（4）黑豆活性多肽抗氧化與酶解時(shí)間的關(guān)聯(lián)

根據(jù)單要素試驗(yàn)的結(jié)果，能夠挑選出各要素的三個(gè)水準(zhǔn)。因此在這個(gè)基礎(chǔ)以上，運(yùn)用數(shù)據(jù)分析手機(jī)軟件創(chuàng)建4要素3水準(zhǔn)的Box—Behnken實(shí)體模型，開(kāi)展回復(fù)面可靠性設(shè)計(jì)試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)開(kāi)展試驗(yàn)，更改酶解時(shí)間結(jié)果見(jiàn)4所顯示。

由圖4得知，當(dāng)反應(yīng)速度不超過(guò)2h，DPPH清除率與氣溫正相關(guān)，當(dāng)響應(yīng)時(shí)間超出2h，DPPH清除率與溫度反比，在2h時(shí)DPPH清除率做到最高值。當(dāng)水解反應(yīng)的時(shí)間段過(guò)短時(shí)間，黑豆蛋白質(zhì)生物大分子沒(méi)有水解反應(yīng)成具備小分子水生物活性的生物活性肽，因此水解反應(yīng)物DPPH的清除率較小。而水解反應(yīng)的時(shí)間段太長(zhǎng)則會(huì)造成生物大分子蛋白過(guò)多水解反應(yīng)成碳水化合物或是是不再具有生物活性短肽鏈的化學(xué)物質(zhì)。

2、應(yīng)面試驗(yàn)結(jié)果

（1）線性回歸方程實(shí)體模型方差分析

單要素試驗(yàn)探討了各種要素對(duì)黑豆活性多肽抗氧化的危害，為了更好地全方位調(diào)查影響因素，仍需明確酶解時(shí)間、酶解溫度、pH、酶濃度值對(duì)黑豆抗氧化性肽的耐熱性的危害。故選用再次用回應(yīng)法對(duì)黑豆抗氧化性肽獲取的技術(shù)完成提升。以酶解溫度(X₁)、酶解pH(X₂)、酶濃度值(X₃)、酶解時(shí)間(X₄)為變量，DPPH清除率的響應(yīng)面試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2。溫度(X₁)、酶解pH(X₂)與酶濃度值(X₃)、酶解時(shí)間(X₄)為變量，DPPH清除率為回復(fù)值的響應(yīng)面試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2。

依據(jù)響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)以及試驗(yàn)結(jié)果，必須創(chuàng)建線性回歸方程實(shí)體模型，用以分辨各要素兩者之間的配對(duì)t檢驗(yàn)是不是明顯，為用以分析和剖析黑豆活性多肽抗氧化的轉(zhuǎn)變，因此還需分辨其偏差的尺寸。即試驗(yàn)擬合程度與在最好情況下抗氧化的一致水平。黑豆活性多肽抗氧化的線性回歸方程實(shí)體模型的方差分析如表3所顯示。

由表3得知，該回歸分析P＜O.000l，方程式實(shí)體模型做到極明顯，失擬項(xiàng)P=0.1471＞0.05，不明顯，表明實(shí)體模型創(chuàng)建恰當(dāng)。該回歸分析的總決策系R²=0.9568，表明方程式擬合程度不錯(cuò)，試驗(yàn)偏差小，故該線性回歸方程實(shí)體模型創(chuàng)立，可以用此實(shí)體模型對(duì)黑豆活性多肽的抗氧化開(kāi)展解析及預(yù)測(cè)分析。從而實(shí)體模型獲得的此線性回歸方程為：Y=45.24—6.00X₁ 1.47X₂—1.35X₃ 0.36X₄ 1.81X₁X₂—2.60X₁X₃ 1.06X₁X₄ 0.20X₂X₃一0.17X₂X₄ 0.14X₃X₄—4.98X₁²—0.97X₂²—0.70X₃²—0.90X₄²。

（2）回應(yīng)斜面結(jié)果剖析

響應(yīng)面圖可反饋出不同要素對(duì)黑豆活性多肽抗氧化的危害，依據(jù)斜面圖的張口房屋朝向及斜面樣子分辨在試驗(yàn)范疇內(nèi)是不是存有最值、各要素兩者之間的相互影響是不是明顯。

融合表3、圖5及圖6可看得出，危害DPPH氧自由基清除率的順序?yàn)椋簻囟?X₁)＞pH(X₂)＞酶濃度值(X₃)>酶解時(shí)間(X₄)，X₁、X₂、X₃、X_1³項(xiàng)做到互極明顯水準(zhǔn)(P＜0.01)，X_1²、項(xiàng)做到明顯水準(zhǔn)(P＜0.05)。響應(yīng)面的最佳標(biāo)準(zhǔn)：溫度43.47℃，pH為9.19，酶濃度值為6.51％，水解反應(yīng)時(shí)間為2.22h，DPPH氧自由基清除率47.14％。

3、認(rèn)證試驗(yàn)

為了更好地認(rèn)證響應(yīng)面結(jié)果的穩(wěn)定性，依據(jù)響應(yīng)面提升出的最好加工工藝開(kāi)展三次認(rèn)證試驗(yàn)。具體取得的黑豆活性多肽DPPH清除率的平均數(shù)是47.03％，與剖析值相距0.23％。與響應(yīng)面估計(jì)值比較符合，表明響應(yīng)面得到的最佳標(biāo)準(zhǔn)具備可行性分析。

三、結(jié)果

根據(jù)響應(yīng)面提升試驗(yàn)剖析出危害黑豆抗氧化性肽的制取要素，這四個(gè)要素對(duì)黑豆抗氧化性肽獲取的危害水平次序?yàn)椋好附鉁囟龋緋H＞酶濃度值＞酶解時(shí)間。本試驗(yàn)得到的黑豆抗氧化性加工工藝標(biāo)準(zhǔn)為：酶解溫度43.47℃、pH9.19、酶濃度值6.51％、酶解時(shí)間2.22h，在這里加工工藝標(biāo)準(zhǔn)下取得的黑豆抗氧化性肽對(duì)DPPH清除率的平均數(shù)為47.03％，與手機(jī)軟件得出的標(biāo)準(zhǔn)偏差相距0.23％。本研究對(duì)黑豆抗氧化性肽獲取標(biāo)準(zhǔn)完成了提升，且黑豆活性多肽的抗氧化為黑豆活性多肽在抗氧化食品、保健產(chǎn)品等領(lǐng)域的開(kāi)發(fā)設(shè)計(jì)及藥學(xué)科學(xué)研究帶來(lái)了更加高效的根據(jù)。