一、方法選擇的依據(jù)

長期以來，測定粗纖維常用酸(H2SO4 )堿(NaOH)交替浸煮法。該法操作手續(xù)冗長，測定條件不易控制，而且試樣經(jīng)沸熱NaOH溶液處理時，木質(zhì)素有不等比例的溶解，使粗纖維的測得值偏低，從而使“無氮浸出物”含量偏高。

范蘇士特的酸性洗滌劑法(ADF)操作較簡便，是一個快速的方法。測得的“酸-洗滌劑纖維”較前法為高。酸-洗滌劑法對纖維素的回收率以及它的結(jié)果與樣品的消化率之間相關(guān)系數(shù)都高于前法。采用酸性洗滌劑法，必要時還可以接著分離測定酸不溶性木質(zhì)素。此法現(xiàn)已得到美、英等國的公認(rèn)。

二、方法原理

季按鹽[例如+六烷基三甲基溴化銨(Cetyltrimethly ammonium bromide，簡稱CTAB)],是一種表面活性劑，在硫酸溶液[c(H2SO4)=0.5mol·L-1]中能有效地使動物飼料、植物樣品中蛋白質(zhì)、多糖、核酸等組分水解、濕潤、乳化、分散，而纖維素及木質(zhì)素則很少變化。酸一洗滌劑法就是利用這個原理.將試樣用CTAB的H2SO4溶液(酸-洗滌劑)煮沸l(wèi)h，過濾，洗凈酸液后烘干，根據(jù)殘渣的質(zhì)量計算酸性洗滌劑纖維(%)。

本法適用于谷物及其加工品、飼料、牧草、果蔬等植物莖稈，葉、果實以及經(jīng)測定粗脂肪后的任何試樣中粗纖維的測定。

三、儀器及設(shè)備

回流裝置。250mL玻璃三角瓶上附橡皮塞及冷凝玻瑞管八號玻璃濾器((40mL～50mL )，或古氏坩堝;真空泵抽濾裝置。

四、試劑

（1）酸性洗滌劑溶液｛p[CH3CH2)15(CH2)3N·Br]=20g·L-1,c(H2SO4)=0.50mol·L-1｝:稱取十六烷基三甲基溴化銨(化學(xué)純)20g加到1000 mL硫酸溶液[c(H2SO4)=0.50mol·L-1〕中，搖動，使之溶解;

（2）酸洗石棉。

五、操作步驟

稱取通過1mm篩的風(fēng)干試樣1.000g或相當(dāng)量的鮮樣，放入250 mL三角瓶中，在室溫下加入酸性洗滌劑溶液100 mL。加熱，使之在5min～10min內(nèi)煮沸。剛開始沸騰時計算時間，裝上冷凝管回流60min。注意調(diào)節(jié)加熱溫度，使整個回流過程始終維持微沸狀態(tài)。

取下三角瓶，轉(zhuǎn)動內(nèi)容物，用已知質(zhì)量(m1)的玻璃坩堝式濾器或古氏坩堝減壓抽濾。過濾時，先用傾瀉法過濾，將酸性洗滌劑溶液濾干后，用玻棒將殘渣攪散，加入900C～100℃的熱水傾洗3次～4次，減壓抽濾，洗凈酸液后將殘渣轉(zhuǎn)移入濾器中，重復(fù)水洗，仔細(xì)沖洗濾器的內(nèi)壁，至酸-洗滌劑洗盡為止。用丙酮同樣洗滌濾器兩3次，直到濾出液無色為止。抽干濾渣中的丙酮，放入1000C鼓風(fēng)式干燥箱中干燥3h，冷卻后稱其質(zhì)量(m2)。

六、結(jié)果計算

粗纖維（酸性洗滌纖維）%=

式中;m2——粗纖維和空坩堝質(zhì)量，g;

m1——空坩堝質(zhì)量，g;

m ——烘干樣品質(zhì)量,g.

兩次平行測定結(jié)果允許差

樣品中酸性洗滌纖維%      允許差%

＜5                         0.5

5～25                      1

＞25                         2

參考資料：土壤農(nóng)業(yè)化學(xué)分析方法