獼猴桃亦稱羊桃、陽桃,獼猴桃科,屬于漿果,落葉木質(zhì)藤本植物果實(shí),維生素 C 含量豐富。食用獼猴桃有降低血中膽固醇濃度、預(yù)防心血管疾病、促消化、降血脂、防治動脈硬化、改善心肌功能、防治心臟病、防癌抑腫瘤、增強(qiáng)體質(zhì)等功能。鐵是人體必需微量元素之一,與人類健康有著密切的關(guān)系。鐵離子血紅蛋白的重要組成成分,也是部分氧化還原反應(yīng)所需酶激活劑。羅瑩[1]以磺基水楊酸與鐵的絡(luò)合物為例,研究了磺基水楊酸和鐵可用于檢測絡(luò)合鐵中鐵離子的濃度。
本實(shí)驗(yàn)采用抗壞血酸為還原劑,鄰二氮菲為顯色劑,用可見法測定汶川縣三江鎮(zhèn)獼猴桃中鐵元素的含量,并進(jìn)一步探還原劑加入量、顯色劑加入量、放置時(shí)間、反應(yīng)溫度等因素對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響,最后繪制出來了汶川獼猴桃標(biāo)準(zhǔn)亞鐵的標(biāo)準(zhǔn)曲線。本方法操作簡便,實(shí)用范圍廣,準(zhǔn)確度高、精密度好,重現(xiàn)性好,回收率高。
1 實(shí)驗(yàn)材料與操作
1.1器材及材料選取
材料:獼猴桃 500 g(汶川縣三江鎮(zhèn)農(nóng)戶):FW-100 高速萬能粉碎機(jī);T6 新世紀(jì)紫外分光光度計(jì);
DHG-9075AD 電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱;DL-1 萬用電熱爐;BSM120.4分析電子天平;SX2-4-10 馬弗爐。
試劑:鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.010 mg/mL):稱取 0.0441 g 鐵粉溶于濃鹽酸 7.0 mL,轉(zhuǎn)移至 1000 mL 容量瓶中,移取 10.0 mL 鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液于 100 mL 容量瓶中,稀釋并定容至刻度線,即可獲得 0.010 /mL 的鐵離子濃度。乙酸—乙酸鈉緩沖溶液:稱取 0.32 g 無水醋酸鈉于燒杯中,加入少許蒸餾水,并加入 5.0 mL 質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 98 %的乙酸,努力攪拌。攪拌均勻后,轉(zhuǎn)移到 100 mL 容量瓶中,稀釋并定容到刻度線,即得。鄰二氮菲溶液(1.5 g/L):準(zhǔn)確稱取0.15 g鄰二氮菲溶于約2 mL無水乙醇中,充分混勻后,移入 100 mL 容量瓶中并定容到刻度線,并避光保存??箟难崛芤?5 g/L):稱取 0.5 g 抗壞血酸溶于一定量的蒸餾水中,轉(zhuǎn)移至 100 mL 容量瓶中并定容到刻度線,即可。
1.2 樣品處理
準(zhǔn)確稱取 1.0000 g 烘干的獼猴樣品于瓷坩鍋中,慢慢用小火在可調(diào)式電爐上炭化至無煙,隨后移入馬弗爐中,用 800 ℃灰化2 h,再冷卻。在可調(diào)式電爐上小火加熱,需要重復(fù)多次確保能消化完全。灰化后放冷,用濃度為 4 mol/L 鹽酸將灰化留下的灰分,然后將該消化液移入 25.0 mL 容量瓶中并定容至刻度,搖勻,待測。
1.3標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制
準(zhǔn)備 6 個(gè) 25 mL 的容量瓶,分別移取 0.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00 mL 的 0.010 mg/mL 鐵的標(biāo)準(zhǔn)溶液,然后再分別依次加入 5.0 mL 乙酸—乙酸鈉緩沖溶液、1.00 mL 抗壞血酸、2.00 mL鄰二氮菲溶液,加完溶液后用蒸餾水稀釋至刻度線,搖勻,大約放置 15 min 后于 510 nm 處測各溶液的吸度,以蒸餾水做參比,濃度溶液做空白對照,扣除空白溶液吸光度后,以吸光度為縱坐標(biāo),鐵濃度為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖,并計(jì)算出該曲線圖的線性回歸方程及相關(guān)系數(shù)。該實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明該曲線線性回歸方程為:Y=78.159X,線性相關(guān)系數(shù) R=0.9999,線性相關(guān)良好。
1.4 樣品測定
準(zhǔn)確移取事先處理好的獼猴桃消化液 5.0 mL,置于 25 mL 容量中,隨后依次加入 1.0 mL 抗壞血酸溶液、5.0 mL 乙酸—乙酸鈉緩沖溶液、2.0 mL 鄰二氮菲溶液,搖勻,加完溶液后用蒸餾水稀釋至刻度線,靜置 15 分鐘。用紫外可見分光光度計(jì)在 510 nm 波長處以 0.00 mL 鐵標(biāo)液為空白進(jìn)行參比校正,測定樣品的吸光度,并通過標(biāo)準(zhǔn)曲線求出樣品中鐵的含量,平行做三次取平均值。實(shí)驗(yàn)測得該獼猴桃中鐵的含量為 0.1383 mg/g。
2 影響因素的討論與結(jié)論
2.1 還原劑加入量對實(shí)驗(yàn)測定的影響
取 7 個(gè) 25 mL 容量瓶,在每一個(gè)容量中準(zhǔn)確移取 2.00 mL 鐵的標(biāo)準(zhǔn)溶液,然后再依次加入 5.00 mL 乙酸-乙酸鈉緩沖溶液 2.00mL 鄰二氮菲,最后依次分別加入 1.00 mL、2.00 mL、3.00 mL、4.00 mL、5.00 mL、6.00 mL、7.00 mL 抗壞血酸,最后定容至刻線,搖勻放置 15 min 后于 510 nm 處測其吸光度。
2.2 顯色劑加入量對實(shí)驗(yàn)測定的影響
取 7 個(gè) 25 mL 容量瓶,在每一個(gè)容量中準(zhǔn)確移取 2.00 mL 鐵的標(biāo)準(zhǔn)溶液,然后依次加入 5.00 mL 乙酸-乙酸鈉緩沖溶液、2.00 mL 抗壞血酸、最后分別加入 1.00 mL、2.00 mL、3.00 mL、4.00 mL、5.00 mL、6.00 mL、7.00 mL 鄰二氮菲,定容至刻度線,搖勻,放置 15 min 后于 510 nm 處測其吸光度。
2.3 放置時(shí)間對實(shí)驗(yàn)測定的影響
取 7 個(gè) 25 mL 容量瓶,在每一個(gè)容量中準(zhǔn)確移取 2.00 mL 鐵的標(biāo)準(zhǔn)溶液,然后再依次加入 5.00 mL 乙酸-乙酸鈉緩沖溶液 2.00 mL 抗壞血酸,2.00 mL 鄰二氮菲溶液,最后用蒸餾水定容至刻度,搖勻,分別放置 15 min、20 min、25 min、30 min、35 min、40 min、45 min 后于 510 nm 處測其吸光度。
2.4 反應(yīng)溫度對實(shí)驗(yàn)測定的影響
取 7 個(gè) 25 mL 容量瓶,在每一個(gè)容量中準(zhǔn)確移取 2.00 mL 鐵的標(biāo)準(zhǔn)溶液,然后再依次加入 5.00 mL 乙酸-乙酸鈉緩沖溶液 2.00 mL 抗壞血酸,2.00 mL 鄰二氮菲溶液,最后用蒸餾水定容至刻度線,搖勻,分別放在 15 ℃、20 ℃、25 ℃、30 ℃、35 ℃、40 ℃、45 ℃恒溫水浴鍋中,放置 15 min 后于 510 nm 處測其吸光度。
3 結(jié)語
本方法以抗壞血酸為還原劑,鄰二氮菲為顯色劑,在 510 nm波長處測得三江獼猴桃中鐵元素含量為 0.1383 mg/g,說明三江獼猴桃中鐵元素含量較高,該種獼猴桃鐵含量僅次于紅棗中的鐵元素,缺鐵的大眾朋友可以多吃該種獼猴桃來補(bǔ)充鐵元素含量。本方法操作簡便,實(shí)用范圍廣,準(zhǔn)確度高、精密度好,重現(xiàn)性好,回收率高,為消費(fèi)者和獼猴桃加工企業(yè)提供參考依據(jù)。
聲明:本文所用圖片、文字來源于《中國食品檢測》,版權(quán)歸原作者所有。如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題,請與本網(wǎng)聯(lián)系
相關(guān)鏈接:維生素,酶,亞鐵