二、結(jié)果與剖析

1、黎麥獲取胰蛋白酶解制取活性多肽結(jié)果

（1）活性多肽成分標(biāo)曲的制作
 

由圖1可獲得線性方程為，y=0.1687x—0.0119，相關(guān)系數(shù)r為R²=0.9946。式中：y為OD值A(chǔ)；x為牛血清蛋白濃度值，mg／mL。

（2）胰蛋白酶的挑選

由表3得知，4種酶酶解后的活性多肽提取率都超出了30％，對α-胃蛋白酶活力具備一定的抑制效果，表明4種酶對黎麥蛋白質(zhì)都有著非常明顯的酶解實際效果，在其中中性蛋白酶和蛋白酶的活性多肽得率超出50％，而堿性蛋白酶和蛋白酶酶解后的抑制率較口味胰蛋白酶和中性蛋白酶高，蛋白酶解水平越大，活性多肽提取率也越高，轉(zhuǎn)化成的低分子結(jié)構(gòu)肽段就越大，具備抑止活力的肽段非常容易被溶解造成 抑止活力減少。充分考慮二種要素，挑選蛋白酶開展下一步的酶解實驗。

（3）蛋白酶單要素酶解標(biāo)準(zhǔn)科學(xué)研究

酶解時間、酶解溫度、pH、加酶量對α-胃蛋白酶活力抑制率和活性多肽得率功效實際效果見圖2～圖5。
 

①酶解時間對酶解實際效果的危害

由圖2得知，伴隨著酶解時間的增加，活性多肽得率慢慢上升，這表明在蛋白液濃度值一定的標(biāo)準(zhǔn)下，酶解時間的增加使酶與蛋白的功效的時間越充足，蛋白被溶解的水平大，轉(zhuǎn)化成小分子水精彩片段的短肽越多，進(jìn)而其活性多肽成分逐步上升。在1～3h中間酶解速度慢慢提升，在酶解前期，蛋白液中殘存的含糖量、生物大分子蛋白質(zhì)會沉積在量杯底端，伴隨著酶與底端生物大分子蛋白質(zhì)充足觸碰，酶解速度快速提升。α-胃蛋白酶活力抑制率發(fā)生先上升后下降的發(fā)展趨勢，在酶解時間為2h時，α-胃蛋白酶活力抑制率做到最高值27．1％，伴隨著酶解的連續(xù)開展，以前酶解獲得的α-胃蛋白酶抑止肽被酶解得更小分子水的肽段，進(jìn)而活力抑制率減少?？紤]到二種酶解實驗結(jié)果，挑選酶解時問2h為最好。

②pH對酶解實際效果的危害

pH的更改干擾了酶的適宜反映標(biāo)準(zhǔn)，易使酶降解和溶解，從而導(dǎo)致酶解反映的中斷。由圖3得知，活性多肽提取率和α-胃蛋白酶活力抑制率都出現(xiàn)了先上升后降低的發(fā)展趨勢，在pH8．0時活性多肽提取率和α-胃蛋白酶活力抑制率都超過最大值，以后曠胃蛋白酶抑制率快速減少，活性多肽得率趨向輕緩并略微減少，因為偏酸過堿的條件會使酶的活性位置遭受損壞或離解，pH對酶解實際效果尤為重要。因而，選中蛋白酶的酶解pH為8.0開展酶解。
 

③酶解溫度對酶解實際效果的危害

由圖4得知，活性多肽得率展現(xiàn)不斷上升發(fā)展趨勢，因為溫度的上升擴大了酶與蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)的觸碰機遇，酶的活性也隨著提高，活性多肽得率慢慢上升，α-胃蛋白酶活力抑制率也隨著上升，在50℃做到最高值26.8％，接著發(fā)生減少，溫度超出60℃很有可能會立即使小分子活性肽進(jìn)一步離解，缺失抑止活力，進(jìn)而使α-胃蛋白酶活力抑制率降低。因而，挑選酶解溫度在50℃上下。
 

④加酶量對酶解實際效果的危害

由圖5得知，伴隨著加酶量的提升，活性多肽得率逐步升高，α-胃蛋白酶活力抑止首先升高后降低，擴大加酶量促使酶與底物蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)充足觸碰，一些沉積在底邊的生物大分子蛋白質(zhì)也伴隨著被水解反應(yīng)，而隨著加酶量進(jìn)一步提升，一些具備α-胃蛋白酶活力抑止的肽段也隨著被溶解為更小分子結(jié)構(gòu)的短肽，曠胃蛋白酶活力抑制率發(fā)生減少。當(dāng)加酶量在0.5×10⁴U／g時，α-胃蛋白酶活力抑止做到最高值45.1％。因而，挑選加酶量在0.5×10⁴U／79較為適合。