通過(guò)分析不同霉菌發(fā)酵液的pH、FFA%和FAA%,根據(jù)圖和表的數(shù)據(jù)分析,卡地青霉pH變化最后趨于平穩(wěn),達(dá)到6.03,F(xiàn)FA%和FAA%在第4天達(dá)到最佳狀態(tài),分別為4.37%和0.430%。由此得出初步結(jié)論:最佳發(fā)酵菌種為卡地青霉。
在液態(tài)奶中接種卡地青霉進(jìn)行培養(yǎng),測(cè)定pH、游離脂肪酸和游離氨基酸,研究霉菌發(fā)酵劑的發(fā)酵時(shí)間,得出結(jié)論如圖4所示。
從圖4及表3中可以看出培養(yǎng)第4天,發(fā)酵奶的pH最低為6.03,且FFA%和FAA%含量均最高分別為4.37%和0.430%。因此卡地青霉發(fā)酵時(shí)間為4d。
對(duì)發(fā)酵液進(jìn)行SDS-PAGE電泳實(shí)驗(yàn),(a)空白組和(b)發(fā)酵液組,得出結(jié)果如下圖所示。
圖5中,(a)空白組是無(wú)霉菌發(fā)酵培養(yǎng)的,(b)發(fā)酵液組是添加霉菌發(fā)酵培養(yǎng)的。從圖5看出(a)空白組液態(tài)奶蛋白分子主要在60~75kDa、25~35kDa和10~15kDa,其中25~35kDa中接近30kDa附近的條帶顏色最深,在此區(qū)間的蛋白含量最多,其他區(qū)間條帶顏色較淺,蛋白含量較少;(b)發(fā)酵液組蛋白分子主要在45~60kDa、25~35kDa和15kDa附近,其中15kDa附近的條帶顏色最深,此區(qū)間的蛋白含量最多,其他區(qū)間條帶較淺,蛋白含量較少。相對(duì)于空白組,發(fā)酵液組沒(méi)有在60~75kDa附近的蛋白,可能是經(jīng)過(guò)霉菌發(fā)酵,使大分子蛋白發(fā)生了降解,由高分子量多肽進(jìn)一步降解形成低分子量多肽,由圖可看出主要是60~75kDa附近和30kDa附近的蛋白發(fā)生了降解,而15kDa附近的蛋白變多,同時(shí)還產(chǎn)生了新的45~60kDa條帶,這為霉菌發(fā)酵產(chǎn)生不同蛋白風(fēng)味提供物質(zhì)基礎(chǔ)。
實(shí)驗(yàn)選用白地霉、婁地青霉和卡地青霉作為發(fā)酵劑菌種,通過(guò)發(fā)酵培養(yǎng)后測(cè)定發(fā)酵液pH、游離脂肪酸(FFA%)和游離氨基酸(FAA%)含量,以此為指標(biāo),通過(guò)比較得出發(fā)酵效果最好的發(fā)酵劑菌種為卡地青霉。在此基礎(chǔ)上對(duì)發(fā)酵培養(yǎng)時(shí)間進(jìn)行研究,以pH、游離脂肪酸(FFA%)和游離氨基酸(FAA%)含量為指標(biāo)確定發(fā)酵培養(yǎng)時(shí)間。在培養(yǎng)溫度為29℃,搖床速度95r/min,得出最佳培養(yǎng)時(shí)間為4d,此時(shí)FFA%和FA%分別為4.37%和0.430%。
霉菌發(fā)酵劑發(fā)酵培養(yǎng)使液態(tài)奶中的蛋白質(zhì)發(fā)生了降解,在發(fā)酵作用下高分子量多肽進(jìn)一步降解形成低分子量多肽,蛋白質(zhì)分子量變小,還有不同分子量的蛋白產(chǎn)生,這為霉菌發(fā)酵液態(tài)奶的進(jìn)一步研究提供依據(jù)。
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