7、生理學(xué)生物化學(xué)評定試驗結(jié)果
對菌種PC-3開展生理學(xué)生化實驗評定,結(jié)果見表1,將評定結(jié)論與《伯杰氏細菌鑒定手冊》和《乳酸細菌分類鑒定及實驗方法》中對乳酸桿菌的生理學(xué)生化實驗評定結(jié)果相比比,可基本評定所分開的菌種PC-3為乳酸桿菌屬。
8、生物學(xué)評定試驗結(jié)果
菌種PC-3的16SrRNA基因擴增電泳原理結(jié)果如圖所示9所顯示,由此可見非特異亮帶發(fā)生在約1500bp處,說明總體目標精彩片段已取得成功增加。經(jīng)上海生工生物技術(shù)有限責(zé)任公司轉(zhuǎn)錄組測序得到菌種PC-3的16SrRNA基因序列,基因序列尺寸為1481bp,與電泳原理結(jié)果相一致。登陸NCBI網(wǎng)址,將DNA測序結(jié)果開展BLAST序列比對,手機軟件MEGAX搭建菌苗系統(tǒng)發(fā)育樹,如圖所示10所示,菌種PC-3與基因序列的親緣關(guān)系近期,開放閱讀框做到99%。融合菌種PC-3菌體組織學(xué)特點、革蘭氏染色鏡檢查結(jié)果和生理學(xué)生物化學(xué)評定試驗效果剖析,將菌種PC-3評定為乳酸菌,并定名為L.plantarumPC-3。
三、結(jié)果
酸菜是始于中國的傳統(tǒng)式發(fā)酵食品的傳統(tǒng)意味著,以其特有的口味、脆爽的口味、豐富多彩的食用價值和養(yǎng)生作用,擁有巨大的服用人群。有別于在我國北方地區(qū)的酸菜大多數(shù)以朝天椒、籮卜和白菜為關(guān)鍵原材料,安徽省當(dāng)?shù)厮岵耸且灾鳟a(chǎn)區(qū)在長江中下游的介菜為關(guān)鍵原料而制作的一種口味與眾不同的發(fā)醇蔬菜水果食品類。全永亮以山東煙臺家中自制泡菜為研究對象,挑選分離出來出一株乳酸菌;潘晴等以四川老壇酸菜為研究對象,挑選分離出來出乳酸菌、短乳酸桿菌、腸膜明手工穿珠菌、干酪乳桿菌、屎腸球菌等,在其中以乳酸菌總數(shù)數(shù)最多。趙丹等以東北地區(qū)當(dāng)然泡菜為研究對象,挑選分離出來出一株增產(chǎn)病菌素的乳酸菌。
本試驗選用牛津杯兩層瓊脂粉平板電腦蔓延法,從安徽省當(dāng)?shù)厮岵酥刑暨x出有最強抗菌實際效果的菌種PC-3,根據(jù)生理學(xué)生化實驗和生物學(xué)實驗方法評定為L.plantarum。將L.plantarumPC-3生產(chǎn)抗菌化學(xué)物質(zhì)經(jīng)清除有機物和雙氧水影響后,對大腸埃希菌和金黃鏈球菌仍具備極強的抑制效果,且歷經(jīng)蛋白酶、胃蛋白酶和胰蛋白酶K水解反應(yīng)試驗解決后,殺菌作用均有顯著降低,表明該抗菌化學(xué)物質(zhì)為蛋白質(zhì)類化合物,基本覺得屬細菌素類。
本試驗挑選分離出來出的安徽省酸菜中乳酸菌飲料與以上參考文獻報導(dǎo)中分離出來的菌苗一致,均有乳酸菌。融合L.plantarumPC-3生長曲線圖和產(chǎn)酸曲線圖測量試驗結(jié)果,L.plantarumPC-3具備極強的產(chǎn)酸工作能力,但其生長發(fā)育延滯期相比較長,很有可能在酸菜發(fā)醇后半期,乳酸菌才慢慢變成優(yōu)點有益菌,此外,安徽省臨江河段地域冬天自然環(huán)境氣侯比較冰冷、濕冷,乳酸菌具備極強的抵擋欠佳自然環(huán)境工作能力。
近些年,乳酸菌飲料酸菜的科學(xué)研究漸成世界各國科研的網(wǎng)絡(luò)熱點,產(chǎn)病菌素的乳酸菌飲料因為病菌素抗菌、翠綠色、安全性等特性,能夠制造各種發(fā)酵食品,可增強和確保食物的產(chǎn)品質(zhì)量和安全系數(shù),加快推動食品類新型工業(yè)化過程。乳酸菌是一類認可為可靠的乳酸菌飲料,中國衛(wèi)生部明確規(guī)定能夠 增加在食物中。本試驗從安徽省當(dāng)?shù)厮岵酥刑暨x分離出來的L.plantarumPC-3可做為食品類運送和貯存歷程中操縱大腸埃希菌和金黃鏈球菌的拮抗作用中藥制劑考慮菌種,能高效地避免二種菌環(huán)境污染,增加食品保質(zhì)期,針對乳酸菌開發(fā)設(shè)計使用有著一定的啟迪和參考使用價值。