番茄素普遍出現(xiàn)于自然的完善鮮紅色果子之中,在其中西紅柿、甜瓜、番石榴中成分較高。在身體的一些人體器官,比如:血夜、消化系統(tǒng)和肝部中也存有番茄素。番茄素的化學(xué)結(jié)構(gòu)式為C40H56,含較多的烴基,呈開鏈條式構(gòu)造,因而具備較強的抗氧化??筛鶕?jù)一系列的生理學(xué)生化反應(yīng),具有防范心腦血管疾病、操縱心肌梗塞、提升免疫功能和防衰老等各種至關(guān)重要的生理作用。
因為番茄素是脂溶性植物色素,并且不飽和脂肪開鏈條式構(gòu)造使其具備較弱的可靠性,易空氣氧化水解反應(yīng),產(chǎn)生異構(gòu)化。這在較大水平上限定了番茄素的運用與開發(fā)設(shè)計。脂質(zhì)體具備兩親性,將番茄素包埋在這其中,可有效性的提升番茄素的使用使用價值,比較大層度上激發(fā)其生物活性。提升番茄素的消化吸收可靠性。
現(xiàn)階段制取脂質(zhì)體的辦法具體有酒精引入法、髙壓勻質(zhì)法、塑料薄膜超聲波法等。這種方式因為引入了較多的有機溶液,且操作流程復(fù)雜。造成 所配制的脂質(zhì)體構(gòu)造不穩(wěn)定。超臨界萃取C02法與這種方式對比,具備低碳環(huán)保,實際操作標(biāo)準(zhǔn)柔和,操作流程簡便易行,所制作出的脂質(zhì)體無毒性沒害且構(gòu)造穩(wěn)定性的優(yōu)勢。脂質(zhì)體的秘方構(gòu)成會危害脂質(zhì)體的構(gòu)造,從而危害所述藥品的穩(wěn)定度及在人體內(nèi)的微生物使用率。因而本試驗根據(jù)提升番茄素脂質(zhì)體的秘方構(gòu)成以求提升脂質(zhì)體的可靠性,提升番茄素在人體內(nèi)中的微生物使用率。為番茄素的開發(fā)給予參照根據(jù)。
一、儀器設(shè)備與原材料
1、實驗室儀器
MV-10ASFE超臨界流體提純系統(tǒng)軟件(上海市waters企業(yè)),Alpha2—4LDplus冷凍式干燥機,UV-5200紫外線光度計(上海市元析儀器設(shè)備有限責(zé)任公司),KQ-250DE型數(shù)控機床超聲波清洗設(shè)備(昆山市超聲波儀器設(shè)備有限責(zé)任公司),TGl6-WS臺式離心機,電子器件電子分析天平(上海市越平儀器設(shè)備有限責(zé)任公司)。
2、試驗原材料
C02,純凈度≥99.5%(哈爾濱市卿華化工氣體有限責(zé)任公司),番茄素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),成分≥98%(瑞楚生物技術(shù)有限責(zé)任公司),番茄素(LY)粗提物(市面上),大豆卵磷脂(PC)(天津收復(fù)生物化工研究室),碳水化合物(CH)≥99%(BeijingBiotoppedScience&TechnologyCo.Ltd),磷酸二氫鈉(天津市博迪化工廠股權(quán)有限責(zé)任公司),磷酸氫二鈉(天津天力化學(xué)藥品有限責(zé)任公司),工業(yè)乙醇(天津富宇生物化工有限責(zé)任公司),甲苯,正己烷(天津富宇生物化工有限責(zé)任公司),色譜儀級正己烷(天津科密歐化學(xué)藥品有限責(zé)任公司)。
二、方式與結(jié)果
1、實驗方法
(1)番茄素標(biāo)曲的制作
高精密稱量番茄素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)20mg,向當(dāng)中添加正己烷:酒精(V:V)為2:1的有機溶液充足融解并滴定劑至200mL,制取番茄素規(guī)范貯備液。各自高精密移加入適量貯備液取至10mL容量瓶中,做成濃度值為10、15、20、25、30μg/mL的系列產(chǎn)品標(biāo)液,在474nm處,以番茄素濃度值為橫坐標(biāo)軸,OD值為縱軸,平行測定3次,制作標(biāo)曲,結(jié)果如圖所示1所顯示。獲得線性回歸方程為:Y=16.24x 0.027,R2=0.994(X為番茄素濃度值,Y為水溶液在474nm處的OD值)。說明此濃度值范疇內(nèi),濃度值與OD值有不錯的線性相關(guān)。
(2)超臨界萃取CO2法制取番茄素脂質(zhì)體
稱加入適量番茄素粗提物、大豆卵磷脂、碳水化合物并添加工業(yè)乙醇,超聲波10min,獲得淡黃色乳濁液。將乳濁液添加提純釜中,將聚磷酸鹽緩存融解添加搜集瓶中。設(shè)置各技術(shù)參數(shù)開展制取,待反映完成后,就可以在搜集瓶中獲得番茄素脂質(zhì)體乳濁液。
(3)包裹率測量
向制取好的番茄素脂質(zhì)體乳濁液里將入3mL甲苯:正己烷(V:V)=2:1的有機溶液,3000r/min離心式5min,離心式2次,搜集上清液開展OD值測量,以空缺脂質(zhì)體為對比,在474nm處測量OD值。帶到標(biāo)準(zhǔn)方程中,測算分散的番茄素成分W游。依照以下計算公式包裹率:
式中:W總為總的番茄素的品質(zhì)(g);
W游為分散的番茄素的品質(zhì)(g)。
(4)單要素實驗
當(dāng)超臨界萃取溫度45℃,氣體壓強140Pa,時間30min,帶入劑流速6mL/min時,以脂質(zhì)體包裹率是響應(yīng)值,調(diào)查碳水化合物與大豆卵磷脂質(zhì)量比(g:g)3:20、1:4、7:20、9:20、11:20,聚磷酸鹽緩沖液pH(6.0、6.5、7.0、7.5、8.0),番茄素與大豆卵磷脂質(zhì)量比(g:g)1:100、1:50、3:100、1:25、1:20對番茄素脂質(zhì)體包裹率的危害。
(5)響應(yīng)面法試驗設(shè)計
依據(jù)單要素實驗效果和Box-Benhnken實驗結(jié)構(gòu)設(shè)計,挑選對番茄素脂質(zhì)體危害明顯的秘方構(gòu)成要素開展響應(yīng)面試驗設(shè)計,如表1所顯示。
(6)認證試驗
選用Designexpert8開展相對應(yīng)斜面提升實驗,依據(jù)推算出的最佳脂質(zhì)體秘方構(gòu)成實體模型,開展3次平行面實驗。
2、結(jié)果與剖析
(1)番茄素標(biāo)曲
番茄素標(biāo)曲如圖所示1所顯示,獲得線性回歸方程為:Y=0.0160X 0.027,R2=0.9939(X為番茄素濃度值,Y為OD值)。表明此濃度值范疇內(nèi),濃度值與OD值有不錯的線性相關(guān)。