維生素E做為一種純天然抗氧劑，具備消除身體氧自由基、保持細(xì)胞質(zhì)的詳細(xì)和一切正常作用及其避免脂質(zhì)過(guò)氧化等生理作用，蔬菜水果是人體內(nèi)攝入維生素E的具體來(lái)源于，測(cè)量蔬菜水果中維生素E的成分，針對(duì)點(diǎn)評(píng)它的養(yǎng)分質(zhì)量有著關(guān)鍵實(shí)際意義。

測(cè)量維生素E的辦法具體有酶活性測(cè)定、層析法、熒光法、液相法、高效液相色譜色譜法等，酶活性測(cè)定實(shí)際操作非常簡(jiǎn)單，但精確度較低;高效液相色譜色譜法屏幕分辨率高，但實(shí)際操作繁雜，成本增加，針對(duì)大批試品測(cè)量較為艱難;熒光法非特異強(qiáng)，影響少，靈巧，迅速，簡(jiǎn)單，針對(duì)測(cè)量大批蔬菜水果中的維生素E是一種非常滿(mǎn)意的方式 。但一般熒光光譜法存有萃取劑乙醚對(duì)維生素E有影響，使測(cè)量結(jié)果精確性低的缺陷。本試驗(yàn)研究了選用同歩熒光光譜測(cè)定方法蔬菜水果中維生素E，該方式解決了乙醚的影響，提升 了實(shí)驗(yàn)操作的精確性。

1試驗(yàn)一部分

1,1實(shí)驗(yàn)試劑與儀器設(shè)備

維生素E(Sigma企業(yè)，進(jìn)口散裝)，用時(shí)沒(méi)經(jīng)進(jìn)一步提純，溶解工業(yè)乙醇。別的實(shí)驗(yàn)試劑均為國(guó)內(nèi)分析純，常用水溶液均用二次雙蒸水新鮮配置。

日立F-4500型瑩光光度計(jì)(日本日立企業(yè))。

1,2試品的制取與光譜儀測(cè)量

維生素E選用周松的辦法獲取。汲取一定量的維生素E萃取液于20mL深棕色帶塞試管嬰兒中，添加5.0mL分析純乙醚震蕩1min，靜放分層次后(若有乳化現(xiàn)象，加少量工業(yè)乙醇)，用注射針移去下一層，頂層乙醚各自用純凈水清洗2～3次固定不動(dòng)激起光波長(zhǎng)λex=295nm，在λem=300～500nm掃描儀維生素E一般熒光光譜;固定不動(dòng)Δλ=30nm，λex=200～400nm下，測(cè)量同歩熒光光譜，紀(jì)錄其λex=295nm處的瑩光值。

2結(jié)果與探討

2,1維生素E的激發(fā)光譜和熒光光譜

用含維生素E2.0mg/L的規(guī)范乙醇溶液作校準(zhǔn)光譜儀數(shù)次試驗(yàn)說(shuō)明，維生素E的激發(fā)光譜和光譜分析法均為λex295nm/λem327nm，結(jié)果見(jiàn)圖1和圖2，與項(xiàng)光明、李艷飛等的報(bào)導(dǎo)相符合。

2,2乙醚和維生素E的熒光光譜、同歩熒光光譜

依照實(shí)驗(yàn)方法，掃描儀乙醚和維生素E(10.0mg/L)的熒光光譜和同歩熒光光譜并開(kāi)展較為，結(jié)果發(fā)覺(jué)，有機(jī)溶劑和維生素E在λem=327nm處瑩光光譜分析法互相重合(圖3)。從二者的同歩熒光光譜能夠 看得出，同歩熒光法使2種化學(xué)物質(zhì)各自在λ=250nm和λ=290nm上有較大發(fā)送(Δλ=30nm)，進(jìn)而解決了乙醚對(duì)維生素E測(cè)量的危害(圖4)。

2,3不一樣Δλ對(duì)維生素E同歩熒光光譜的危害

選用同歩熒光法測(cè)量蔬菜水果中的維生素E時(shí)，光譜儀樣子不但與化學(xué)物質(zhì)天性相關(guān)，且與Δλ相關(guān)，Δλ越小，產(chǎn)生的同歩光譜儀峰數(shù)越小、峰形越窄，但Δλ不可以過(guò)小，僅有當(dāng)Δλ與發(fā)送峰、激起峰中間的光波長(zhǎng)相符合時(shí)，才可以造成非常強(qiáng)的瑩光數(shù)據(jù)信號(hào)。2峰的分離出來(lái)狀況一般用分離度R表明，當(dāng)R<1時(shí)，2峰有一部分重合;R≥1時(shí)，表明2峰能顯著分離出來(lái)，達(dá)到剖析規(guī)定;R=1.5時(shí)，表明2峰能徹底分離出來(lái)。

本試驗(yàn)各自測(cè)量了Δλ為10、20、30、40、50nm時(shí)維生素E和溶液的同歩熒光光譜，從圖5和表1能夠 看得出，Δλ為10、20、30nm時(shí)，伴隨著Δλ的提升，同歩瑩光的瑩光抗壓強(qiáng)度逐步提高且三者R>1，綜合圖5和表1，Δλ=30nm時(shí)，維生素E的同歩熒光光譜的瑩光抗壓強(qiáng)度較大，且可以與溶液的熒光光譜分離去，因而在具體測(cè)量中挑選了Δλ為30nm。

         
2,4線(xiàn)形范疇

將維生素E規(guī)范液配置成不一樣濃度值的系列產(chǎn)品水溶液，按以上測(cè)定法開(kāi)展測(cè)量，結(jié)果顯示，其濃度值在0.01～10mg/L內(nèi)與其說(shuō)瑩光抗壓強(qiáng)度成線(xiàn)性相關(guān)(圖6)，線(xiàn)性回歸方程為I=16.173ρ 1.1235，I為瑩光抗壓強(qiáng)度，ρ為濃度值，相關(guān)系數(shù)r=0.9995，方法檢出限為0.0025mg/L。

2,5回收利用試驗(yàn)

取同樣品質(zhì)的油菜子試品，各自添加一定量的維生素E的標(biāo)液，按以上測(cè)定法各自做好解決、測(cè)量，測(cè)算試品中維生素E的利用率(表2)。從表2能夠 看得出，利用率為101.18%～101.58%，均值利用率為101.37%。

2,6具體試品的測(cè)量

用以上的實(shí)驗(yàn)方法測(cè)量具體試品中維生素E的成分，測(cè)量結(jié)果見(jiàn)表3，從表3能夠 看得出，相對(duì)性相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.4%，1.17%，表明試驗(yàn)的可重復(fù)性不錯(cuò)，試驗(yàn)結(jié)果令人滿(mǎn)意。

3總結(jié)

根據(jù)瑩光光譜學(xué)對(duì)青菜中維生素E成分研究表明，以乙醚作萃取劑時(shí)，一般熒光光譜法不能夠清除萃取劑對(duì)維生素E的影響，選用同歩熒光光譜法，當(dāng)Δλ=30nm時(shí)維生素E的瑩光抗壓強(qiáng)度最強(qiáng)，且能清除萃取劑乙醚的影響功效。并且在0.1～10mg/L內(nèi)瑩光抗壓強(qiáng)度和維生素E濃度值呈線(xiàn)性相關(guān)，線(xiàn)性回歸方程為I=16.17ρ 1.1235，相關(guān)系數(shù)r=0.9995，試品的均值利用率為101.37%，具體試品測(cè)量效果的相對(duì)偏差(RSD)<5，0%，該法使用簡(jiǎn)單，迅速，精確性高，可重復(fù)性好，對(duì)大批測(cè)量蔬菜水果中維生素E無(wú)外乎一種理想化的方式 。