)烈的溫度差有益于地區(qū)內(nèi)北蒼術(shù)身體化學(xué)物質(zhì)累積。本方式簡單、迅速、精確,適用北蒼術(shù)中赤芍素的含水量測量。