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高效液相色譜-二極管陣列檢測(cè)器同時(shí)測(cè)定糕點(diǎn)中糖精鈉和脫氫乙酸的方法研究(一)

來(lái)源:鄭州天順食品添加劑有限公司 發(fā)布時(shí)間:2021-09-23 10:48:52 關(guān)注: 0 次
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近些年,伴隨著食品行業(yè)的迅速發(fā)展趨勢(shì),食用添加劑在緩解食物的色香味俱全及食物質(zhì)量等領(lǐng)域的功效愈發(fā)突顯?,F(xiàn)階段較常用的食用添加劑有添加劑、甜味素、抗氧劑、添加劑等。為標(biāo)準(zhǔn)食用添加劑的應(yīng)用,確保顧客的產(chǎn)品質(zhì)量安全性,在我國(guó)GB2760-2014《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》對(duì)各種食用添加劑的運(yùn)用標(biāo)準(zhǔn)及相對(duì)應(yīng)限定都進(jìn)行了明文規(guī)定。在其中,糖精鈉做為甜味素,在點(diǎn)心中不能應(yīng)用,但鑒于其糖度高、質(zhì)優(yōu)價(jià)廉,經(jīng)常被非法店家超出范圍用以點(diǎn)心生產(chǎn)過(guò)程;脫氫乙酸做為添加劑,在點(diǎn)心中的應(yīng)用限定為0.59/kg,但超限定應(yīng)用脫氫乙酸的狀況屢有報(bào)導(dǎo)。因而,監(jiān)督機(jī)構(gòu)務(wù)必對(duì)點(diǎn)心中糖精鈉、脫氫乙酸的需求量開(kāi)展嚴(yán)格要求。

在我國(guó)國(guó)家行業(yè)標(biāo)準(zhǔn),GB5009.28及GB5009.12一分別要求了食品類中糖精鈉和脫氫乙酸的檢查方式 ,但二者不可以一起檢驗(yàn)。參考文獻(xiàn)有關(guān)糖精鈉的測(cè)量方法關(guān)鍵有液相色譜儀法和液質(zhì)聯(lián)用法;脫氫乙酸的測(cè)量方法關(guān)鍵有:液相色譜儀法、氣相色譜分析、液質(zhì)聯(lián)用法及氣場(chǎng)法。在其中高效液相法因使用簡(jiǎn)易、不用衍化化、應(yīng)用低成本等優(yōu)勢(shì),仍是當(dāng)前測(cè)量食用添加劑的優(yōu)選方式 。徐淵金等報(bào)導(dǎo)了糖精鈉和脫氫乙酸與此同時(shí)測(cè)量的方式 ,方式應(yīng)用紫外線探測(cè)器判定定量分析,因?yàn)樽贤饩€探測(cè)器只靠保存期判定,沒(méi)法預(yù)防與總體目標(biāo)成分保存期相仿的殘?jiān)煞值挠绊懀瑢?duì)栽培基質(zhì)繁雜的點(diǎn)心試品來(lái)講,通常會(huì)使測(cè)定結(jié)果較高,乃至造成 陽(yáng)性結(jié)果發(fā)生;王健等報(bào)導(dǎo)了HPLC迅速測(cè)量月餅中5種添加物的方式 ,方式選用等度過(guò)柱,脫氫乙酸的色譜儀峰顯著托尾。對(duì)于以上方式存在的不足,文中從色譜儀分離出來(lái)、判定、定量分析等領(lǐng)域?qū)Ω咝б合嗌V色譜法與此同時(shí)檢驗(yàn)點(diǎn)心中糖精鈉和脫氫乙酸干了提升和改善。方式 選用二極管列陣探測(cè)器,在獲得被測(cè)化學(xué)物質(zhì)OD值的與此同時(shí),還能開(kāi)展光譜圖的較為,提升判定的精確性。根據(jù)提升流動(dòng)性相的類型、過(guò)柱梯度方向及離子交換柱,完成糖精鈉和脫氫乙酸的與此同時(shí)測(cè)量,且使脫氫乙酸的托尾狀況獲得抑止,提升 了方式定量分析的精確性。方式的創(chuàng)建,解決了點(diǎn)心中糖精鈉和脫氫乙酸無(wú)法與此同時(shí)測(cè)量的難點(diǎn),減少了剖析時(shí)間,提升 了工作效能,為食品安全監(jiān)管工作人員給予有益的服務(wù)支持。

一、原材料與方式

1、原材料與實(shí)驗(yàn)試劑

工業(yè)甲醇(色譜純,英國(guó)Fisher企業(yè));乙酸銨(分析純,國(guó)藥控股有限責(zé)任公司);氫氧化鈉溶液(分析純,國(guó)藥控股有限責(zé)任公司);磷酸二氫鈉(分析純,國(guó)藥控股有限責(zé)任公司);脫氫乙酸(CAS:520-45-6,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì):純凈度≥99.5%;法國(guó)Dr企業(yè)),二水合糖精鈉(CAS:82385-42-0,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì):1.0mg/mL,純凈度≥99.5%;中國(guó)計(jì)量科學(xué)院)。0.45μm微孔濾膜:有機(jī)化學(xué)系。

2、儀器設(shè)備與機(jī)器設(shè)備

高效率液相色譜:配二極管列陣探測(cè)器(e2695,英國(guó)waters企業(yè));電子分析天平(感量0.1mg,MS204,梅特勒企業(yè));電子分析天平(感量lmg,MS303,梅特勒企業(yè));超聲波清洗器(寧波新芝有限責(zé)任公司企業(yè));離心脫水機(jī)(3-18k,法國(guó)sigma企業(yè));旋渦混合器(英國(guó)IKA企業(yè))。

3、方式與流程

(1)標(biāo)液配置

精確稱量脫氫乙酸標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)100mg(精準(zhǔn)至0.1mg)于100mL容量瓶中,用10mL0.1mol/L氫氧化鈉溶液水溶液融解,并自來(lái)水滴定劑至標(biāo)尺。各自汲取一定容積的脫氫乙酸儲(chǔ)備液及糖精鈉標(biāo)液于100mL容量瓶中,自來(lái)水滴定劑。配置成濃度值先后為0.4μg/mL、1.01μg/mL、10.0μg/mL、20.0μg/mL、50.0μg/mL的混和規(guī)范切削液。

(2)色譜儀標(biāo)準(zhǔn)

離子交換柱:AtlanfisT3(250mm*4.6mm,5μm,英國(guó)waters企業(yè));流動(dòng)性相A為工業(yè)甲醇,B為10mmol/L醋酸銨(冰醋酸調(diào)PH=5.5),過(guò)柱梯度方向?yàn)椋?~5min,16%A,5.1min~15min,28%A,15.1min~20min,80%A,20.1min,16%A,維持10min;柱溫:35℃;氣相容積:10μL;檢驗(yàn)光波長(zhǎng):230nm。

(3)試品解決

稱量試品2g(精準(zhǔn)至0.001g),放置25mL離心管架中,添加約10mL水、0.5mL0.5mol/L氫氧化鈉溶液水溶液,振搖,超聲波10min,取下,再各自添加lmL0.42mol/L磷酸二氫鈉水溶液和1mL0.5mol/L氫氧化鈉溶液水溶液,用勁振搖后,自來(lái)水滴定劑至標(biāo)尺,混勻。靜放分層次,取上清液過(guò)0.45μm有機(jī)濾膜,滲瀝液供高效率液相色譜儀測(cè)量。

二、結(jié)果與探討

1、試品前解決方式提升

點(diǎn)心試品帶有人體脂肪、蛋白質(zhì)、木薯淀粉、糖原等各種成份,栽培基質(zhì)繁雜,對(duì)前解決需要較高。本方式科學(xué)研究了不一樣混凝劑對(duì)總體目標(biāo)剖析物利用率的危害。較為了氫氧化鈉溶液和磷酸二氫鈉沉積管理體系及亞鐵氰化鉀和乙酸鋅沉積管理體系的積累實(shí)際效果。不一樣加標(biāo)水準(zhǔn)的試品經(jīng)二種沉積方法解決后所得的利用率的較為見(jiàn)表1。由表1發(fā)覺(jué),試品經(jīng)氫氧化鈉溶液和磷酸二氫鈉沉積后,二種剖析物的利用率顯著高過(guò)用亞鐵氰化鉀和乙酸鋅沉積的試品。試驗(yàn)還調(diào)查了混凝劑的使用量(0.5mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL)對(duì)目的物利用率的危害?;炷齽┦褂昧啃?,沉積實(shí)際效果較差;使用量大,易造成很多絮狀物沉積,對(duì)目的物造成差異水平的吸咐,使利用率減少(圖1,混凝劑的使用量以磷酸二氫鈉的使用量表明)。綜合性考慮到,挑選lmL0.5mol/L氫氧化鈉溶液和lmL磷酸二氫鈉水溶液為試品混凝劑。

方式還較為了試品獲取時(shí),氫氧化鈉溶液的加盟對(duì)脫氫乙酸利用率的危害。發(fā)覺(jué)試品添加0.5mL氫氧化鈉溶液,能明顯增強(qiáng)脫氫乙酸的獲取利用率,這也是因?yàn)闅溲趸c溶液的添加,使試樣中的脫氫乙酸轉(zhuǎn)換為水溶很強(qiáng)的脫氫乙酸鈉,進(jìn)而擴(kuò)大了總體目標(biāo)物的在水相獲取管理體系中的溶解性,方式的利用率獲得提升。

2、色譜儀標(biāo)準(zhǔn)的提升

(1)離子交換柱的挑選

完成糖精鈉和脫氫乙酸的與此同時(shí)測(cè)量,挑選適宜的離子交換柱尤其重要。試驗(yàn)調(diào)查了SemetryC18,XbrigdeC18及AtalatisT3C18色譜柱的分離出來(lái)實(shí)際效果。結(jié)果發(fā)覺(jué),三種離子交換柱對(duì)糖精鈉和脫氫乙酸都是有不錯(cuò)的保存,可是,SemetryC18及XbrigdeC18色譜柱,糖精鈉和脫氫乙酸的保存期十分貼近,僅借助更改流動(dòng)性看中工業(yè)甲醇的占比難以達(dá)到二者的基準(zhǔn)線分離出來(lái),且脫氫乙酸托尾比較嚴(yán)重,比較嚴(yán)重危害定量分析的精確性。選用AtalatisT3C18色譜柱,能非常好解決了脫氫乙酸的托尾難題,與一般C18色譜柱對(duì)比,峰形獲得了很大地改進(jìn)。

(2)流動(dòng)性相提升

脫氫乙酸的電離常數(shù)為4.1,根據(jù)調(diào)整pH,使脫氫乙酸以單一分子結(jié)構(gòu)方式或徹底正離子方式存有,峰形對(duì)稱性,而糖精鈉的保存不會(huì)受到流動(dòng)性相pH的危害。根據(jù)提升,挑選醋酸銨流動(dòng)性相的pH為5.5。根據(jù)提升流動(dòng)性相梯度方向,使糖精鈉和脫氫乙酸的保存期適度,與殘?jiān)浅:玫姆蛛x出來(lái)。在提升的流動(dòng)性相標(biāo)準(zhǔn)下,糖精鈉、脫氫乙酸混和標(biāo)液色譜(5μg/mL)見(jiàn)圖2。

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