如圖1所示,固定其他發(fā)酵因素的情況下,隨著初始乙醇濃度的增加,產(chǎn)酸量呈先增加后減少的趨勢,初始乙醇濃度對果醋發(fā)酵影響顯著(P<0.05)。在初始乙醇濃度小于7%時,產(chǎn)酸量隨濃度升高而增加;超過7%產(chǎn)酸量開始下降但仍高于乙醇濃度為5%和6%,可能是在乙醇濃度低時,沒有構(gòu)成滿足醋酸菌生長的條件,而乙醇濃度增高時,醋酸菌活性又被抑制,從而產(chǎn)酸量呈先上升后下降的趨勢。并且經(jīng)多重比較分析,初始乙醇濃度為7%時產(chǎn)酸能力較強,對果醋發(fā)酵的影響相比其它濃度最為明顯。因此,初始酒精濃度為7%是最優(yōu)條件,并將其作為響應(yīng)值,6%、7%、8%三個初始乙醇濃度為響應(yīng)面試驗中的三個水平。
如圖2所示,不同發(fā)酵pH對果醋發(fā)酵影響顯著(P<0.05),產(chǎn)酸量在pH為5.0時達到峰值,小于5.0時隨pH增加而增加,大于5.0時逐漸減少。原因可能是pH為4.0、4.5和5.5、6.0沒有為醋酸發(fā)酵創(chuàng)造良好的條件,抑制了醋酸菌體中的酶活性,阻礙了醋酸菌的生長繁殖和代謝,導(dǎo)致醋酸轉(zhuǎn)化酒精的能力降低,產(chǎn)酸量過低。經(jīng)多重比較分析,pH5.0時產(chǎn)酸量高于其它pH。因此,發(fā)酵pH5.0最佳,最終選擇pH為4.5、5.0、5.5作為響應(yīng)面試驗的三個水平。
如圖3所示,不同醋酸菌接種量對果醋發(fā)酵影響顯著(P<0.05)。接種量10%時果醋產(chǎn)酸量最大,低于10%產(chǎn)酸量隨接種量增加而增大,高于10%產(chǎn)酸量開始呈現(xiàn)下降趨勢。可能是醋酸菌接種量過少時,發(fā)酵液中菌體不足,不能徹底發(fā)酵;而接種量過高時,發(fā)酵液中菌種增加,從而耗費大量的營養(yǎng)物質(zhì),而醋酸菌繁殖過快使得發(fā)酵后期發(fā)酵液中無微生物存在,進而產(chǎn)酸量降低。經(jīng)多重比較得到接種量10%對醋酸發(fā)酵的影響更顯著(P<0.05)。因此確定接種量10%為最佳,選擇8%、10%、12%三個接種量進行響應(yīng)面試驗分析。
如圖4所示,發(fā)酵溫度對果醋發(fā)酵影響顯著(P<0.05)。28~32℃范圍內(nèi)果醋產(chǎn)酸量隨溫度升高而逐漸增大,溫度超過32℃,產(chǎn)酸量開始下降,溫度越高產(chǎn)酸量越低??赡苁菧囟冗^低時,醋酸菌中酶活性不夠,不足以充分發(fā)酵;而溫度過高會使醋酸菌中的酶活性失活,加速醋酸菌生長,提前老化,從而導(dǎo)致果醋產(chǎn)酸量降低,影響發(fā)酵效率。經(jīng)多重比較得到發(fā)酵溫度為32℃對醋酸發(fā)酵影響最為顯著(P<0.05),最終選擇32℃為響應(yīng)值,30、32、34℃為三個水平進行響應(yīng)面試驗分析。
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